茶氟香酰胺对人肝癌细胞生长和迁移的抑制作用

茶氟香酰胺(Ethyl 6-fluorocoumarin-3-carboxylyl L-theanine,TFC)是对茶氨酸进行结构优化后的产物,通过实验研究其对人肝癌细胞(SMMC7721)生长和迁移的抑制作用,并了解其作用机制.MTT和Transwell chamber法分别检测不同浓度的TFC对SMMC7721细胞生长和迁移的影响,流式细胞术分析不同浓度的TFC对SMMC7721细胞凋亡的影响,Western blotting检测不同浓度的TFC组对与SMMC7721细胞中与肿瘤细胞生长、迁移和凋亡密切相关蛋白表达的影响.实验结果显示,TFC能够显著抑制SMMC7721细胞生长、迁移并诱导癌细胞凋亡,TFC药物分子作用机制可能与下调SMMC7721细胞中血管内皮生长因子受体VEGFR1、磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p AKT)、核转录因子NF-κB、抗凋亡蛋白(BCL2,apoptosis regulator,BCL2)、细胞周期蛋白(cyclin D1,CCND1)表达和上调促凋亡蛋白(BCL2 associated X,apoptosis regulator,BAX)、细胞色素c(cytochrome c,somatic,CYCS)、人体抑癌基因蛋白(tumor protein p53,TP53)、半胱天冬酶3(caspase,CASP3)和E-cadherin蛋白表达有关,TFC抑制人肝癌SMMC7721细胞生长和迁移作用的重要信号通路涉及到VEGFR/AKT/NF-κB.     

茶氯香酰胺脂质体对人肝癌细胞生长和迁移的抑制作用

以茶氯香酰胺脂质体(TClC-L)为研究对象,研究其对人肝癌细胞(SMMC7721)生长和迁移的影响,并且探索其作用的分子机制,为研发抗肝癌新药提供科学依据.应用MTT法检测TClC-L对SMMC7721细胞生长的影响;应用划痕法和细胞流式分别检测TClC-L对SMMC7721细胞迁移和死亡的影响;应用Hoechst 33258染色检测SMMC7721细胞凋亡形态学变化;应用Western blotting技术检测TClC-L对SMMC7721细胞生长、凋亡和迁移密切相关蛋白表达的影响和其可能作用的分子机制.结果显示,TClC-L对SMMC7721细胞生长有显著的抑制作用,显示出剂量和时间的依赖性关系; TClC-L能够显著地降低SMMC7721细胞的迁移能力,促进其凋亡; TClC-L显著上调抑制肝癌细胞生长和诱导癌细胞凋亡的相关蛋白因子Bax、Caspase-3、PARP和迁移抑制因子E-cadherin蛋白的表达水平,下调促进细胞生长和迁移以及抗凋亡的相关蛋白因子Bcl-2、HGF、cMet、NF-κB、MMP9、VEGFR2、c-Myc蛋白的表达水平. TClC-L抑制人肝癌细胞SMMC7721的生长和迁移作用的分子机制涉及到HGF/c-Met/VEGFR-NF-κB信号通路.     

茶溴香酰胺脂质体对黑色素瘤细胞生长和迁移的抑制作用

考察茶溴香酰胺脂质体(TBrC-L)对黑色素瘤B16细胞生长和迁移的抑制作用及其分子机制,为研发抗癌新药提供科学依据.采用MTT法和细胞划痕术探究TBrC-L对黑色素瘤B16细胞生长和迁移的影响; Hoechst 33258染色法观察药物作用下细胞凋亡形态的变化; Western Blotting检测TBrC-L对B16细胞生长、迁移和凋亡相关蛋白表达的影响.结果表明:TBrC-L能对B16细胞的生长和迁移产生显著性抑制作用,并且诱导其凋亡; TBrC-L可下调c-Met、HGF、Bcl-2、NF-κB和VEGFR2的表达,上调Caspase-3、E-cadherin、Bax、p53和Cytochrome c的表达,抑制HGF/Met/VEGFR2-NF-κB通路可能是TBrC-L抑制黑色素瘤B16细胞生长和迁移作用的重要分子机制.本研究结果提示,TBrC-L具有进一步开发为抗黑色素瘤药物的潜力.     

茶硝香酰胺联合吉非替尼对人非小细胞肺癌迁移的影响

本实验旨在探究茶氨酸衍生物茶硝香酰胺(TNC)和吉非替尼联合是否增强吉非替尼对人非小细胞肺癌A549细胞迁移的影响与其可能作用的分子机制,为抑制肺癌远处转移和减少吉非替尼毒副作用提供新思路.采用细胞划痕术检测联合用药前后细胞迁移能力变化;上皮-间质转化(EMT)诱导实验结合Transwell实验观察发生EMT后A549迁移能力改变;蛋白免疫印迹法检测相关蛋白的表达.结果显示:TNC联合吉非替尼可显著抑制A549细胞迁移,且间质标志物N-Cadherin、Vimentin显著下调,上皮细胞标志物E-Cadherin明显上调,与迁移相关转录抑制因子ZEB、Slug、Snail、Twist表达显著下降,同时AKT、NF-κB等蛋白表达水平下调.提示TNC联合吉非替尼可能是通过抑制A549细胞的EMT过程从而增强吉非替尼对A549细胞迁移的抑制作用.     

整合素在肝癌细胞侵袭和转移中的作用

癌细胞与细胞外基质（ECM）的粘附是恶性肿瘤侵袭首要步骤。肿瘤细胞与细胞外基质的粘附是通过细胞膜表达的特异受体介导的，其中整合素家族为重要的粘附分子。对整合素表达相关的细胞外基质的介绍及肝癌细胞侵袭与转移中整合素研究的综述，可了解相关的整合素所介导肝癌细胞与细胞外基质、肝癌细胞之间的相互作用。文中提及肝癌细胞趋化运动中相关的整合素，有助于进一步了解整合素在肝癌侵袭与转移中的作用。整合素参与了整个肝癌细胞的侵袭转移过程，寻找出干扰整合素与配体相互作用、特异性增加或减少整合素在肿瘤中的表达的物质，从而阻断肿瘤的侵袭与转移，对抗癌药物的研究有着深远的影响。     

大蒜素对肺腺癌细胞侵袭生物学行为影响的初步研究

通过MTT法、细胞粘附试验、Transwell细胞迁移和侵袭试验检测不同浓度的大蒜素对肺腺癌细胞的活性、粘附、迁移与侵袭能力的变化;(RT-qPCR)逆转录-定量聚合酶链反应检测不同浓度的大蒜素对TIMP/MMP平衡的影响.本研究中发现大蒜素可呈剂量依赖性抑制肺腺癌细胞的活性、粘附、迁移和侵袭能力.大蒜素主要降低基质金...     

硒对癌细胞生长的抑制作用

本文叙述了用体外癌细胞培养技术来研究硒与维生素A、维生素E及砷对宫颈癌细胞生长的作用的情况.研究结果表明,维生素E对硒表现协同作用,维生素A、砷对硒表现拮抗作用.     

肥大细胞调控IDO诱导的肺癌细胞转移

建立了小鼠肥大细胞体外诱导体系。探究肥大细胞对肿瘤细胞侵袭转移能力的影响。Transwell迁移和侵袭实验检测了与肥大细胞共培养后的细胞2LL侵袭转移能力变化。实验结果表明:肥大细胞能够抑制IDO诱导的细胞2LL的侵袭转移能力。生物信息学分析发现基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP1)能够抑制促肿瘤转移的基质金属蛋白酶-1(MMP1)、基质金属蛋白酶-2(MMP2)以及基质金属蛋白酶-9(MMP9)的表达。Western blot结果表明肥大细胞通过抑制STAT3磷酸化而减少IDO的表达;并通过TIMP1信号通路抑制MMP2、MMP9和VEGF的表达。这些结果表明肥大细胞通过抑制STAT3信号通路磷酸化调控IDO表达和抑制下游TIMP1、MMP2、MMP9信号通路抑制细胞2LL转移能力。     

肿瘤的侵袭和转移

侵袭和转移是恶性肿瘤重要的生物学特征。肿瘤细胞具有许多特性 :如自主性、可移植性、侵袭性、转移性、异常分化、失去接触抑制性等。但其最重要的特性是其侵袭和转移性 ,是肿瘤的恶性行为。侵袭是指恶性肿瘤细胞侵犯和破坏周围正常组织 ,进入循环系统的过程。转移是指侵袭中的癌细胞迁移到特定组织器官并发展成为继发性癌灶的过程。侵袭和转移是同一过程中的两个不同阶段 ,侵袭是转移地前奏 ,转移是侵袭的结果。肿瘤的侵袭性和转移性是目前两个重大课题。1　肿瘤侵袭转移的基本过程肿瘤侵袭转移包括多个步骤 ,可被形象地称为多阶梯瀑布过…     

HIF-1α表达对人乳腺癌细胞侵袭转移能力的影响

为研究缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在人乳腺癌细胞中的表达及其与乳腺癌细胞侵袭转移能力的相关性,采用在培养基中加入CoCl2模拟化学缺氧培养细胞,RT—PCR和Western-blot、免疫细胞化学检测HIF-1α在人乳腺癌细胞MCF-7和MDA—MB-231中mRNA水平和蛋白质水平在缺氧前后的表达差异,及Millicell小室人工重组基底膜侵袭迁移实验检测缺氧前后两株细胞侵袭迁移能力的改变．结果发现：缺氧后,两株细胞的HIF-1α mRNA水平和蛋白质水平均较缺氧前增高（p〈0．01）,MDA—MB-231和MCF-7之间有显著差异（p〈0．01）;MDA—MB-231的侵袭转移能力明显增加（p〈0．01）,MCF-7的侵袭转移能力略有增加（p〈0．05）．表明缺氧上调HIF-1α转录及蛋白表达,进而促进乳腺癌细胞的侵袭转移能力．     

TGF-β通过调控线粒体功能影响肺癌细胞的侵袭和迁移

目的:探讨转化生长因子-β(TGF-β)在诱导肺癌细胞上皮-间质转化(EMT)的模型中对线粒体的影响与机制,以及线粒体功能受损对EMT的作用。方法:在TGF-β诱导肺癌A549细胞EMT的模型中,利用流式检测线粒体膜电位及活性氧(ROS)水平,通过RT-PCR检测线粒体相关基因的表达;通过转化生长因子-β受体(TGF-βR)抑制剂和构建Smad2敲除的A549细胞,结合流式和RT-PCR手段验证TGF-β对线粒体调控的通路;利用RT-PCR和报告基因实验分析TGF-β对线粒体调控因子过氧化物酶体增殖物激活受体共激活因子-1α(PGC-1α)的影响;通过构建A549-tet-PGC-1α细胞检测PGC-1α诱导过表达对线粒体基因表达的影响;构建PGC-1α诱导敲低的A549细胞株,结合Western blot、RT-PCR、损伤修复和细胞迁移等实验分析PGC-1α敲低对细胞EMT的影响。结果:TGF-β显著促进线粒体膜电位(P<0.05)和ROS(P<0.001)水平,并抑制线粒体相关基因的表达(P<0.001),而TGF-βR抑制剂及Smad2敲低可抑制TGF-β引起...     

美洲大蠊提取物对3株人肺癌细胞的体外抑制作用

目的:观察美洲大蠊提取物(CⅡ-3)对3株人肺癌细胞的细胞毒作用,探讨CⅡ-3对人肺癌细胞的体外抗肿瘤活性.方法:采用MTT法观察CⅡ-3对3株人肺癌细胞的影响.结果:CⅡ-3对3株人肺癌细胞的生长均有一定的抑制作用,在最高浓度(300μg/ml)时抑制率几乎为100%,且存在一定的剂量依赖性和时间依赖性.结论:CⅡ-3对3株人肺癌细胞生长有抑制作用,值得进一步研究.     

霞草皂苷对A549细胞和小鼠Lewis肺癌的抑制作用

利用MTT法和流式细胞技术分析霞草皂苷对A549肺癌细胞生长及凋亡的影响;建立小鼠Lewis肺癌模型,观察霞草皂苷对Lewis肺癌的抑制作用,探讨其抗癌机制。结果表明:霞草皂苷对A549细胞株有显著的生长抑制作用,呈一定的量效依赖性,IC50为0.19 mg/L;霞草皂苷3个剂量组干预的小鼠肿瘤的质量及2个剂量组的肺系数明显低于阴性对照组(p<0.01),免疫组化结果显示霞草皂苷各剂量组血管内皮生长因子(VEGF)和突变型P53基因表达明显低于阴性对照组(p<0.05)。霞草皂苷抑制肺癌生长机制可能和VEGF及P53基因有关。     

纳米化吉西他滨对Lewis肺癌细胞的体外毒性及凋亡的影响

本研究旨在探讨新型吉西他滨硬脂酰脂质纳米颗粒(GemC18-NPs)对Lewis肺癌细胞(LLC细胞)的毒性及细胞凋亡的影响.不同纳米颗粒(GemC18、GemC18-NPs、空白纳米颗粒(NPs))和盐酸吉西他滨(GemHCl),分别处理体外培养的LLC细胞,MTT法检测药物对细胞的毒性,采用GraphPad Prism 5计算细胞存活率及IC50;流式细胞术检测细胞凋亡.结果表明GemC18-NPs对LLC细胞具有毒性并呈时间和浓度依赖性,同时具有缓释性;GemC18-NPs可有效诱导LLC细胞凋亡.     

狼毒乙醇提取物限制糖脂代谢阻止小鼠肺癌细胞生长和转移

采用不同浓度的狼毒乙醇提取物处理体外培养的Lewis肺癌细胞48h,MTT法检测细胞粘附与增殖,transwell小室检测细胞运动,并测定细胞内葡萄糖(Glu)、葡萄糖转运体1(GLUT1)、游离脂肪酸(FFA)和甘油三酯(TG)水平.将小鼠Lewis肺癌细胞分别注射到小鼠腋部皮下和尾静脉建立小鼠Lewis肺癌皮下移植模型和实验性肺转移模型,分成模型组、狼毒乙醇提取物高剂量组和低剂量组,模型建立后次日给药,治疗3周评价狼毒乙醇提取物的抗肿瘤和抗转移作用,检测瘤组织中GLUT1、乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、FFA和TG水平,并采用免疫组化法比较肺转移肿瘤部位与非肿瘤部位GLUT1和脂肪酸合成酶(FAS)的差异.结果显示,狼毒乙醇提取物对体外培养的Lewis肺癌细胞呈剂量依赖性抑制其粘附、增殖和运动,能降低细胞内Glu,GLUT1,FFA和TG水平.与未治疗的模型小鼠比较,狼毒乙醇提取物呈剂量依赖性减缓肿瘤生长速度、阻止肿瘤转移、延长荷瘤小鼠存活时间.狼毒乙醇提取物能降低瘤组织中GLUT1,LDH,FFA和TG水平,但增加SDH活性.在免疫组化中,与正常肺组织比较,狼毒乙醇提取物也能抑制肺转移肿瘤部位的GLUT1和FAS.以上结果表明,狼毒乙醇提取物能限制肿瘤细胞对葡萄糖和脂肪的利用从而阻止肺癌细胞的生长和转移,是一种有前景的新型潜在抗肿瘤药物.     

黏着斑蛋白supervillin对胃癌细胞侵袭的促进作用

为了研究黏着斑蛋白supervillin(SVIL)在胃癌细胞(SGC)侵袭转移过程中所发挥的作用,利用脂质体转染的方法,将人源的p QCXIP-supervillin(pQCXIP-SVIL)质粒和pEGFP-C1质粒分别转入SGC细胞中,用G418或嘌呤霉素筛选得到稳定表达的GFP-SVIL(SGC-GFP-SVIL)和GFP(SGC-GFP-C1)细胞株,然后应用蛋白免疫印迹法(Western Blot)对这些细胞株进行鉴定,最后应用细胞侵袭实验对SGC、SGC-GFP-C1及SGC-GFP-SVIL细胞的侵袭能力进行比较,并对细胞SVIL、DNA以及皮层肌动蛋白进行免疫荧光染色.结果证实本研究成功构建了SGC-GFP-SVIL和SGC-GFP-C1细胞株.同SGC和SGC-GFP-C1细胞相比,过表达GFP-SVIL蛋白分子的SGC-GFP-SVIL细胞的侵袭能力更强.GFP-SVIL与皮层肌动蛋白在细胞中存在共定位,皮层肌动蛋白是侵袭性伪足的标志蛋白,与SGC及SGC-GFP-C1细胞相比,SGC-GFP-SVIL细胞中侵袭性伪足数量明显增加.根据这些结果认为,SVIL可能通过调节皮层肌动蛋白的表达和影响该蛋白分子在侵袭性伪足上的定位,从而影响胃癌细胞的侵袭能力.     

寡糖Lewis A模拟肽对小鼠急性腹膜炎的抑制作用

选择寡糖Lewis A模拟肽作为特异阻断剂, 探讨通过阻断E-选择素与其配体的结合抑制炎症的可能性. 向一组小鼠腹膜内注射酵母聚糖3 h后, 再于静脉注射表达寡糖Lewis A模拟肽IELLQAR的噬菌体或合成肽IELLQAR, 以空噬菌体或BSA作对照, 观察到实验组腹腔冲洗液中的嗜中性粒细胞显著减少. 为证实该结果, 髓过氧化物酶活性被测定, 酶活性的降低同嗜中性粒细胞的减少平行, 表明注射寡糖Lewis A模拟肽可能通过阻断E-选择素与其配体结合, 防止急性炎症的发生.     

半边莲生物碱的提取及其对胃癌细胞的抑制作用

以半边莲为材料,对全草中的生物碱进行了粗提,并对胃癌细胞BG-38生长抑制作用进行了测定.结果表明半边莲生物碱对胃癌细胞BG-38有一定的抑制作用,随着生物碱浓度的升高,抑制作用加强;当药液浓度为300mg.L-1时,对胃癌细胞的抑制率最高,达85.6%.随着作用时间的延长,总体趋势是抑制作用也加强,当作用时间达16h时,达到最大值(90.3%),但时问再延长抑制率反而略有下降.