培养条件对黄孢原毛平革菌降解稻草的研究

在固态培养条件下研究培养条件对黄孢原毛平革菌降解稻草的影响．实验结果表明：黄孢原毛平革菌降解稻草的最适温度为32℃,最佳时间为24d．通过正交试验确定,对稻草降解影响的营养成分中,苯甲醇最好,使稻草总量降低了0．107％,木质素、纤维素和半纤维素的降解量分别提高了3．285％、0．304％,2．123％;依次为谷氨酸、缓冲液、吐温-80、发酵剂,最后是MnSO4．     

培养条件对黄孢原毛平革菌 Phanerochate chrysosporium ME—446 降解稻草木素、纤维素和半纤维素的影响

在固体培养条件下研究了培养条件对黄孢原毛平革菌Phanerochatechrysosporium ME—446降解稻草木素、纤维素和半纤维素的影响.试验采用正交设计.结果表明,ME—446菌株优先降解半纤维素.添加谷氨酸(3×10~(-6)mol/g草)可显著促进木素降解;基本营养盐显著促进半纤维素降解,但它们对纤维素降解均无显著影响;继续改变它们的用量并不能增大降解.高浓度的葡萄糖(5.5×10~(-4)mol/g草)极显著地抑制纤维素降解.醋酸缓冲夜pH4.5的缓冲强度对降解影响复杂.适宜的培养条件可以在获得有效木素降解的同时大幅度地减少纤维素损失。     

黄孢原毛平革菌低温产酶条件优化及酶学性质研究

以酶活力为评价指标,在10℃对黄孢原毛平革菌产酶条件进行优化,并对其部分酶作用特性进行了研究.结果:该菌在10℃下产LiP、MnP和Lac的最佳碳源是葡萄糖,最佳氮源是牛肉膏,最佳培养时间是72~108 h.LiP、MnP和Lac的最适反应pH范围均为4.4~4.8,最适底物浓度是0.8~1.2 mmol/L;金属离子Cu2+,Ca2+对LiP、MnP和Lac有激活作用.Fe2+对三种酶活有一定的抑制作用;而Na+则完全抑制LiP的活性,Zn2+、Mg2+对三种酶活影响不大.     

黄孢原毛平革菌木质素降解相关基因的表达分析

随着培养条件的改变,黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)中很多基因的转录会发生明显的改变.本研究通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)分析了外源O2、H2O2、藜芦醇(veratryl alcohol,VA)对木质素过氧化物酶编码基因lipA、lipD、锰过氧化物酶编码基因mnp3、芳醇氧化酶编码基因aao3的调控作用.结果表明, 在充氧条件下,lipA在整个培养时期都有转录产物,其中4~6 d 的转录水平显著升高;lipD到5 d 时转录水平显著提高,但6 d时转录有所下降,而mnp3和aao3对O2转录应答较弱.H2O2和VA分别都会加强lipA在6 d时的转录,而lipD、mnp3和aao对这两种氧化因子的应答不明显.这些结果暗示上述基因在转录水平上可能存在多种调控机制,而且P.chrysosporium体内和体外的氧化调控及其应答机制均不相同.     

纳米银刺激黄孢原毛平革菌去除诺氟沙星

纳米银(AgNPs)和抗生素的广泛应用给天然水体带来了严重的污染,环境中AgNPs的剂量大小可能影响微生物的行为,表现出对抗生素的生物降解或抑制.文章研究不同剂量AgNPs刺激黄孢原毛平革菌对诺氟沙星(NOR)的去除效果.结果表明,加入高剂量的AgNPs(60.00μmol/L)后,NOR的去除率从对照组的58％ 降低...     

黄孢原毛平革菌对印染废水的脱色实验

研究经驯化的黄孢原毛平革菌对工业印染废水的脱色效果.将12个经驯化后菌种,直接进行脱色实验,培养150 h,确定脱色率最高的菌株为实验菌,以此考察脱色工艺条件对脱色率的影响.研究表明,在温度35℃、转速150 r·min-1、活性深兰H14B染料质量浓度5 mg·L-1、接种量为7 mL、培养基自然pH的实验条件下,脱色培养84 h的脱色率最高,可达到89.01%.     

黄孢原毛平革菌产锰过氧化物酶培养基优化

黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)5.776在限氮高锰培养基中产生较高的锰过氧化物酶.通过对初始发酵培养基的优化条件研究,对原培养基进行优化/g*L-1):葡萄糖,10;酒石酸铵,0.37(2 mmol);吐温80,1;Mn2+,9.9×10-6;于34 ℃静置培养5 d;产MnP活力达1 200 U*L-1,比优化前提高了近17倍.     

黄孢原毛平革菌合成漆酶能力的研究

全面的研究了各种影响漆酶合成的条件对漆酶的产生的影响.P.chrysosporium在静置条件下，无论充氧与否，均不产生漆酶，在固体与半固体条件下，也不产生漆酶，仅在：高氮（24mmol/L)，高铜（160μmol/L），摇床（118r/min)，30℃，6d可产少量漆酶，在P.chrysosporium对木素的降解中，漆酶难以发挥重要作用。     

固定化黄孢原毛平革菌对邻苯二甲酸 二乙酯的降解效果研究

以白腐真菌的模式菌种-黄孢原毛平革菌作为研究对象,探究固定化黄孢原毛平革菌对邻苯二甲酸二乙酯(DEP)的降解效果及其最佳降解条件.研究表明,固定化黄孢原毛平革菌相对于游离态菌体能产生较高活性的木质素过氧化物酶(Li P)和锰过氧化物酶(Mn P).DEP降解效果受固定化菌体接种量、p H值、温度和DEP初始浓度等因素的影响.当p H为6,温度为35℃,DEP初始浓度为10 mg/L时,加入8 g固定化黄孢原毛平革菌时,DEP去除效果最好,其去除率达到94.6%.     

紫外、微波诱变黄孢原毛平革菌菌株的筛选比较

 对黄孢原毛平革菌孢子悬浮液进行了紫外和微波诱变,并将筛选出的优势菌PU-69和PM-57与未经诱变的菌作对比实验.结果显示紫外诱变的PU-69,Lip酶活力提高了1.29倍,Mnp1.27倍,Lac1.31倍.微波诱变的PM-57,Lip酶活力提高了1.34倍,Mnp1.33倍,Lac1.3倍.微波诱变菌株的产酶能力略高于紫外诱变,其操作也更为简单.     

愈创木酚与复合碳源共降解对黄孢原毛平革菌产酶的影响

通过正交实验法,研究愈创木酚与复合碳源共降解对黄孢原毛平革菌产酶的影响,同时探讨不同分子结构对酶催化机制的影响。实验结果表明:同时添加愈创木酚及不同结构的碳源对该菌产酶有显著影响,高浓度的愈创木酚对产酶有明显的促进作用;在培养基中添加愈创木酚2 mmol/L、葡萄糖2.5 g/L和糊精5 g/L,可以显著提高黄孢原毛平革菌的综合产酶能力;黄孢原毛平革菌可以分泌纤维素酶和木聚糖酶,而且二者之间有较好的线性正相关关系。     

黄孢原毛平革菌菌丝球对Pb2+的动态吸附及其洗脱

考察了黄孢原毛平革菌菌丝球对铅离子的动态吸附及其洗脱性能.实验结果表明,流速、温度、溶液pH值和初始浓度等因素对动态吸附有很大影响,饱和吸附量为20.19mg.g-1,比同样条件下的静态饱和吸附量(23.96mg.g-1)稍低.洗脱液流速和洗脱温度对洗脱速率有较大影响,洗脱率在90%以上(最高可达97.16%).     

黄孢原毛平革茵产锰过氧化物酶培养基优化

黄孢原毛平革菌(Phanerochaetechrysosporium)5.776在限氮高锰培养基中产生较高的锰过氧化物酶。通过对初始发酵培养基的优化条件研究,对原培养基进行优化/g·L-1):葡萄糖,10;酒石酸铵,0.37(2mmol);吐温80,1;Mn2+,9.9×10-6;于34℃静置培养5d;产MnP活力达1200U·L-1,比优化前提高了近17倍。     

黄孢原毛平革菌锰过氧化物酶基因（MnP2）的克隆

应用RT-PCR技术,从黄孢原毛平革菌5.766（Phanerochaete chrysosporium）总RNA中成功扩增出预期大小约为1.3 kb的特异性条带,将扩增产物提纯后克隆入PUC19载体,经转化、筛选及酶切鉴定后,获得锰过氧化物酶（MnP2）基因的克隆。序列分析表明,扩增的MnP2基因片段其cDNA长度为1 149 bp,编码358个氨基酸,与其它已发表文献报道的MnP2序列一致,与其同工酶MnP1和MnP3的核苷酸同一性分别为81%和66%。     

黄孢平革霉木质素过氧化物酶基因的克隆与分析

用大肠杆菌克隆载体ｐＵＣ１９构建白腐丝状担子真菌黄孢平革霉ＭＥ４４６基因组文库，用分离自ＢＫＭ－Ｆ１７６７菌株的木质素过氧化物酶ｃＤＮＡ片段ＣＬＧ４和ＣＬＧ５为探针，从构建的基因组文库中分离到一个含木质素过氧化物酶基因的重组子ｐＧＬＧ－Ｍ１，对该重组子插入片段所作的限制酶谱结果表明，它与来自ＢＫＭ－Ｆ１７６７的ＧＬＧ２片段的限制酶谱十分相似。     

黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)厚垣孢子降解阿特拉津的探究

阿特拉津(atrazine)是一类普遍存在于环境中且难降解的污染物.本文探究了黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)厚垣孢子对阿特拉津降解的最佳条件,包括温度、摇床转速、初始培养基pH及接种量.并在大田土壤盆栽实验中,研究P.chrysosporium厚垣孢子和土壤土著微生物对土壤中阿特拉津的降解情况.结果表明:P.chrysosporium厚垣孢子可以有效去除阿特拉津,在33℃、转速为180r·min~(-1)、pH值为7.0、接种量是4g·L~(-1)时,去除效果最好,去除率达90.77%.土壤盆栽实验结果表明:施用P.chrysosporium厚垣孢子28d后,非灭菌土壤中阿特拉津去除率为97.8%,其中P.chrysosporium的降解贡献最为突出,去除能力为59.3%.而土著土壤微生物的去除率仅为20.7%,表明P.chrysosporium厚垣孢子对AT降解效果明显.     

在大肠杆菌中直接克隆白腐丝状真菌—黄孢平革菌（Phanero …

利用启动子探钍型载体ｐＳＵＰＶ４直接在大肠杆菌细胞中克隆到多个来自白腐丝状真菌－黄孢平革菌（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ ｃｈｒｔｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ）基因２子片段。这些基因启动子片段能在大肠杆菌细胞中启动重卡那霉素抗性基因的表达,不同片段赋予宿主细胞以不同的卡那霉素抗性水平,最高的可达１０００μｇ／ｍＬ,最低的则为５０μｇ／ｍＬ。     

在大肠杆菌中直接克隆白腐丝状真菌-黄孢平革菌(Phanerochaete chrysosporium)基因启动子

利用启动子探钍型载体ｐＳＵＰＶ４ 直接在大肠杆菌细胞中克隆到多个来自白腐丝状真菌－黄孢平革菌（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅ ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ ）的基因启动子片段．这些基因启动子片段能在大肠杆菌细胞中启动重组卡那霉素抗性基因（ｒｋａｎｒ）的表达,不同片段赋予宿主细胞以不同的卡那霉素抗性水平,最高的可达１０００μｇ／ｍ Ｌ,最低的则为５０μｇ／ｍ Ｌ．琼脂糖凝胶电泳显示这些重组质粒ＤＮＡ 中均有不同大小的插入片段,其范围是０．５～６．０ｋｂ．选取一个插入３．９ｋｂ 的重组质粒ｐＰＣ３３ 所作的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交结果表明,插入片段以单拷贝形式存在于Ｐ．ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ 的基因组中．当此片段５′－端被除去１．８ｋｂ 后,余下的２．１ｋｂ 片段可使融合的Ｋａｎｒ 基因的表达效率提高６０％ ．