P185c—erBb—2胞外区结构域在大肠杆菌BL21中的表达分析

以PET－HT为表达载体,探讨在大肠杆菌BL21中高效表达P185c-erBb-2胞外区结构域蛋白的最佳条件,经SDS－PAGE与软件分析,确定其最佳表面时间为3h,当菌液密度为0．7时,所表达的蛋白含量最高,而PTG在一定浓度范围内对表达含量不产生影响。     

人类新基因RMND5A的克隆及功能研究

克隆了一个新的人类Lish/CTLH结构域基因,经国际基因命名委员会批准命名为RMND5A.该基因位于染色体2p11.2,长3 239 bp,编码391个氨基酸,其结构域从N端起依次为LisH、CTLH与CRA.RT-PCR分析表明该基因在人类早期胚胎的多个组织中有表达,在心脏、肝和肾中的表达水平较强.对该基因的蛋白进行了表达并制备了多克隆抗体.荧光素酶活性测定分析表明,在COS7细胞中过表达蛋白可以使MAPK信号途径的两个下游转录因子ELK-1和AP-1的转录活性显著下降,表明RMND5A通过MAPK信号途径参与了对细胞生命活动的调控过程.     

火焰原子吸收法间接测定α－氨基酸的研究

本文研究了α－氨基酸与水杨醛和醋酸铜定量生成席夫碱－铜（Ⅱ）配合物的最佳条件，提出了用氯仿将过量水杨醛还原的铜与席夫碱－铜（Ⅱ）配合物离心分离，然后用火焰原子吸收法在３２４．８ｕｍ处测定水相中的铜，从而间接求出α－氨基酸的含量．     

甲烷二氧化碳转化制合成气的研究--部分失活CN-16催化剂再生条件的选择

本文采用一种新型的再生剂对部分失活ＣＮ－１６催化剂进行再生，并对部分失活ＣＮ－１６催化剂再生条件进行了选择。其最佳再生条件为：再生剂中Ａ的摩尔百分含量为５ｍｏｌ％～１０ｍｏｌ％，再生温度为８５０℃或９００℃。部分失活ＣＮ－１６催化剂再生后，其催化性明显高于再生前，并且接近新ＣＮ－１６催化剂活性。     

藜麦WOX转录因子家族的鉴定及表达分析

为揭示藜麦WOX基因家族的功能,为藜麦耐低氮品种的培育提供参考,利用生物信息学方法,对藜麦WOX基因进行全基因组鉴定,并对其理化性质、系统发育、基因结构、保守结构域、保守基序、组织表达和响应氮胁迫的表达进行分析。研究结果表明:藜麦中共有13个WOX转录因子,蛋白长度159～676 aa,相对分子质量18 510～76 730,等电点5.27～9.56;每个成员含有1～4个内含子及2～5个外显子, WOX蛋白都具有由34～60个氨基酸组成的Homeobox保守结构域。系统进化树显示,来源于拟南芥、水稻和藜麦的39个WOX基因分为3组,每一组都含有3个物种的家族成员,同一个物种的WOX基因具有更近的遗传距离。组织表达热图显示,藜麦WOX基因组织表达特异性明显,在茎中的表达量最高,其次是种子和叶,在幼苗中的表达量最低。AUR62031363和AUR62035466对氮胁迫的响应最为显著。     

化学合成虎纹捕鸟蛛毒珠—Ⅱ基因的克隆

报道了全化学合成虎纹捕鸟蛛毒素－Ⅱ基因,在克隆载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔ中的克隆。但ＨＷＴＸ－Ⅱ基因在表达载体ｐＧＥＸ－ＫＴ中几乎无表达,根据以前成功地表达全化学合成虎纹捕鸟蛛毒素－Ⅰ基因的实验结果,对在同一表达系统所构建的ＨＷＴＸ－Ⅰ与ＨＷＴＸ－Ⅱ基因的表达产物进行比较,认为ＨＷＴＸ－Ⅰ与ＨＷＴＸ－Ⅱ在原核表达系统的表达行为上的差异有助于我们进一步探讨ＨＷＴＸ－Ⅱ的活性。     

快速溶胶-凝胶法制备SiO2气凝胶的研究

以正硅酸乙酯（TEOS）为原料，以乙醇为溶剂，以盐酸和氨水为催化剂，用溶胶－凝胶法制得了SiO2气凝胶，大大加快了溶胶－凝胶的反应速率，使得凝胶时间减少至几分钟甚至于更短，TEM测试结果表明所制备的SiO2气凝胶具有纳米多孔结构（骨架颗粒为80nm)实验对溶胶－凝胶过程在不同条件下进行了研究，并对其凝胶过程作了初步探讨，得出了最佳工艺条件。     

人类基因ZNF569结构域在MAPK信号途径中的作用

有丝分裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号途径是细胞信号转导过程的重要组成部分，MAPK将膜转导蛋白与其细胞内的关键调控靶蛋白联系起来，从而介导胞外的多种信号并将这些信号级联放大后传递给相应的下游因子，通过激活包括SRE，ELK-1，AP-1等在内的多种转录因子，最终开启细胞特定功能基因的表达，锌指蛋白是人类最大的基因家族之一，其蛋白产物主要通过与DNA相互作用而起转录因子作用，调节靶基因的表达以适应生物体发育、分化、成熟过程的需要，运用MAPK信号途径对锌指基因ZNF569的结构域进行了转录活性分析，分析表明在COS-7细胞中过表达ZNF569蛋白可以使MAPK信号途径的两个下游转录因子AP-1和SRE的转录抑制活性显著下降，ZNF569在核质内的亚细胞定位分析进一步证明了其作为转录因子的作用，对ZNF569的分段report assays分析表明，ZNF569可能通过KRAB框和C2H2锌指结构域行使其抑制转录的作用，这些结果表明，ZNF569可以通过MAPK信号途径参与了对细胞生命活动的调控过程。     

草鱼(Ctenopharyngodon idella)组织蛋白酶L基因克隆及表达特性分析

为探究组织蛋白酶L(Cathepsin L,CtsL)是否在草鱼(Ctenopharyngodon idella)体内发挥免疫功能,根据已构建的草鱼肌肉转录组数据库中unigene序列,采用RACE技术首次克隆得到全长为1 496 bp的草鱼组织蛋白酶L基因(CiCtsL)cDNA序列。序列分析和同源建模显示该基因编码的蛋白具备组织蛋白酶前体抑制结构域I29和木瓜蛋白酶家族半胱氨酸蛋白酶Pept_C1结构域。系统进化分析表明,CiCtsL与斑马鱼CtsL聚为一支。CiCtsL mRNA在7个组织中均有表达,其中肝脏中的相对表达水平最高。感染GCRV后,CiCtsL在各组织中的表达量显著上调,呈现先上升后下降的趋势。研究表明CiCtsL参与了草鱼抵抗GCRV的免疫应答反应,可在草鱼先天免疫调控中发挥重要作用。     

转cry1Ab/Gc基因玉米的不同转化事件Bt蛋白表达和抗虫性分析

分析不同转化体Bt蛋白表达量和评估其抗虫性,进而筛选优异转化事件是转基因玉米新品种培育研究中的重要环节.为分析转cry1Ab/Gc基因玉米中Bt蛋白表达特性与抗虫性的关系,筛选优秀转化事件,研究以三个转化事件HG-1、HG-2、HG-3为试验材料,利用ELISA检测、玉米螟生测等技术,在室内和田间详细分析心叶期和抽丝期玉米抗虫蛋白表达量,并评估抗虫性.研究结果表明,同一转化事件不同组织或器官Cry1Ab/Gc蛋白含量存在显著差异,均表现为叶茎根;不同时期叶片Cry1Ab/Gc蛋白含量存在显著差异,表现为抽丝期心叶期;不同转化事件间,心叶期转化事件HG-1的叶片、抽丝期转化事件HG-1和HG-2的茎中Cry1Ab/Gc蛋白的含量明显高于其他材料.室内和田间亚洲玉米螟生测试验结果表明:不同转化事件抗虫性差异显著,转化事件HG-1在心叶期和抽丝期亚洲玉米螟抗性显著高于其他两个玉米转化事件,与该时期Cry1Ab/Gc蛋白高表达的试验结果一致.本研究结果证实不同玉米转化事件Bt蛋白表达量显著差异,心叶期和抽丝期Bt蛋白表达量与亚洲玉米螟抗性呈正相关,可以作为抗虫转基因玉米优秀转化体初步筛选的重要技术指标,具有可操作性强、技术稳定性好、节省时间等优势,为抗虫转基因玉米新品种培育研发提供数据参考.     

1—苯基—3—甲基—4—苯氧乙酰基—5—吡唑啉酮对金属离子萃取行为的研究

本文合成了螯合萃取剂1－苯基－3－甲基－4－苯氧乙酰基－5－吡唑啉酮，并对UO2^2 、Th^4 、La^3 、Cu^2 、TiO^2 、Cr^3 6种金属离子的萃取行为进行了研究。     

MCM—48中掺杂钛对催化氧化活性的影响

以掺杂钛的ＭＣＭ－４８中介孔分子筛为催化剂,对α－十八碳醇和α－二十碳醇转化为相应酸的进行了考察,对催化性能进行了评价。结果表明,Ｔｉ－ＭＣＭ－４８催化剂钛含量对催化氧化活性有影响。     

中心体蛋白centrin2稳定高表达慢性髓原白血病细胞系的构建及鉴定

将质粒转染慢性髓原白血病细胞K562,经过G418筛选获得稳定高表达centrin2的细胞株.通过免疫荧光显微镜观察细胞的变化,使用蛋白免疫印迹方法鉴定细胞株内centrin2蛋白的过表达效果,并通过细胞免疫荧光染色技术方法观察中心体上centrin2含量的改变.成功获得了一株稳定高表达centrin2的K562细胞株(K562-GFP-centrin2)和稳定表达无意义GFP的对照细胞(K562-GFP).成功构建了稳定高表达centrin2蛋白的慢性髓原白血病细胞K562-GFP-centrin2,为细胞中心体成功的提取奠定基础.     

絮凝—缓蚀剂CMT—A2作用机理研究

在CMT－A2应用性能研究的基础上，通过红外光谱、俄 能谱、极化曲线、电镜扫描等检测分析，深入研究了CMT－A2的作用，进一步提出和完善了“絮体－金属表面双成膜”的絮凝－缓蚀机理，为今后开拓机理研究提供了有益的依据。     

阴离子交换树脂催化丙醛缩合制备2-甲基-2-戊烯醛

研究了丙醛双分子缩合剂2－甲基－2－戊烯醛的反应，以阴离子交换树脂作催化剂，重点考察了反应温度、反应时间、阴离子交换树脂／丙醛（摩尔比）、溶剂用量对目标产物2－甲基－2－戊烯醛产率的影响，确定了制备2－甲基－2－戊烯醛的优化反应条件：温度30℃，时间2h，阴离子交换树脂／丙醛10mmol/20mmol,溶剂苯5mL，目标产物2－甲基－2－戊烯醛的产率可达93．54％。     

G-8菌株原生质体形成和再生条件的研究

以浮游球衣细菌Ｇ－８菌为出发菌株,有杉甘氨酸－溶菌酶－ＥＤＴＡ方法,研究了各种因素对原生质体形成和再生的影响。在原生质体形成和再生的最佳条件下制备原生质体,Ｇ－８菌原生质体形成率和一率分别达９６．８％和２９．８％,通过光学显微镜技术,观察了原生质体形成和再生的过程。     

铝—桑色素—Triton X—100—β—环糊精荧光光度法的研究及应用

研究了测定铝的荧光光度法，在β环糊精（β－CD）和Triton X－100存在下，桑色素（Morin）与铝的反应条件，在pH3.94的HAC缓冲溶液介质中，铝的含量在0－3.0μg/25ml范围内与荧光强度呈线性关系，最低检测限为0.66ng/ml，本法灵敏度高，选择性好，应用于8201铸造铝铜合金含量的测定，相对误差为3.2％,结果令人满意。     

光谱修正应用于废水中痕量镍测定

在SDS存在下,pH6.9磷酸盐缓冲溶液中,镍与5－（5－溴－2－吡啶偶氮）－2,4－二甲基苯（5－Br-PADAT)反应生成黄色显色液。本文在此显色反应基础上,根据β修正光度理论研究了测定镍的新方法。该方法能准确扣除反应体系中剩余5－Br-PADAT的吸光干扰。使β修正吸光度与镍浓度（x)呈现良好线性关系,且分析灵敏度高。实验测得样品分析相对标准偏差RSD≤1．3％,加标回收率96．0％－108％。镍最低检测浓度为0．006μg/ml。该方法适于环境水体中痕量镍的测定。     

核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)arom基因3′-末端的克隆与分析

根据五功能AROM蛋白保守区域设计简并引物,从核盘菌基因组中获得了一段大小为1626bp的DNA片段。结合Southern杂交结果,用反向PCR克隆了arom基因3′-末端4104bp的序列。序列分析结果表明,该DNA片段推测的氨基酸序列与烟曲霉、粗糙脉孢霉、构巢曲霉和粟酒裂殖酵母等的AROM蛋白同源,包含了部分5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合成酶(EPSP合成酶)结构域、莽草酸激酶结构域、脱氢奎尼酸脱水酶(脱氢奎尼酸酶)结构域和脱氢莽草酸脱氢酶结构域,其中含有EPSP合成酶模式2(255—273)、莽草酸激酶模式(426—453)和Ⅰ型脱氢奎尼酸酶活性位点模式(659-687)。     

CH4-CO2反应的催化反应动力学研究——反应级数的确定

采用Ni/α-Al2O3和工业HSD－2型催化剂对甲烷－－二氧化碳重整反应进行了动力学研究，结果表明反应中CO的速率方程为：Rco=κPCH4Pco2(CO2的分太范围：12.5-30kPa；温度范围：1123－1173K）和Rco=κPCH4(CO2的分压范围：30－45kPa；温度范围：1123－1173K），同时测定了不同温度下反应的速率常数。