大鼠血浆中芦丁和槲皮素的RP-HPLC同时分析方法

建立测定大鼠血浆中芦丁和槲皮素含量的反相高效液相色谱(RP—HPLC)方法．用甲醇-乙酸(9:1, v／v)去血浆样品中蛋白质处理,以香兰素作内标,采用Century SIL C18BDS(250 mm×4．6 mm,5μm)色谱柱, 以甲醇-水-磷酸(45:53:0．02)为流动相,流速为0．7 ml／min;紫外检测波长为370nm,柱温为室温,进样量 10 μl．芦丁的定量限为0．068 μg／ml,线性范围为0．068～8．6 μg／ml;槲皮素的定量限为0．0502μg／ml,线性范围为0．0502～13μg／ml．芦丁和槲皮素的平均回收率分别为95．3％,RSD=4．1和90．3％,RSD=2．53(n =6),芦丁的日内及日间精密度的相对标准差分别小于13．2％和9．9％,而槲皮素的日内及日间精密度的相对标准差分别为小于13．9％和11．3％．该方法简单、快速、灵敏度高、重复性良好,可作为芦丁和槲皮素体内样品的分析方法．     

芒果树不同部位槲皮素的提取工艺研究

为了寻找更好的芒果不同部位槲皮素的提取工艺,本文优化了槲皮素提取方法、提取部位,并设置四因素五水平的正交试验对其影响因素进行分析,最后用TLC法进行鉴定。结果表明超声波提取法为槲皮素提取的最佳方法,芒果叶为最佳槲皮素提取部位。正交试验表明槲皮素最佳提取工艺条件：乙醇百分含量为70％,料液比为1：15,提取时间为60min以及温度为48℃。通过TLC法鉴定后,样品与槲皮素标样的Rf值基本一致,在V（正丁醇）：V（醋酸）：V（水）=4：1：5,系统中Rf值均为0．85左右,在V（氯仿）：V（甲醇）=9：2中,Rf值均为0．70左右,从而可初步确定样品为槲皮素。     

反相高效液相色谱法测定三白草中槲皮素和芦丁的含量

采用反相高效液相色谱法 (RP -HPLC)在C1 8色谱柱上以甲醇 :0 .2 %磷酸溶液 (5 0∶5 0 )为流动相测定了三白草中槲皮素和芦丁的含量 .流动相的流速为 1mL min ,检测波长 370nm .结果表明槲皮素在 0 .0 0 8-0 0 84 μg、芦丁在 0 .0 5 4 - 0 .5 4 0 μg范围内呈良好的线性关系 ,相关系数分别为 0 .9988和 0 .9999.槲皮素回收率为 99% ,RSD为 2 .0 % (n =5 ) ,芦丁为 10 6 % ,RSD为 1.4 % (n =5 ) .     

双波长等吸收消去法测定蒲公英中芦丁和槲皮素的含量

实验利用双波长等吸收消去法同时测定了蒲公英提取物中的芦丁和槲皮素的含量。结果表明：槲皮素在波长240nm和266nm处有相同的吸收,芦丁在波长330nm和370nm处有相同的吸收。本法测定蒲公英提取物中的芦丁和槲皮素,含量分别达到5.70%和1.21%;相对标准偏差为1.66%和0.57%。该方法简便易行,实现了二组分的同时测定。     

HPLC法测定凉山杜鹃花中芦丁、槲皮素的含量

采用液相色谱法测定了四川凉山杜鹃花中芦丁、槲皮素的含量 ,并对该法涉及的相关问题进行了讨论。采用shim - packCLC -ODS柱 (6 .0mm× 2 5 0mm ,5 μm) ,以MeOH - 0 .4 %H3PO4 (4 6 )为流动相 ,2 5 4nm波长 ,测定杜鹃花中芦丁、槲皮素的含量。待测组分与其它组分分离效果良好 ,平均回收率分别为 98.9% (RSD =1.6 2 % ,n =5 )、96 .2 % (RSD =1.76 ,n =5 ) ,该方法操作简单、易行 ,重现性好 ,可作为该原料药及制剂的质控方法。     

槲皮素和芦丁的热分解动力学研究

采用热重法(TG)测定了槲皮素和芦丁的TG-DTG曲线.结果表明:槲皮素的DTG曲线有一个明显的失重峰,峰顶温度为349℃,失重率为33.32%.芦丁的DTG曲线有三个失重峰,在278℃的失重峰最为明显,失重率为29.71%.用TG-DTG法对两者在非等温条件下进行热分解动力学研究,把从TG-DTG曲线中取得的数据和30个不同的方程采用Achar微分法和Madhusudanan-Krishnan-Ninan(MKN)积分法对其进行非等温分解动力学研究,得到动力学参数(表观化学能E和频率因子A)和分解动力学机理及方程.得出结论:槲皮素和芦丁动力学方程均为da/dt=A exp(-E/RT)3/2(1-α)4/3[1(1-α)1/3-1]-1,其分解机理符合三维扩散机理Three-dimensional,3D.二者的表现化学能分别为93.63和107.86kJ·mol-1,ln A 分别是25.80和39.57 s-1.     

微生物发酵转化黄姜生成薯蓣皂苷元的研究

本实验筛选到一株能高效转化薯蓣皂苷生成薯蓣皂素的菌株,并进行液体发酵转化,HPLC检测发酵前后薯蓣皂苷及薯蓣皂苷元含量的变化,表明经菌株的转化作用后,黄姜中的薯蓣皂苷生成薯蓣皂苷元,对发酵条件包括培养基成份,底物浓度,装量,接种量,转速进行优化,并找到充分利用黄姜的生态环保的预处理方法,发展出一种高效清洁的薯蓣皂苷元生产工艺。     

槐米中芦丁和槲皮素的毛细管电泳-电化学检测

用毛细管区带电泳 -电化学检测法测定了中药槐米中芦丁和槲皮素的含量。研究了电极电位、电解液酸度和浓度、电泳电压及进样时间等对电泳的影响 ,得到了较为优化的测定条件。以直径为 30 0 μm的碳圆盘电极为检测电极 ,电极电位为 0 .90V (vs .SCE) ,在 10 0mmol/L硼酸盐缓冲液 (pH 9.0 )中 ,上述两组分在 10min内完全分离。芦丁和槲皮素浓度与电泳峰电流分别在 7.5× 10 - 7～ 1.0× 10 - 3和 5 .0× 10 - 7～ 1.0× 10 - 3mol/L范围内呈良好线性 ,检测下限分别为 4 .34× 10 - 7和 2 .2 5× 10 - 6 mol/L。 7次测定含 5 .0× 10 - 4 mol/L芦丁和槲皮素的试样溶液 ,峰高的相对标准偏差分别为 2 .5 6 %和 4 .11% ,五次测得的平均回收率分别为 97.80 %和 96 .84 %     

全自动加压溶剂萃取——高效液相色谱法测定洋葱中芦丁和槲皮素含量

通过与水浴回流法比较,建立了全自动加压溶剂萃取法,可简单、快速测定洋葱中保健活性物质芦丁和槲皮素含量.采用高效液相色谱仪在368nm波长处测定芦丁和槲皮素含量.色谱柱为C18柱,流动相为甲醇-磷酸溶液(58:42,体积比),以1.0ml/min流速等度洗脱,外标法定量.结果表明,在芦丁和槲皮素质量浓度为0.1～200mg/L时,其线性相关系数均大于0.999.在2.0～100mg/kg的添加水平下,芦丁和槲皮素的平均回收率分别为83.5%～94_2%和84.8%～91.2%;相对标准偏差分别为2.9%～7.4%和4.2%～6.9%(n=6).全自动加压溶剂萃取法的检出限(LOD),芦丁和槲皮素分别为0.05,0.03mg/kg.定量限(LOQ),芦丁和槲皮素分别为0.2,0.1mg/kg.研究建立的运用全自动加压溶剂萃取仪提取、高效液相色谱测定洋葱中芦丁和槲皮素的方法,线性良好,重现性较好,灵敏度较高,能够满足蔬菜和水果等农产品中芦丁和槲皮素的快速检测.     

微生物发酵转化黄芩苷生成黄芩素的研究

葡萄糖醛酸酶的菌株HQ10,能够以黄芩为底物,通过发酵将黄芩中的黄芩苷转化为黄芩素. 通过对发酵条件进行优化,黄芩苷转化率近于92%. 发酵产物经TLC、HPLC、质谱等方法检测确定为黄芩素.     

基于UPLC方法同时测定准噶尔柳花中的芦丁、木犀草苷、绿原酸、槲皮素含量

利用UPLC法测定准噶尔柳花中的芦丁、木犀草苷、绿原酸、槲皮素含量。采用色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18 100 mm×2.1 mm,1.7 μm;流动相：乙腈（A） 0.2%乙酸水溶液（B）,梯度洗脱,流速：0.29 mL/min;检测波长：360 nm;柱温：30 ℃。实验结果表明,芦丁线性范围0.05~3.12 μg/mL（r=0.999 8）,平均回收率为99.9%,相对标准偏差为1.6%;木犀草苷线性范围0.03~9.00 μg/mL（r=0.999 5）,平均回收率为98.8%,相对标准偏差为0.8%;绿原酸线性范围0.01~5.00 μg/mL（r=0.999 7）,平均回收率为97.6%,相对标准偏差为1.7%;槲皮素线性范围0.001~0.050 μg/mL（r=0.999 8）,平均回收率为99.0%,相对标准偏差为2.0%。该方法准确可靠,重复性好,可以作为准噶尔柳花的质量控制依据。     

硝酸根对硒酸盐微生物转化的影响

在好氧条件下研究了硒酸盐的微生物转化,主要产物为单质硒。加入较多的硝酸根,元素硒的生成量明显减少。硝酸根的存在不影响微生物的数目,说明硝酸根与硒酸根发生竞争转化,抑制了单质硒的生成。     

高纯度芦丁的制备实验研究

目的:从槐米药材中分离制备高纯度芦丁。方法:采用碱提酸沉法,从槐米中提取得到芦丁粗品,先后采用溶剂纯化法和聚酰胺柱色谱法对芦丁粗品进行纯化从而制得高纯度的芦丁。结果:经薄层色谱法鉴定芦丁纯化品与芦丁标品图谱一致,经高效液相色谱法测定其含量为98.96%。结论:此实验方法简便易行,所得芦丁纯度高。     

静息细胞法转化天麻素的研究

目的研究微生物细胞对天麻素的转化作用。方法采用静息细胞转化法,对天麻素进行转化,并通过理化性质和波谱分析鉴定转化产物的结构。结果转化产物经NMR,EI-MS等的测定证明为天麻苷元(对羟基苯甲醇)。结论利用兰色梨头霉Absidia coerulea3.338 9的静息细胞转化天麻素,在底物质量浓度为2.8 mg/mL,pH 6,28℃条件下转化48 h,转化率可达95.7%。     

红枣芦丁提取工艺的研究

研究了从红枣中提取芦丁的工艺条件。实验结果表明,用热水提取芦丁,加水量为原料重量的17倍,提取温度为70℃,时间60min;用乙醇提取芦丁,75％的乙醇溶液的用量为原料重量的16倍,提取温度75℃,时间120min。     

微生物发酵转化黄姜生成薯蓣皂苷元的工艺研究

筛选到一株能高效转化薯蓣皂苷生成薯蓣皂苷元的菌株,并进行液体发酵转化,HPLC检测发酵前后薯蓣皂苷及薯蓣皂苷元含量的变化,表明经菌株的转化作用后,黄姜中的薯蓣皂苷生成薯蓣皂苷元.本研究对发酵条件包括培养基成份,底物浓度,装量,接种量,转速进行优化,并找到充分利用黄姜的生态环保的预处理方法,建立了一种高效清洁的薯蓣皂苷元生产工艺.     

微生物发酵蛋白饲料在奶牛饲养中的应用研究

本研究利用黑曲霉和米曲霉组合发酵豆粕、棉粕和菜粕等农副产品生产发酵蛋白饲料. 在四川、陕西、新疆三省(区)6个规范化奶牛场, 共选择339头的中后期泌乳奶牛, 进行对比饲养试验. 结果表明: (1)降低原奶中体细胞达88～175万个/ml, 说明该发酵蛋白饲料对提高奶牛抗病力、防治乳房炎具有显著效果;(2)提高产奶量, 试验组奶牛比照组平均多产奶1.08kg/头/天;(3)对乳蛋白、乳脂肪、乳蛋白和乳中固体物有均提高趋势, 但多数差异不显著;(4)饲料成本降低, 经济效益提高, 试验组奶牛比对照组奶牛每头每天多收益6.50元.     

刺囊毛霉对甘草次酸的微生物转化研究

对刺囊毛霉AS3.3450微生物转化甘草次酸的条件进行了研究。结果表明,生成的主产物,经分析鉴定是7β-羟基甘草次酸;最佳转化条件为培养温度27℃,底物加量为80mg/L,转化10d,主产物得率为875mg/g甘草次酸。刺囊毛霉AS3.3450能够专一性地对甘草次酸进行羟基化反应,这为研究甘草次酸药物开发及体内代谢研究提供一定的理论依据。