前列腺癌细胞乳鼠移植瘤动物模型的建立

为构建前列腺癌细胞(PC3)乳鼠移植瘤动物模型,在体外培养PC3细胞,经软琼脂克隆形成实验筛选PC3细胞株中具有克隆形成能力的细胞,常规传代后取对数生长期细胞,接种约2×107 mL-1单细胞悬液0.1mL于出生2d的乳鼠颈部和前肢交界处皮下,建立移植肿瘤动物模型,观察乳鼠肿瘤生长特点,并用病理组织HE染色和免疫组织化学染色鉴定PC3在乳鼠皮下的成瘤情况.结果显示注射后乳鼠未见明显的不良反应.1~6d可见乳鼠皮下肿胀,且能触及到黄豆粒大小的肿物;7~15d肿物变大,肉眼能观察到明显肿物;16~21d时肿物有消退迹象.病理组织HE染色观察显示肿块为肿瘤组织,免疫组织化学染色显示肿物中CD133呈强阳性表达.     

脑内移植NGF诱导的PC-12细胞治疗大鼠帕金森病的研究

实验利用SD大鼠复制6-羟多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)完全损伤型帕金森动物模型,将神经生长因子(nerve growth factor,NGF)处理后的肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(plleoclxromocytoma cells,PC-12)移植人模型大鼠纹状体内,观察模型动物行为改善和移植PC-12细胞的存活情况.经行为学检测,6-OHDA动物模型复制成功率达55.1%.免疫组织化学、蛋白印迹检测结果显示模型动物黑质多巴胺能神经元数目减少,黑质酪氨酸羟化酶含量降低证明模型动物稳定、可靠.PC-12细胞经NGF(50 μg/L)连续诱导7 d,细胞逐渐平展、细胞膜变皱褶等神经元形态学特征出现后,于纹状体内行细胞移植术,经阿普吗啡(apomorphine,APO)诱导旋转行为有明显改善,蛋白印迹检测也发现移植侧具有显著的酪氨酸羟化酶免疫阳性信号.因此,NGF诱导后的PC-12细胞可以作为治疗帕金森的一种细胞供体.     

鼠肾脏近曲小管细胞的分离

我们采用改良的胶原酶消化－－密度梯度离心法分离大鼠肾近曲小管细胞，从麻醉的鼠取肾脏置入ＫＨＢ（Ｋｒｅｂｓ－Ｈｅｎｓｅｌｅｉｔ－Ｂｕｆｆｅｒ）液中，去髓质，取出皮质，经胶原酶Ⅰ消化后，用３７％Ｐｅｒｃｏｌｌ分离液（２４０ｇ，５℃，离心１５ｍｉｎ）分离鼠肾近曲小管细胞，并采用ｆｕｒａ－２／Ａｍ测定肾近曲小管细胞浆内游离ｃａ＋＋浓度，其值为：２０１．２２±１４４．６０ｎＭｏｌ（ｎ＝１２）。     

凹叶厚朴种子的结构及细胞化学研究

用组织切片法及细胞化学染色研究了凹叶厚朴种子的结构和内含物质分布的情况.结果表明：凹叶厚朴种子有种皮、胚和胚乳三部分组成;胚小,胚乳丰富.种皮由外种皮、中种皮和内种皮组成.外种皮细胞内无淀粉粒,含少量的贮藏蛋白质和脂类物质;中种皮细胞内有较多的淀粉粒和脂类物质以及少量的贮藏蛋白质;胚细胞中无淀粉粒,也无贮藏蛋白质和脂类物质;胚乳细胞中含有较多的淀粉粒,也含有大量的贮藏蛋白质和脂类物质.凹叶厚朴种子的结构及细胞化学特征是自然条件下凹叶厚朴种子繁殖率低下的原因之一.     

神经嵴细胞移植在先天性巨结肠症肠道神经组织重建中的作用

先天性巨结肠症是小儿外科常见的肠道疾病之一,主要由于胚胎期神经嵴细胞(Neural Crest Cell,NCC)在消化道迁移受阻,结肠壁肌间神经节细胞缺失、使结肠痉挛收缩发生病变、内容物难以排出、继而引起近端肠管扩张形成巨结肠。NCC在神经组织重建及修复等方面已彰显其良好的应用潜能,在组织替代及修复、维持受损组织或器官生物学功能等方面具有重要作用。本文就NCC在先天性巨结肠症肠道神经组织重建中的应用及意义做一综述,为神经干细胞移植在该类疾病中的应用提供理论依据。     

种子细胞的生长时相和紫杉醇生产的关系研究

处在生长周期不同时相的红豆杉细胞作为种子细胞,接入含来自红豆杉树皮的真菌诱导子的生产培养其中,紫杉醇的生产和种子细胞的生长时相有明显的对应关系。来自对数生长后 稳定前期的细胞,胞内紫杉醇分别为２６．８μｇ．ｇ＾－１和５８．１μｇ．ｇ＾－１;来自稳定后期的细胞对诱导子反应最敏感,     

大鼠原代肝细胞的标记和移植方法

探讨CM-DiI标记大鼠原代肝细胞的最佳浓度、细胞的移植量和移植途径.采用原位胶原酶灌注和密度梯度离心法分离、纯化大鼠肝细胞,用不同浓度CM-DiI进行标记,筛选出CM-DiI的最佳标记浓度,分别从门静脉、尾静脉移植到2/3肝切除0h大鼠,对细胞移植36h后的肝组织石蜡切片和冰冻切片分别进行免疫组织化学分析和荧光观察.结果显示,4μmol·mL-1浓度的CM-DiI和肝细胞孵育5min,细胞标记率高达95%.每克大鼠残肝移植0.8mL的细胞悬液(107个·mL-1)和0.2,0.4,0.6mL移植后检测到的标记细胞数目相比有显著性差异(P0.01),经肝门静脉移植后可以检测到的标记细胞数比尾静脉多(P0.01).CM-DiI标记大鼠原代肝细胞的最佳浓度为4μmol·mL-1,标记细胞的最佳移植量为每克大鼠残肝移植0.8mL的细胞悬液(107个·mL-1)、最佳移植途径为经肝门静脉移植.     

脱水前后七叶树种子发芽率及胚根细胞超微结构的变化

对不同脱水程度的七叶树种子发芽率及种子胚根细胞超微结构进行了测定。结果表明:七叶树种子成熟脱落时含水量(DW)高达1.46 g/g,当含水量(DW)降低到1.07 g/g时,继续脱水就会对发芽率造成严重影响。同时成熟的七叶树种子胚根细胞分化完全,未经脱水的种胚细胞结构完整、清晰,细胞核大、居中,核膜、线粒体内嵴外膜、内质网、高尔基体亦比较清晰,液泡较小;脱水5 d后的种胚细胞中出现呈同心圆膜状结构的内质网;脱水7 d后同心圆膜状内质网增多、面积增大且出现多泡体,回水不能使其恢复,与种子发芽率急剧下降相对应。     

森田心理治疗法的理论及其发展现状

森田心理治疗法是由日本的森田正马于20年代初创立的,森田正马的弟子们继承和发展了森田疗法.近20年来森田疗法在我国被广泛推广和应用.笔者综述了森田疗法的理沦、新森田疗法的理论及应用现状.     

小鼠精原干细胞的分离、分选、移植和培养

精原干细胞具有自我增殖和分化为精子的能力。精原干细胞的培养、移植和体外诱导分化等研究将使我们最终阐明精原干细胞的自我更新机制和精子发生机理。经过一年多的研究,我们不仅建立了用含血清培养基对分离的乳鼠睾丸细胞进行差异贴壁分选来富集生殖细胞的简单方法,而且成功地对分选出的精原干细胞进行了近一个月的无血清培养。流式分析结果表明,差异贴壁分选能将精原干细胞富集11倍以上。移植分析表明,分选出的精原干细胞具有在受体鼠的曲精小管中产生克隆的能力和正常生精作用。免疫细胞化学和RT-PCR检测表明,培养的细胞表达精原干细胞标志基因。该研究为体外长期培养小鼠或其它哺乳动物的精原干细胞提供了一个范例,也为利用基因修饰的精原干细胞通过移植产生转基因动物奠定了基础。     

小鼠胚芽干细胞同种移植治疗慢性肝脏损伤的实验研究

将分离和体外扩增的小鼠胚芽干细胞,用BrdU标记后,经尾静脉同种移植于CCL4制备慢性肝损伤小鼠体内。分别于移植后2w、4w取出肝脏,进行连续冰冻切片,用免疫组织化学和免疫荧光双重染色检测移植细胞在受体小鼠肝内的存活、分布和肝细胞特异性白蛋白的表达;用PAS染色检测移植细胞的糖原代谢;HE染色观察移植动物肝组织的结构变化。探索胚芽干细胞在慢性损伤肝脏中的存活、分化和治疗作用。实验结果表明:胚芽干细胞经静脉移植后可以进入损伤肝脏中,并分化为肝样细胞和肝小叶内的其他细胞,并明显改善损伤肝脏的组织结构,具有较好的治疗作用。     

脉冲电流磁场对鼠骨髓瘤细胞的影响

通过实验研究了脉冲电流磁场对鼠骨髓瘤细胞的影响。证实了脉冲电流磁场具有很强的生物效应，对生物体具有穿透能力。实验表明，强的脉冲电流磁场（最大磁场强度和磁场强度变化率以及脉冲持续时间）对细胞生长有明显的抑制作用，甚至导致细胞大片死亡。通过简单的细胞模型，对其作用机理进行了初步的探讨。     

足球机器人路径规划技术的现状与展望

综述了足球机器人路径规划的研究现状,重点介绍了足球机器人路径规划的方法,并对各种方法的优缺点进行了比较。     

艾滋病的抗病毒治疗与我国的免费治疗现状

艾滋病在全球范围内已造成了超过2000万人的死亡,尽管目前还没有可以治愈艾滋病的方法,但高效抗逆转录病毒疗法的出现和广泛使用,已成功地将艾滋病转变为一种可治疗的慢性传染病。我国政府对艾滋病问题高度关注,逐步推进艾滋病的医疗救治工作。在阐述艾滋病治疗的基础上,结合治疗特点重点介绍了我国艾滋病免费治疗的历史回顾、现状进展、问题困难和方向计划。     

研磨体沿倾斜隔仓板运动轨迹的研究

研究了倾斜隔仓板管磨机中研磨体沿倾斜隔合板的运动轨迹，讨论了研磨体在倾斜隔仓板上的运动特性及对磨机工作效率的影响。     

C编程中的效率、移植及调试问题

本文从C编程中效率、移植及调试三个方面的问题入手,详细讨论了编程中可能遇到的问题。     

人类心房肌细胞的原代培养与鉴定

探索人心房肌细胞的原代培养方法。取心外科手术患者(5/12~57岁,平均6.5岁)常规切除的右心耳,利用酶消化法原代培养心房肌细胞并进行光镜和免疫细胞化学鉴定。结果急性分离的细胞成圆形,1 d后开始贴壁。贴壁的心肌细胞部分聚集成团,成梭形或三角形。随着培养时间延长,细胞逐渐向四周伸展。免疫细胞化学分析显示90%以上的细胞呈横纹肌肌动蛋白染色阳性。说明利用酶消化法成功培养出人心房肌细胞,为深入研究人心房肌细胞基因与功能打下了基础。     

基于圆弧-直线-圆弧理论的移动机器人路径规划研究

为实现移动机器人点到点的平滑运动,需要规划出一条平滑路径使移动机器人到达目标点的位置和目标方向。针对传统Turn-Run-Turn方法规划的路径不连续,效率低等问题,在双圆弧理论的基础上提出圆弧-直线-圆弧路径规划方法并进行了理论推导。在实验室环境下,采用履带式移动平台对本文提出方法进行了实验验证。实验结果表明,通过该方法可使移动平台到达目标点的位置和方向,其横向误差均值为10.5 cm,纵向误差均值为3.7 cm,方向误差值均值为1.5°。