酶联免疫分析法在奥运食品安全检测中的应用

食品中的农兽药残留不仅会对食用者产生一定的身体伤害,还可能会成为运动员误用兴奋剂的潜在来源,因此需要建立灵敏、快速的分析方法,确保奥运食品安全。本文介绍了酶联免疫的技术原理及其在食品农兽药残留检测上的应用,探讨了酶联免疫检测技术在应用上存在问题,展望了酶联免疫技术未来发展的新方向。     

化学发光酶联免疫分析测定血清中乙型肝炎表面抗原

提出了曙红（Eosin)-H2O-HRP-Luminol化学发光体系测定HRP（辣根过氧化物酶）及HRP标记物的方法。将该方法与免疫分析技术相结合成功地用于测定病人血清中乙型肝炎表面抗原的含量，测定结果与经典的ELISA显色光度法进行对照,二者相关性好。     

化学发光法测定盐酸洛美沙星胶囊

在酸性条件下,盐酸洛美沙星对Ce(IV)-Na2SO3微弱化学发光体系具有很强的增敏作用,据此建立了测定盐酸洛美沙星的新方法.该方法对盐酸洛美沙星的检出限为0.005 0 mg.L-1,线性范围是0.01~10.0 mg.L-1,相对标准偏差(n=10,C=1.0 mg.L-1)为1.1%,对盐酸洛美沙星的两种胶囊的测定结果较为满意,回收率在96%~106%之间.     

偶合放大反应化学发光酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎E抗体

提出了一种偶合放大反应化学发光酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎Ｅ抗体的新方法．本法对ＨＢｅＡｂ－ＨＲＰ测定的灵敏度比ＨＢｅＡｂ－ＨＲＰ催化Ｌｕｍｉｕｏｌ－Ｈ２Ｏ２直接化学发光体系高２．５×１０２倍．对ＨＢｅＡｂ的测定采用竞争性抑制法，对ＨＢｅＡｂ阳性对照血清的测定范围为１：１～１：３２７６８，用所建立的方法对实际病人血清样品进行了测定，并与现行的ＥＬＩＳＡ显色光度法进行对照，两种方法相关性很好．     

AOZ化学发光酶联免疫检测试剂盒的研制

以呋喃唑酮代谢物(AOZ)和卵清蛋白(OVA)偶联物为包被抗原,与AOZ样品或标准品竞争呋喃唑酮多克隆抗体,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记羊抗兔抗体(IgG),研制AOZ的化学发光酶联免疫检测试剂盒。以鲁米诺-过氧化氢为发光底物进行化学发光酶联免疫检测。结果表明:试剂盒分析灵敏度为0.005μg/L,比传统的ELISA试剂盒高出一个数量级,拥有更低的检测限,批内变异系数为2.1%～7.9%,批间变异系数为5.2%～9.5%,批内回收率为93%～113%,批间回收率为94%～110%。与呋喃西林代谢物(SEM)、呋喃它酮代谢物(AMOZ)及呋喃妥因代谢物(AHD)之间无明显交叉反应。此试剂盒可用于水产品中AOZ的检测。     

酶联免疫法检测虾肉中氯霉素

为保证水产品的质量安全,用酶联免疫法快速检测虾肉中氯霉素残留量.结果表明:该法平均检测下限为0.012 5μg/kg,回收率为88.1%～94.4%,RSD为2.98%～6.67%,是虾肉中氯霉素残留量检测的理想方法.     

化学发光免疫分析法在梅毒螺旋体抗体检测中的应用探究

探究化学发光免疫分析法（CLIA）在梅毒螺旋体抗体（TP-Ab）检测中的应用效果。选择2019年2月—2021年5月来医院进行TP-Ab检测的258例患者,采集其血清标本,均采用CLIA、酶联法（ELISA）、甲苯胺红不加热血清反应素试验（TRUST）对血清TP-Ab进行检测。以明胶颗粒凝集试验（TPPA）为金标准,对三种检测方法的检验效能予以比较。CLIA对TP-Ab检测的灵敏度、特异度、准确度分别为100.00%、99.43%、99.61%,ELISA分别为93.98%、98.29%、96.90%,TRUST分别为83.13%、86.86%、85.66%。CLIA、ELISA检测的灵敏度、特异度、准确度均明显较TRUST高（P均<0.05）,CLIA灵敏度、准确度明显较ELISA高（P均<0.05）;CLIA、ELISA和TPPA检测结果的一致性良好（Kappa=0.991、0.928）,TRUST和TPPA检测结果的一致性中等（Kappa=0.681）。和ELISA、TRUST相比,CLIA检测TP-Ab的效能更高,且由于具有自动化、检测速度快等特点,故在TP-Ab检...     

毛细管电泳免疫高灵敏化学发光检测生物活性分子及应用研究

国家自然科学基金项目“毛细管电泳高灵敏化学发光检测及其应用研究”（项目批准号：20575056）由我校化学化工学院教授刘彦明博士主持。     

用酶联免疫吸附试验诊断蓝氏贾第鞭毛虫病免疫价值的研究

用蓝氏贾第鞭毛虫纯培养虫株和超声粉碎可溶性虫体部分作为抗原,采用ELISA方法检测人体感染蓝氏贾第鞭毛虫血清免疫抗体并讨论其寄生虫学诊断价值．检测65份成人贾第虫病血清,其中55份IgG和／或IgA阳性,阳性率84．62％．20份10岁以下儿童贾第虫病人血清无1份阳性．结果提示蓝氏贾第鞭毛虫感染产生的体液免疫反应存在有年龄依赖性,酶联免疫吸附试验用于蓝氏贾第鞭毛虫病免疫诊断具有局限性．     

一种适用于教学的酶联免疫吸附试验的抗原抗体系统制备

目的:探讨设计一种教学成本低、便于教学使用、有助于培养医学生综合实验设计能力和提高实验基本操作技能的酶联免疫吸附实验抗原抗体系统.方法:以提纯的人IgG免疫家兔获取兔抗人IgG抗体,再用其包被酶标反应板,以人血清(人IgG)作抗原,用酶标记羊抗人IgG抗体结合抗原及催化底物显色反应.结果:该双抗体夹心法,底物显色反应清楚肉眼即可作出判定,非特异干扰极小.结论:我们设计的酶联免疫吸附实验-双抗体夹心法原理清晰、便于理解和掌握、教学成本较低、结果易于观察、便于教学大量使用.     

污水处理中雌酮的定量分析

采用酶联免疫吸附检测(ELISA)试剂盒定量分析了某采用生物脱氮活性污泥工艺的污水厂中的原水、一级处理出水、二级处理出水、尾水和出水口下游受纳河水中的雌酮浓度,分析方法的定量检测限为0.5 ng/L.ELISA分析中增加的凝胶色谱净化步骤可降低E1检测值73.0%的假阳性,使其检测结果平均值从液相色谱一飞行时间质谱联用(HPLC-MS(TOF))的对照分析结果平均值的1.52倍降为1.15倍.ELISA分析检测值的假阳性与水样的污染程度呈正相关.     

Preparation of an anti-diethylstilbestrol monoclonal antibody and development of an indirect competitive ELISA to detect diethylstilbestrol in biological samples

Based on the preparation of an anti-diethylstilbestrol(DES) monoclonal antibody,a simple and convenient indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay(E...     

中国沿海贝类腹泻性贝毒的酶联免疫分析方法

为了解中国近海贝类受腹泻性贝毒污染状况,制备并应用多克隆抗体建立对腹泻性贝毒主要成分软海绵酸(OA)的间接竞争酶联免疫检测方法(idc-ELISA).应用该方法检测中国沿海双壳贝类中腹泻性贝毒的含量,并与小鼠法测试结果进行了对比.结果表明:idc-ELISA方法的检出限为0.1 ng/mL,相当于贝类样品的检出限8 ng/g;idc-ELISA方法和生物小鼠法的符合率为90%;中国沿海贝类受腹泻性贝毒污染严重,部分贝类样品的腹泻性贝毒含量超过了规定的0.2μg/g的食用安全标准.     

酶联免疫检测技术在水环境雌激素快速筛选中的应用研究

采用酶联免疫(ELISA)检测技术,对长江口水样和污水处理厂水样中的典型雌激素雌二醇(E2)进行分析,并与化学检测浓度进行验证比较.结果表明:ELISA的检测限可低至0.5 ng·L-1,试验的变异系数小于30％,具有较高的灵敏性和良好的重复性;ELISA检测长江口采集的水样中E2浓度范围在0.5 ng· L-1以下到0.7 ng·L-1,污水处理厂水样中E2浓度范围在2.5～11.5 ng· L-1,与液相色谱串联质谱( LC - MS/MS)的分析结果相比,相关系数R2为0.9147,表明两种方法具有良好的相关性;ELISA检测所需的水样量比LC - MS/MS更少,使用96微孔板可同时对43个样品进行检测,从而缩短了单个样品的分析时间,具有快速简便和经济适用性.     

铽-洛美沙星稀土敏化荧光增强法测定诺氟沙星

采用稀土敏化荧光增强法,对诺氟沙星的含量进行了测定.研究表明,在pH6.0的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中,洛美沙星能够与Tb3+结合发生共振能量转移.其最佳激发、发射波长分别为λex=320 nm,λem=545 nm.在该体系中加入诺氟沙星,可使其荧光进一步增强,据此建立了测定诺氟沙星含量的新方法.结果表明:该方法测定诺氟沙星含量的线性为4.0×10-8～1.0×10-6 mol/L;方法检出限为8.4×10-9 mol/L.将该方法用于诺氟沙星胶囊及尿样中诺氟沙星含量的测定,平行6次测定相对标准偏差分别为2.50％～4.69％和2.52％～4.40％;回收率分别为94.5％～ 105.6％和91.2％～96.5％,结果满意.     

碳纳米碎片-镍修饰电极电化学检测硝苯地平的研究

通过溶胶-凝胶热还原法制备碳纳米碎片-镍(CNF-Ni)复合材料,用于玻碳电极的修饰,构建硝苯地平电化学传感器(CNF-Ni/GCE)。通过扫描电子显微镜、X射线衍射、红外光谱和电化学技术研究CNF-Ni/GCE电极的形貌和催化特性。结果表明：CNF-Ni/GCE修饰电极对硝苯地平具有良好的催化性能。在优化实验条件的基础上,利用差分脉冲伏安技术测定,硝苯地平浓度在4~160 μmol/L范围内与其氧化峰电流呈良好的线性关系,检出限为2 μmol/L。该方法可用于实际药品中硝苯地平的检测。     

酶联免疫法测定水产品中己烯雌酚残留量

采用酶联免疫法测定水产品中残留己烯雌酚的含量,并采用液相色谱-质谱联用法验证阳性结果。实验结果表明,该方法对水产品中己烯雌酚的检出限为0.35 μg/kg,回收率达77%～91%,具有良好的灵敏度和准确度。