固定化木瓜蛋白酶的制备及其性质

用固定化单宁通过吸附法制备固定化木瓜蛋白酶,研究了固定化的条件和固定化酶的性质、在200毫克固定化单宁加入200单位木瓜蛋白酶、5℃,pH8.5的条件下进行固定化,固定化木瓜蛋白酶活力可达260单位/克固定化酶(湿重)。固定化酶和自然酶的最适pH及最适温度相同,分别为pH6及75℃;但固定化酶的温度及贮存稳定性明显优于自然酶。在室温下用其连续澄清啤酒,使用半衰期为8天。     

壳聚糖固定化木瓜蛋白酶的制备及性质

以壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂制备固定化木瓜蛋白酶，研究了固定化时间、温度、pH值、给酶量和戊二醛浓度对固定化木瓜蛋白酶活力的影响，结果表明：木瓜蛋白酶最佳经条件是给酶量为每克载体10mg，戊二醛浓度0.5%，pH7.5，室温下（25℃）反应10h。所制备的固定化木瓜蛋白酶的最适pH8.0，最适温度70℃，与溶液酶相比，固定化酶的热稳定性显著提高。     

固定化木瓜蛋白酶的研究及其应用

从8种载体材料中选取自制的氨基含量约2．878mmol/g的甲壳质作为固定化载体,采用吸附交联法,以戊二醛为交联剂,对木瓜蛋白酶进行固定化。17．5mg/g的固定化酶／载体比较,pH6.5,5℃下,先吸附10min,再以0．7％的戊二醛终浓度交联12h,所得固定化酶酶活回收可达52．0％,酶活力为3．54U／g。固定化酶在65℃以下,溶液酶在55℃以下稳定;固定化酶在pH7.0以下稳定,溶液酶在pH6.0以下稳定;5℃条件下,固定化酶贮藏半衰期为183d;以酪蛋白为底物,固定化酶的操作半衰期可达27d。用固定化酶水解甲壳胺,产物分子量小于10 000的甲壳胺低聚糖得率约为45．55％。     

固定化木瓜蛋白酶的制备及性质

用硫酸铵分级沉淀法从木瓜粉提取液中分离木瓜蛋白酶，将其偶联在对氨基苯磺酰乙其次 联琼脂上，制得固定化木瓜慢白酶。实验结果表明；木瓜蛋白酶与ＡＢＳＥ－交联琼脂的最佳结合量是每克干交联琼脂１４．０μｍｏｌ／ｓ，固定化酶的最适反应ｐＨ为８．０，最适反应温度为７５℃，Ｋｍ为６７．６ｍｍｏｌ／Ｌ。     

壳聚糖固定化木瓜蛋白酶的制备及性质

以壳聚糖为载体 ,戊二醛为交联剂制备固定化木瓜蛋白酶 .研究了固定化时间、温度、pH值、给酶量和戊二醛浓度对固定化木瓜蛋白酶活力的影响 ,结果表明 :木瓜蛋白酶最佳固定化条件是给酶量为每克载体 10mg ,戊二醛浓度0 .5 % ,pH7.5 ,室温下 (2 5℃ )反应 10h .所制备的固定化木瓜蛋白酶的最适pH8.0 ,最适温度 70℃ ,与溶液酶相比 ,固定化酶的热稳定性显著提高     

冷冻-真空吸附法在介孔材料中固定木瓜蛋白酶

首次采用冷冻-真空吸附法在介孔材料SBA-15中固定了木瓜蛋白酶. 与普通的浸渍方法相比, 此法不仅可以制备高组装量的固定化酶, 每克载体固定量可达450 mg, 同时酶的活性仍然保持, 并得到较好的固定化酶性质(如高稳定性), 在90 ℃保温30 min仍保留70%的活力.     

以卵清蛋白为载体的固定化木瓜蛋白酶的制备及其性质

以变性的卵清蛋白为载体, 用戊二醛为交联剂固定木瓜蛋白酶. 通过正交实验考察了固定化pH值、 交联剂戊二醛浓度、 交联时间和酶用量对固定化木瓜蛋白酶活力的影响,确定了最适固定化条件： 5%戊二醛, pH 6.0, 交联时间20 h, 每克载体含酶量12 mg. 对比研究了游离木瓜蛋白酶和固定化木瓜蛋白酶的性质, 所得到的固定化木瓜蛋白酶最适温度90 ℃, 最适pH 9.0, 米氏常数53.6　mg/mＬ, 其热稳定性及耐热性均较游离酶显著提高.     

环氧基硅烷化硅胶的制备及评价方法比较

详述了环氧基硅烷化试剂键合硅胶的３种方法：ｐＨ＝３．５水介质中的键合；非水介质中的键合；先开环后键合。比较了评价键合效果的３种鉴定方法：红外光谱法；化学滴定法，重量法，确定采用重量法评价键合效果，得出在非水介质中进行的键合可获最佳的结果。     

两步法活化微晶纤维素及在固定木瓜蛋白酶中的应用

微晶纤维素经过两步活化,可在温和条件下实现木瓜蛋白酶固定化,用对甲基苯碘酰氯活化微晶纤维素后,与乙二胺反向载体引入有机胺基因,再用戊二醒处理所得的二次活化载体可在温和条件固定木瓜蛋白酶,所得固定化酶活力为103U／g载体,与溶液酶比较,热稳定性有明显提高。     

木瓜蛋白酶的原位固定化及理化性质研究

以氨基载体原位固定化PEG相中的木瓜蛋白酶,获得了高固定化率(95.9%)和酶活回收率(38.9%)的固定化木瓜蛋白酶,解决了双水相分离纯化后成相聚合物和目的蛋白难以分离的问题。固定化木瓜蛋白酶的最适pH在7.0左右,最适温度处于60～70 ℃之间。相比游离木瓜蛋白酶,在广泛的pH区间内(3.0～9.0)固定化酶稳定性都较好,热稳定性也有改善。在4 ℃密闭容器内将固定化木瓜蛋白酶以湿润状态保存可以较好地保留其活性。LH-HA固定化木瓜蛋白酶可以特异性地水解单克隆抗体IgG,制备Fab和Fc片段。     

椰壳活性炭共价固载木瓜蛋白酶的研究

将椰壳活性炭进行可控氧化及硅烷偶联剂（APTMs）反应后,与戊二醛交联,成功地共价固载了木瓜蛋白酶．木瓜蛋白酶固载量为15mg／g,固载酶的最佳活性pH值为7．4,温度为50℃．与游离酶相比,固定化酶的温度、pH稳定性明显提高．溶液酶和固定化酶的Km分别为0．86mol／L和0．95mol／L,Vm分别为0．603和0．528mol·s^-1·g^-1．     

EVA－g－NIPAAm用于控制酶活性的研究

采用混合接枝法和两步接枝法，将活性基团羧基引入ＥＶＡ－ｇ－ＮＩＰＡＡｍ的接枝层，以脲酶作为模型酶，利用酶中某些基团跟羧基的反应，将酶固定于该接枝热敏性材料上．当反应体系温度高于接枝物的ＬＣＳＴ时，凝胶收缩，酶的活力被部分关闭，反应减慢；而当反应体系温度低于ＬＣＳＴ，凝胶溶胀，酶的活力又增加，反应加快．利用这一负反馈过程可用来控制某些生物或化学反应的速率和温度     

有机氯化物的固定化酶处理技术研究

研究了Ｆｅ３Ｏ４固定辣根过氧化物酶的吸附特性、贮存稳定性,考察了固定化酶浓度、ｐＨ值、Ｈ２Ｏ２浓度对催化氧化反应的影响。对均相与非均相酶处理氯酚的效果进行比较,显示固定化酶处理有机氯化物具有很大的优越性。     

蛋白双酶（胰蛋白酶─木瓜蛋白酶）的固定化研究

以脱乙酰壳多糖为载体，戊二醛为交联剂，对胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的固定化条件及固定化双酶的动力学性质进行研究．实验对比了交联剂的用量、交联的ｐＨ值、温度及载体与酶的比例等因素对固定化的影响．确定了固定化双酶的催化特性：最适ｐＨ７．５～８．１，最适温度是６０℃，Ｋｍ值是０．５２ｍｇ／ｍｌ，并对固定化双酶的热稳定性、固定化双酶的活性与固定化单酶的活性进行了比较．     

吸附树脂载体固定枯草杆菌蛋白酶的研究

以几种中性树脂和非极性树脂为载体,用先吸附,再以戊二醛溶液交联的方法固定枯草杆菌蛋白酶,考察了不同性质树脂作载体的固定化效果和最佳的固定化pH值,并比较了固定化前后酶的活性。     

吸附树脂载体固定枯草杆菌蛋白酶的研究

以几种中性树脂和非极性树脂为载体,用先吸附,再以戊二醛溶液交联的方法固定枯草杆菌蛋白酶,考察了不同性质树脂作载体的固定化效果和最佳的固定化pH值,并比较了固定化前后酶的活性.     

琥珀酰亚胺类固定化酶载体的合成与胺解研究

选用丙烯酸(AA)、N′-羟基琥珀酰亚胺(NHM)为单体,以N′,N′-亚甲基双丙烯酰胺(MBAA)为交联剂,以乙醇水溶液为制孔剂条件下进行反相悬浮聚合,得到珠状共聚物载体,该载体是一种新的酶载体形式,在国内外的相关文献中均未见报道.用红外光谱对其结构进行了表征.对载体与有机胺的胺解反应进行了研究,发现共聚物载体分子链上的丙烯酸-N′-羟基琥珀酰亚胺酯基易于在温和条件下与胺基发生胺解反应,从而为该类载体应用于含游离胺基的生物活性物质分子的固定化提供了依据.     

HRP的电化学固定化及HRP／P—OPD酶电极的性能

利用电化学固定化方法制备含辣根过氧化物酶的聚邻苯二胺（ＨＲＰ／Ｐ－ＯＰＤ）膜电极，改变聚合用溶液的酸度和所含支持电解质的成分，研究酶的固定化过程及其对所得酶电极性能的影响．结果表明依电聚合条件而异，酶可能以不同途径进入聚合物基质中．支持电解质的品种会影响酶膜的形成速度、组成和稳定性．所得ＨＲＰ／Ｐ－ＯＰＤ膜电极可在溶液不含电子传递体的条件下催化Ｈ２Ｏ２的还原，电聚合过程中进入酶膜的寡聚体可能充当酶的电子传递体