紫花地丁提取物对LPS诱导RAW 264.7细胞的体外抗炎作用

观察紫花地丁提取物对脂多糖诱导的RAW 264.7巨噬细胞的抗炎作用并探讨其机制.采用脂多糖(1μg/mL)诱导RAW 264.7巨噬细胞建立体外炎症模型,格里斯试剂法和酶联免疫吸附法分别检测细胞上清液中的NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的浓度,凝胶成像法检测细胞中iNOS、COX-2蛋白水平.结果显示,紫花地丁水提物、醇提物剂量依赖地降低脂多糖刺激巨噬细胞分泌NO、TNF-α、IL-6、IL-1β以及其iNOS、COX-2蛋白水平.相同剂量(100μg/mL)的紫花地丁醇提物抗炎活性优于水提物.结果表明,紫花地丁水提物、醇提物可抑制脂多糖刺激的RAW 264.7细胞炎症,其机制可能与抑制iNOS、COX-2蛋白表达,减少NO、TNF-α、IL-6、IL-1β等炎性因子的分泌有关.     

Physagulin H通过阻断NF-κB和JNK/MAPKs信号通路抑制LPS诱导RAW 264.7细胞产生的炎症反应

采用脂多糖诱导的RAW 264. 7巨噬细胞体外炎症模型评价physagulin H的抗炎活性.以MTT法评价细胞毒性,Griess法检测NO的含量,ELISA法检测PGE2和TNF-α水平,Western Blot法检测炎症蛋白表达(iNOS和COX-2)以及对NF-κB炎性信号通路(IκB-α蛋白降解)和对MAPKs通路(JNK,p38和ERK蛋白磷酸化)的调控作用,研究physagulin H的抗炎活性及作用机制.结果表明,physagulin H可显著降低巨噬细胞RAW264. 7中NO、PGE_2和TNF-α的释放,还可显著降低iNOS和COX-2蛋白的高表达且呈浓度依赖性.Physagulin H对LPS诱导NF-κB/IκB-α降解具有显著抑制作用.进一步的抗炎机制研究表明,physagulin H能抑制JNK磷酸化,但对ERK 1/2和p38磷酸化无明显抑制作用.综上,physagulin H是通过调控NF-κB和JNK/MAPKs信号转导通路下调LPS诱导的炎性蛋白的高表达,进而抑制小鼠巨噬细胞产生和释放过量炎症介质以及炎症因子,从而发挥抗炎作用.     

植物内生真菌来源的倍半萜对LPS诱导细胞炎症反应的抑制作用

目的:探究马铃薯内生真菌次生代谢产物中新型倍半萜类化合物TA的抗炎作用.方法:脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞建立体外炎症模型,通过测定细胞存活率、细胞NO的产生量、细胞内活性氧(ROS)水平,细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)的释放量、一氧化氮合成酶(iNOS),环氧合酶(COX-2)蛋白表达量,从而评价化合物TA的抗炎活性.结果:化合物TA对细胞无毒性,可剂量依赖性地抑制LPS刺激产生的NO,降低ROS水平,减少细胞炎症因子TNF-α和IL-1β的产生及下调iNOS,COX-2蛋白的表达量.结论:马铃薯内生真菌次生代谢产物中新型倍半萜类化合物TA具有显著的抗炎活性.     

淫羊藿苷与脱水淫羊藿素的体外抗氧化研究

为研究淫羊藿苷和脱水淫羊藿素的体外抗氧化活性,分别测定了两者对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH.)、超氧阴离子自由基(O2.)、羟自由基(OH.)的清除能力、对脂质过氧化的抑制能力、还原力以及总抗氧化能力.实验结果表明,淫羊藿苷具有很强的清除DPPH.、超氧阴离子自由基,还原力和总抗氧化的能力,有较强的清除OH.的能力,且均呈剂量依赖性.脱水淫羊藿素对DPPH.的清除能力很强,对OH.、超氧阴离子和脂质过氧化有较强的清除和抑制作用,表明淫羊藿苷和脱水淫羊藿素具有明显的抗氧化活性.     

土家药食资源藤茶提取物体外抗氧化活性研究

系统探讨民族药藤茶的体外抗氧化活性,为藤茶的进一步产业开发与资源利用提供科学依据.分别采用DPPH自由基清除法、羟基自由基清除法、超氧阴离子清除法,以及FRAP法检测总抗氧化能力共4种体外抗氧化活性实验,系统观察藤茶对不同自由基的抗氧化活性.结果显示,藤茶提取物对DPPH自由基、羟基自由基以及超氧阴离子自由基均显示出明显的清除或抑制作用,总抗氧化能力明显增加,且上述作用均呈一定的剂量依赖性.其中药物对DPPH清除作用的IC50值为0.338 mg/m L,对羟基自由基清除作用的IC50值为18.713mg/m L,对超氧阴离子抑制的最大活性值高达263.1U/L,总抗氧化能力也达到19.76 m M.表明藤茶具有确切的体外抗氧化活性.     

轮环藤碱对小胶质细胞活化的抑制作用研究

考察了轮环藤碱对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞过度活化的抑制作用.培养BV2小鼠小胶质细胞系,以脂多糖(1μg/mL)激活小胶质细胞,同时给予不同浓度的轮环藤碱(0.1～10μmol/L)处理细胞,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率,Griess法测定细胞释放一氧化氮(NO)水平,酶联免疫吸附分析实验(ELISA)检测细胞释放肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的水平.进一步在无细胞体系中考察了轮环藤碱对NO的直接清除能力;以及对DPPH、羟自由基(·OH)、过氧亚硝酸根离子自由基(ONOO~-)和超氧阴离子(·O_2~-)自由基的清除作用.结果表明,轮环藤碱可显著抑制LPS激活的小胶质细胞释放NO及三种炎症因子(IL-1β、IL-6和TNF-α),且对细胞存活率无明显影响;此外,轮环藤碱对NO、DPPH、·OH、ONOO~-和·O_2~-自由基均具有显著清除能力.综上,轮环藤碱可能对小胶质细胞过度激活引起的神经炎性相关疾病具有潜在的防治作用.     

辣木叶多糖MLP100-3的提取纯化与体外抗炎活性研究

目的:提取纯化出辣木叶多糖,初步研究其体外抗炎活性.方法:采用水提醇沉法提取粗多糖,利用Sevag法除去粗多糖中的蛋白,进一步采用DEAE-Sepharose Fast Flow柱层析法、透析法分离纯化得到辣木叶多糖组分MLP100-3;利用傅里叶红外光谱法、核磁共振光谱法和气相色谱-质谱法对MLP100-3的初级结构及单糖组成进行鉴定与分析.应用Griess试剂法和ELISA酶联免疫吸附测定法分别测定MLP100-3对细胞上清中NO和炎症细胞因子白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)分泌量的影响,并应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测MLP100-3对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和TNF-α基因表达水平的影响.结果:辣木叶多糖MLP100-3对炎症细胞NO和TNF-α的产生均有显著的抑制作用,且MLP100-3对炎症细胞产生的iNOS mRNA、环氧合酶-2(COX-2) mRNA和TNF-α mRNA也均有不同程度的抑制作用.结论:MLP100-3具有显著的抗炎活性,推测其可能通过抑制iNOS mRNA和TNF-α mRNA的表达从而抑制核转录因子-κB(NF-κB)信号传导通路激活,影响促炎细胞因子与炎性介质的释放,从而发挥抗炎作用.     

黄芩素清除自由基作用研究

利用紫外光谱法研究了黄芩素对1,1-二苯基-2-苦肼基自由基(DPPH.)和超氧自由基的清除作用.结果表明,黄芩素能有效清除超氧阴离子自由基,在酸性条件它对DPPH.自由基具有很强的清除作用,当pH值为3时其清除率达93.05%.     

洋葱不同溶剂提取物体外抗氧化活性评价

通过测定还原力、螯合能力及其对羟基自由基、DPPH自由基、超氧阴离子自由基的清除能力等实验研究了洋葱5种不同溶剂提取物的体外抗氧化活性。实验结果表明：洋葱水提物的还原力最强,对DPPH自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基清除能力也最强;丙酮提取物对Fe2＋的螯合能力最强。综合评价,洋葱水提取物的抗氧化活性最强。     

五味子抗炎作用及其分子机制的研究进展

五味子具有护肝降酶、抗氧化、抗炎、改善睡眠、降脂降糖、免疫调节等多种药理活性,五味子醇提物、水提物、挥发油、总三萜类、总木脂素类及木脂素单体均具有一定的抗炎作用,五味子的抗炎机制主要通过调节炎症信号通路的活性及减少TNF-α,IL-6,IL-1β,NO,PGE_2等炎症因子的产生与释放而发挥作用.现对五味子醇提取物、水提取物及五味子木脂素类单体的抗炎作用及作用机制的相关研究进行综述,以期为五味子的临床应用及产品开发提供参考.     

元宝枫叶黄酮抑制脂多糖诱导的小胶质细胞激活的作用

 探讨枫叶黄酮对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的小胶质细胞株BV-2细胞炎性因子释放的抑制作用.用LPS刺激BV-2细胞构建炎症模型,采用免疫荧光双标和RT-PCR方法检测不同浓度枫叶黄酮(5,10,15μmol/L)对细胞炎性蛋白酶诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和环氧合酶-2 (cyclooxygenase-2,COX-2)、细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-1β (interleukin-1β,IL-1β)、炎性信号蛋白核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白与mRNA的表达变化.结果发现:不同浓度的枫叶黄酮在翻译水平和转录水平上明显抑制了LPS诱导的细胞炎性蛋白酶iNOS和COX-2,细胞炎性因子TNF-α和IL-1β与炎性信号蛋白NF-κB的上调.上述结果表明枫叶黄酮可通过调控LPS诱导的小胶质细胞株BV-2细胞炎性因子释放从而抑制小胶质细胞激活,发挥抗神经炎症的作用.     

复方圣愈汤挥发油成分比较及其体外抗氧化性研究

对少林伤科复方圣愈汤挥发油的化学成分进行分析并对其进行体外抗氧化活性初步研究。采用水蒸气蒸馏法提取圣愈汤挥发油,运用气质联用(GC-MS)方法分析,并运用紫外分光光度计分别测定该复方挥发油对1,1-二苯基-2三硝基苯肼(DPPH)自由基、超氧阴离子自由基及羟基自由基的清除能力。实验结果表明,圣愈汤挥发油提取不同时段圣愈汤挥发油成分与含量存在显著差异。圣愈汤挥发油化学成分对DPPH、超氧阴离子自由基及羟基自由基清除能力测定结果较之BHT也均优于后者,圣愈汤挥发油具有较好的体外抗氧化活性。     

海带抗氧化多酚的制备及活性研究

用1:1的氯仿:甲醇超声提取海带成分,并用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇依次进行萃取,利用DPPH法、邻二氮菲-Fe2+氧化法、铁氰化钾还原法和邻苯三酚自氧化进行抗氧化实验,同时与抗氧化剂2,6-二叔丁基对甲酚(BHT)和没食子酸(GA)进行对照。结果显示海带提取物与各萃取组分均具有较强的抗氧化能力,其中乙酸乙酯提取物(EA)抗氧化活性最强。在50μg/mL浓度时,EA清除DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的能力和还原能力均高于抗氧化剂BHT,且清除超氧阴离子自由基的能力也高于GA;另外,Aqueous组分在所有测定浓度下清除羟自由基能力均高于GA,清除O2-的能力也高于BHT。海带各提取物总酚含量的分析表明总酚含量与抗氧化活性之间具有一定的相关性,总酚含量高其抗氧化能力也相应提高,表明多酚是提取物中重要的抗氧化成分。4种抗氧化方法的比较表明DPPH法的相关系数最高(R=0.987),是海带体外抗氧化实验最有效的方法。     

枸杞多糖通过抑制NF-κB信号通路保护脂多糖损伤的人脐静脉血管内皮细胞增殖活性与分泌功能

目的:观察枸杞多糖(LBP)对脂多糖(LPS)致人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)损伤的保护作用,并探讨其可能的作用机制.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,分为空白对照组、LBP组、LPS模型组、LBP+LPS实验组,采用CCK-8法检测细胞活力,Western-blot法检测诱导型一氧化氮活酶(iNOS)、Caspase-3及NF-κB p65蛋白水平,ELISA法检测上清液TNF-α、IL-1β水平,Gries法测上清一氧化氮(NO)含量,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA).结果:与对照组相比,LPS模型组HUVEC增殖活力显著下降,NF-κB p65蛋白、iNOS、NO、TNF-α、IL-1β、MDA及Caspase-3水平显著升高,LBP处理则可部分增加受损内皮细胞的增殖活性,NF-κB p65蛋白、iNOS、NO、TNF-α、IL-1β、MDA及Caspase-3水平显著下降.结论:枸杞多糖对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞损伤具有保护作用,与抑制NF-k B信号通路、抑制促炎因子TNF-α和IL-1β释放,抑制NO合成、减轻氧化应激,抑制凋亡蛋白Caspase-3表达有关.     

脱脂沙苑子乙醇提取物的体外抗氧化活性研究

通过测定脱脂沙苑子乙醇提取物(ESA)对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH·)、超氧阴离子自由基(O-·2)和羟基自由基(·OH)的清除能力、对Fe2 诱导的脂质过氧化反应的抑制作用、还原力和总抗氧化力,评价ESA的体外抗氧化活性,并与公认的抗氧化剂维生素C作了对照.结果表明,ESA有一定的DPPH·清除能力(IC50=419.1μg/mL)、较强的超氧阴离子清除能力(IC50=117.9μg/mL)和羟基自由基清除能力(IC50=224.4μg/mL),能有效的抑制脂质过氧化(IC50=1.70 mg/mL),有良好的总抗氧化力,说明沙苑子具有明显的抗氧化活性.     

17β-雌二醇抑制高同型半胱氨酸诱导破骨细胞Raw 264.7激活的作用研究

 探讨17-β雌二醇(17β-Estradiol,17β-E₂)对高同型半胱氨酸(High Homocystine,HHcy)诱导的破骨前体细胞株Raw 264.7炎性因子释放的抑制作用.用同型半胱氨酸(Homocystine,Hcy)刺激Raw264.7细胞构建炎症模型,采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT)检测17β-E₂对Raw 264.7细胞的活力影响,免疫荧光双标和RT-PCR方法检测不同浓度17β-E₂(1,10 nmol/L和1μmol/L)对环氧合酶-2(COX-2)和细胞炎性蛋白酶诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)、炎性信号蛋白核因子-κB(NF-κB)蛋白与mRNA的表达变化.结果发现:不同浓度的17β-E₂在翻译水平和转录水平上明显抑制了Hcy诱导的细胞炎性蛋白酶COX-2和iNOS,细胞炎性因子TNF-α和IL-1β与炎性信号蛋白NF-κB的上调,并且COX-2和IL-1β蛋白和mRNA的表达呈剂量依赖性.上述结果表明17β-E₂可通过调控Hcy诱导的破骨前体细胞株Raw264.7细胞炎性因子释放从而抑制破骨激活,发挥抗骨质疏松的作用.     

超级黑糯玉米芯色素的抗肿瘤和体外抗氧化作用

为研究超级黑糯玉米芯色素(super black glutinous corncob pigment,SBCP)对肿瘤细胞的增殖抑制效应和体外抗氧化活性.采用MTT法检测了SBCP对人肝癌细胞系BEL-7402以及胃癌细胞系SGC-7901增殖的影响;在体外化学模拟的条件下,通过建立DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基、还原力试验,采用比色法测定对比了SBCP和抗坏血酸(Vc)对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子的清除作用以及还原能力.结果表明SBCP对BEL-7402细胞和SGC--7901细胞增殖有明显的抑制作用,且随药物浓度的增大而增强;SBCP对两种肿瘤细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为4.13 mg/mL和3.83 mg/mL.SBCP还具有较好的抗氧化作用,对羟基自由基和超氧阴离子的清除作用分别是Vc的1.4倍和1.23倍,还原能力是Vc的1.77倍,但对DPPH自由基的清除作用略低于Vc.SBCP在癌症预防和治疗以及食品保健方面具有潜在的应用价值;SBCP具有很好的体外抗氧化活性.     

枸杞多糖体清除自由基活性研究

采用超氧阴离子自由基体系、羟基自由基体系、烷基自由基引发的亚油酸氧化体系、二苯代苦味肼基自由基DPPH体系,对枸杞多糖的抗氧化活性进行了研究,并同Vc进行了比较.结果表明：枸杞多糖对这几种自由基均有不同程度的清除作用,其对超氧阴离子清除作用不明显;清除羟基自由基能力与Vc相当;在较小浓度时,清除烷基自由基和DPPH自由基能力弱于Vc,但在较高浓度与Vc接近.     

血红铆钉菇多糖分离纯化及抗氧化活性研究

目的探讨血红铆钉菇的多糖分离纯化及抗氧化活性方法.方法应用传统热水浸提法提取粗多糖,进行反复冻融后初步去除蛋白,再用sevage法除蛋白,纯化后苯酚-硫酸法测糖含量,考马斯亮蓝法测蛋白含量,对多糖进行超氧阴离子自由基、羟基自由基和DPPH等体外抗氧化能力试验.结果传统热水浸提方法得糖率为4. 19%,除蛋白后蛋白含量为10. 71%,并且血红铆钉菇多糖对超氧阴离子清除效果最好,而对DPPH和羟自由基的清除效果也较为明显.结论血红铆钉菇有较强的体外抗氧化活性,并且清除率随多糖的浓度增大而增加.     

红花和灯盏花素注射液体外抗氧化和抗补体活性比较研究

通过比较分析活血化瘀类中药注射液红花和灯盏花素的抗氧化和抗补体活性,深入探讨二者的药理活性。利用试剂盒检测红花和灯盏花素注射液的总抗氧化能力(T-AOC)、羟自由基清除能力以及超氧阴离子自由基清除能力,并通过采用细胞溶血法,检测二者对补体经典途径和旁路途径的抑制效应。结果显示:二者皆具有抗氧化活性,其中灯盏花素注射液的总抗氧化能力(T-AOC=1.74±0.06 U/mg)、羟自由基清除能力(EC_(50)=0.96 mg/mL)以及超氧阴离子清除能力(EC_(50)=7.22 mg/mL)均强于红花注射液(T-AOC=0.09±0.01 U/mg,羟自由基清除能力EC_(50)=27.13 mg/mL,超氧阴离子清除能力EC_(50)=19.22 mg/mL),其中灯盏花素注射液的总抗氧化能力强于BHT(T-AOC=0.54±0.03 U/mg);在抗补体活性方面,灯盏花素注射液(CH_(50)=0.27 mg/mL,AP_(50)=0.44 mg/mL)均强于红花注射液(CH_(50)=10.07 mg/mL,AP_(50)=4.53 mg/mL),但是弱于阳性对照肝素钠(CH_(50)=0.11 mg/mL,AP_(50)=0.08 mg/mL)。研究表明,红花和灯盏花素注射液都具有较强的体外抗氧化和抗补体活性,而灯盏花素注射液均强于红花注射液。