黄芪甲苷对非小细胞肺癌A549细胞增殖及凋亡相关蛋白表达的影响

观察不同剂量的黄芪甲苷(As-Ⅳ)在体外对非小细胞肺癌(A549)细胞的生长、凋亡等方面的影响,探讨黄芪甲苷抑制A549细胞增殖、促进凋亡的可能分子机制。实验结果表明,As-Ⅳ作用24 h后,肺癌细胞A549的增殖明显受到抑制,具有剂量依赖性。A549细胞中的E-cadherin蛋白表达呈药物浓度依赖性上调,Vimentin蛋白表达下调。经As-Ⅳ作用24 h后的A549细胞,其胞质蛋白Bax/Bcl2表达水平高于对照组,同时As-Ⅳ也促使Caspase-3裂解为cleaved Caspase-3。黄芪甲苷在体外能抑制非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移并诱导其凋亡,其机制可能是通过抑制NEDD4/PTEN通路而激活并促进Bax表达的实现。该发现为临床上治疗非小细胞肺癌提供了有意义的实验依据。     

参芪香颗粒中黄芪甲甙的含量测定

采用薄层扫描法测定参芪香颗粒中黄芪甲甙的含量,方法简便易行,重现性好,其结果黄芪甲甙在2μg～10μg线性关系良好.     

RAGE敲除对AGEs-RAGE轴诱导血管平滑肌细胞线粒体动力学变化的影响机制研究

探讨晚期糖基化终产物受体(RAGE)表达对血管平滑肌细胞线粒体动力学变化的影响机制。细胞水平以小鼠RAGE基因mRNA序列作为干扰靶点,设计3组靶向RAGE的shRNA,转染离体培养的小鼠主动脉血管平滑肌细胞,并通过PCR和Western blot方法验证转染是否成功;采用CML-BSA分别干预正常血管平滑肌细胞(VSMCs)和转染的VSMCs,采用细胞免疫荧光检测血管平滑肌细胞线粒体动力相关蛋白(DRP1)分布和表达情况;Western blot分析VSMCs的双联RNA依赖蛋白激酶(PKR)、线粒体动力相关蛋白(DRP1)、线粒体融合蛋白(Mfn2)以及相关通路JAK2/STAT3磷酸化蛋白表达水平。动物水平上,通过高脂饲喂和腹腔STZ注射建立2型糖尿病模型;后经尾静脉注射RAGE基因敲降(RAGE^-/-)质粒,采用Western blot法测定RAGE基因敲除对糖尿病小鼠主动脉PKR、JAK2、STAT3磷酸化水平以及对线粒体动力学相关蛋白表达水平的影响;采用HE和油红O病理学染色观察敲降RAGE基因后AGEs-RAGE轴诱导糖尿病小鼠血管壁的厚度变化。细胞...