紫花苜蓿转录因子MsDREB1基因表达产物的亚细胞定位

利用生物信息学方法对紫花苜蓿MsDREBl进行了生物信息学分析．结果表明,该序列舍有AP2典型结构域,在N端存在核定位信号．为进一步验证该基因功能,构建MsDREBl与绿色荧光蛋白（GreenFluorescentProtein,GFP）基因融合的植物表达载体pCAMBIAl302-MsDREBl,再利用基因枪将其转入洋葱表皮细胞,在共聚焦扫描显微镜下观察MsDREBl基因表达产物在洋葱表皮细胞中的亚细胞定位．结果表明,MsDREBl基因表达产物定位于细胞核中,符合DREB家族转录因子特性．     

基于概率神经网络的蛋白质亚细胞定位

文章通过对氨基酸词频的分析，应用概率神经网络来自动地进行蛋白质亚细胞定位．对于真核生物蛋白质的预测精度达到了82％。对于原核生物的预测精度则达到了92%．而且对于蛋白质序列N端缺失的情况有很好的鲁棒性．     

拟南芥中一个镍离子转运蛋白的亚细胞定位

离子的跨膜转运是细胞获取养分的重要环节,亦是植物在组织和器官水平上进行养分吸收运移的基础．在植物中镍（Ni）元素主要以Ni^2＋的形式存在,并通过Ni^2＋转运蛋白将其跨膜转运至相应的组织器官,参与氢酶和脲酶的合成．生物信息学分析表明,拟南芥中一个Ni^2＋转运蛋白AT2G16800含有叶绿体定位信息．克隆该基因5’端编码转运肽的272bp片段,与绿色荧光蛋白（GFP）基因融合后,在拟南芥中高效表达,对其进行了亚细胞定位的研究．转基因植株通过共聚焦扫描显微镜的观察,发现GFP荧光信号只存在于叶绿体中,该结果表明A他G16800为叶绿体蛋白．     

水稻中两个同源异型结构域转录因子的亚细胞定位

为了对水稻同源异型结构域转录因子HD-ZipⅢ家族中的HDZ1和HDZ2进行亚细胞定位,利用RT-PCR技术从水稻cDNA中扩增HDZ1和HDZ2的编码区(去除终止密码子序列),与绿色荧光蛋白GFP编码框融合,构建2个转录因子的瞬时表达载体,采用农杆菌介导的转化方法转化至烟草中进行瞬时表达分析.结果表明:PCR扩增所得为目的基因片段HDZ1和HDZ2;二者与载体质粒pCAMBIA35S-GFP连接获得的融合表达载体成功移至烟草中并表达;确定HDZ1主要定位于烟草叶片的气孔中,而HDZ2定位于烟草表皮细胞的细胞膜上.二者在亚细胞中的定位不同,可能在水稻生长发育中所起的作用也不相同.     

马铃薯StHb1蛋白的亚细胞定位

为了研究马铃薯StHb1蛋白的亚细胞定位情况,采用RT-PCR技术克隆到马铃薯StHb1基因cDNA序列,并成功构建了StHb1基因与绿色荧光蛋白基因的融合表达载体pBI121-StHb1-GFP.利用农杆菌介导法将重组载体转化洋葱内表皮细胞,通过荧光显微镜观察融合蛋白的瞬时表达以确定StHb1蛋白在细胞内的分布.结果表明StHb1蛋白主要分布于细胞核中.     

Subcellular localization and functional analyses of structural domains of COP1 in transgenic tobacco

Plants have evolved an extremely exquisite light signal regulatory network to adapt to the changing ambient light conditions, in which COP1 plays a critical role of the light signal transduction. Based on the cloned pea COP1 cDNA sequence and its protein structure, four individual gene fragments encoding different structural domains of the COP1 were designed to fuse to the GFP gene. The plant expression vectors containing these fusion genes as well as the COP1GFP fusion gene were constructed and used to transform tobacco by Agribacterium as confirmed by Southern analyses. Antibodies were raised against the recombinant GFP-COP1 overproduced in Escherichia coli. Immunoblotting results demonstrated that all of the fusion genes were constitutively expressed in transgenic tobacco plants. We systematically investigated the different subcellular localization of these fusion proteins and the resulting phenotypic characteristics of these transgenic plants under light and dark conditions. Our data show that (1) the molecular mass of the tobacco endogenous COP1 protein is 76 kD. It is constitutively expressed in all of the tested tissues and the total cellular content of COP1 protein is not noticeably affected by light conditions. (2) The nuclear localization signal of COP1 plays a critical role in regulation of its nuclear-cytoplasmic partitioning. The subcellular localization of the COP1 protein containing nuclear localization signal is regulated by light in the epidermal cells of leaves, but, it is located in nucleus constitutively in root cells. (3) The coiled-coil domain is very critical to the function of COP1 protein, while the zinc binding RING finger domain only plays a supportive role. (4) The WD-40 repeats domain is essential to the COP1 function, but this domain alone does not affect photomorphogenesis. (5) Overexpression of COP1 protein not only inhibits the photomorphogenesis of the stems and leaves of the transgenic tobacco, but also results in the generation of short and clustered roots. In contrast, overexpression of COP1 protein without WD-40 repeats domain promotes the photomorphogenesis process in the stems and leaves and lead to root elongation and lack of lateral roots. The COP1-COP1 interaction happens not only in the nucleus, but also in cytoplasm.     

拟南芥中一个参与热胁迫应答基因功能的初步研究

在拟南芥中发现了一个受热诱导的基因At4g19430,经Real time PCR分析表明该基因受热诱导后表达量显著升高.组织特性的分析发现其在拟南芥不同组织中均有表达,但在叶中表达量最高.亚细胞定位结果表明At4g19430蛋白定位在细胞质中.筛选并鉴定了该基因的突变体,并分析了其在热胁迫时的表型,结果表明该基因的突变体对热胁迫非常敏感,在热胁迫的条件下突变体存活率明显下降.     

褐藻寡糖对小鼠低温力竭游泳运动的影响及机制

目的:探讨褐藻寡糖对小鼠低温力竭游泳运动的影响及机制。方法:将小鼠随机分成5组,空白组,对照组,3个实验组,空白组和对照组用生理盐水灌胃,3个实验组分别用0.75%、1.5%、3%不同浓度的褐藻寡糖进行灌胃,每只每天灌胃量0.3～0.5 mL,连续灌胃4周。之后对照组和试验组每组取小鼠7只,分别在(5±1)℃环境条件下进行无负重力竭游泳运动试验,观察并记录游泳力竭时间及行为改变。待小鼠死亡后(空白组断头处死),分别取出甲状腺、肾上腺、胰腺、胸腺和脾脏,用电子天平称重,并计算其系数。系数=腺体(mg)/体重(g)×100%。结果:褐藻寡糖能提高小鼠低温力竭游泳运动时间,1.5%褐藻寡糖组较对照组差异显著(P<0.05);甲状腺、肾上腺、胰腺、胸腺和脾脏系数增大。结论:褐藻寡糖能够提高小鼠的力竭游泳运动能力,1.5%浓度为最佳;一些内分泌腺和脏器不同程度参与了小鼠低温力竭游泳运动应激反应。     

Super-resolution microscopy of live cells using single molecule localization

The resolution of conventional light microscopy is insufficient for subcelluar studies. The invention of various super-resolution imaging techniques breaks the diffraction barrier and pushes the resolution limit towards the nanometer scale. Here, we focus on a category of super-resolution microscopy that relies on the stochastic activation and precise localization of single molecules. A diversity of fluorescent probes with different characteristics has been developed to achieve super-resolution imaging. In addition, with the implementation of robust localization algorithms, this family of approaches has been expanded to multi-color, three-dimensional and live cell imaging, which provides a promising prospect in biological research.     

壳聚糖水解技术对超级电容器电极材料性能的影响

壳聚糖是一类具备天然氮元素的海洋生物质,可作为制备超级电容器的前驱体,但溶解性质限制了其反应均匀性。本研究以壳聚糖为原料,利用自主研发的水解法制备壳寡糖均相溶液,作为前驱体制备超级电容器电极材料。实验采用了三电极体系对该电极材料多性能进行表征,包括循环性能、阻抗、元素分析、SEM、TEM、XRD等,探讨了水解工艺对电极材料综合性能的影响,并且与出发原料壳聚糖进行对比。结果表明：壳寡糖电极材料性能有了明显的提升,在电流密度为0.5 A g-1时比电容高达227.5 F g-1,具有优秀的循环稳定性,1000圈循环后比电容仍未有明显下降,且电极的膜阻抗和电荷转移电阻较小,说明该工艺制备的壳寡糖具有很好的超级电容器方面应用前景。     

魔芋低聚糖降低糖尿病小鼠血糖和胆固醇效应的研究

主要研究魔芋低聚糖对实验性糖尿病小鼠血糖浓度的影响 .先用 5 %四氧嘧啶水溶液腹腔注射(ip)诱发小鼠糖尿病 ,再用不同剂量的魔芋低聚糖水溶液灌胃 (ig) ,先后测定小鼠血糖值及某些血液成分的含量 .实验 2周后结果显示 ,灌服了低、高剂量魔芋低聚糖液的糖尿病小鼠血糖值分别为 1 0 .4 1± 2 .2 3mmol L、9.81± 1 .67mmol L,与未用药的糖尿病组 (1 7.1 7± 3 .89mmol L)比较明显降低 (P <0 .0 1 ) ,同时血液中某些成分的含量改善 .提示魔芋低聚糖有明显的降血糖及改善血液成分的作用 ,为利用其开发降糖保健食品及药品提供了实验依据     

壳聚糖二元酸盐抗菌机理的研究

考察了壳聚糖二元酸盐对大肠杆菌的抗菌性能,初步探讨壳聚糖二元酸盐对大肠杆菌的抗菌机理,结果表明,壳聚糖二元酸盐的抗菌活性是通过与细菌细胞膜产生强烈相互作用而实现的,这种相互作用导致细菌细胞膜的通透性增加并失去完整性,细菌因细胞质外流,DNA等物质渗漏而死亡。     

低聚果糖和低聚异麦芽糖促进斑马鱼肠道蠕动作用的研究

探讨基于斑马鱼模型的低聚果糖及低聚异麦芽糖对肠道蠕动的促进作用。选用发育正常的5 d的斑马鱼幼鱼,各实验组分别加入不同浓度的低聚果糖和低聚异麦芽糖溶液,培养24 h后,在显微镜下观察其对斑马鱼肠道蠕动次数的影响。实验结果表明,125~500 mg/mL的低聚果糖和低聚异麦芽糖均对斑马鱼肠道蠕动有促进作用,蠕动次数与浓度成正相关性。相同浓度条件下,低聚果糖较低聚异麦芽糖促进斑马鱼肠道蠕动的作用更明显。采用斑马鱼动物模型可实现促进肠蠕动药物的早期、快速筛选。     

革兰氏阴性菌中蛋白质亚细胞定位预测

根据革兰氏阴性菌蛋白不同亚细胞位置、其一级结构中氨基酸含量、氨基酸的关联性及亲疏水性的不同，利用最小离散增量的方法，分别以20个氨基酸组份、400个氨基酸二联体组份及氨基酸亲疏水性在蛋白质上的分布为参数构成离散源，对革兰氏阴性菌蛋白的5类亚细胞定位进行预测，分别用self—consistency方法和Jack-knife方法预测，均取得了较高的预测成功率．     

一维纳米材料中电子局域态分布

从一维纳米随机链模型出发,在考虑近邻、次近邻相互作用的情况下,运用多对角全随机厄米矩阵求解方法计算了一维纳米材料的电子局域态中心位置.针对晶界无序度和晶粒大小,讨论了材料中的电子局域态分布.研究结果表明:局域态中心位置随能量的改变而改变,并且在不同的能量范围内局域态分布不同,在某些能量范围内,能量变化很小而局域位置变化很大,电子跳跃很容易发生,而在另一些能量范围内,能量变化很大但局域位置变化很小,电子跳跃难以发生,因而直接影响材料的导电、导热等性能;晶界无序度和晶粒大小对局域态分布影响很大,当晶界无序度变小时,体系趋向有序,局域态位置随能量的变化呈一定程度的周期性;而当晶粒粒径变小时,晶界的作用增强,无序作用也相应增强,局域态增多,分布密度增大.     

二次通用旋转组合设计优化杏鲍菇寡糖提取工艺

以杏鲍菇为原料,采用超声波技术辅助提取杏鲍菇寡糖.在单因素实验基础上,采用二次通用旋转组合设计优化杏鲍菇寡糖提取工艺条件.得到杏鲍菇寡糖最优提取工艺条件:杏鲍菇原液(杏鲍菇粉末∶80%乙醇溶液=1∶15,料液比g/m L)超声时间为15 min,超声温度为60℃,杏鲍菇寡糖提取得率达11.28%.     

一株生孢噬纤维菌的纤维素酶的定位研究

生孢噬纤维细菌Sporocytophaga sp.JL-01是能够降解纤维素的滑动细菌, 通过对该菌株发酵上清液、荚膜液、超声波破碎后的上清液、破碎细胞碎片及完整细胞的CMC酶活、滤纸酶活的研究,对其所产生的纤维素酶在细胞上的定位进行了研究.结果显示:生孢噬纤维细菌Sporocytophaga sp.JL-01可通过细胞质膜向细胞外分泌CMC酶,而其滤纸纤维素酶则存在于细胞质膜上.     

基于网格的无线网络室内协作定位算法

针对室内定位精度低的问题,通过多种无线网络间的协作定位,提出一种基于网格的无线网络室内协作定位算法.与区域单一定位方式不同,该算法将信号覆盖区域划分为网格的形式,获取多种信号信息,以判断网格的可定位性,并为网格内所有网络分配权值,判定是否可进行多种网络的协作定位,给出最优定位组合方案.只须在离线阶段采集室外网络信号,扩充协作定位指纹库,该算法即可直接扩展到室外定位.仿真结果表明:与单一网络定位算法以及等权分配算法相比,提出的方案不仅有效提高了定位精度,而且提高了网络覆盖区域的可定位率.