蛇毒组学与抗毒素组学:蛋白质组学技术在抗蛇毒血清效价评估中的应用

蛇毒组学以蛋白组学研究方法为基础,实现了大规模解析蛇毒全蛋白组构成特征,为深度探讨蛇毒功能与进化提供了有力支持.为探索更为优化的抗蛇毒血清效价评估方法,以蛇毒组学为基础的抗毒素组学策略应运而生,极大地提高了评估结果的精准度与可靠性.文章主要介绍了蛇毒组学研究与相关策略的发展以及抗蛇毒血清效价评估方法的迭代,旨在为蛇毒组...     

蛇毒及其基因克隆研究进展

对蛇素及其基因克隆研究进行了综述.蛇毒是一种天然蛋白质,蛇毒制剂可抗凝、去纤、溶 栓、扩血管、降血压、治疗神经性疾病和各种中、晚期癌症,是目前治疗疾病的理想药物.随着分子生 物学技术的迅猛发展,克隆蛇毒基因的方法也日臻成熟.通过基因工程技术使获得大量的高纯度的 蛇毒各组分成为可能.     

蛇毒蛋白质组学研究进展

就蛇毒蛋白质组学研究的主要方法、所取得的成就及存在的问题进行了综述.利用高通量质谱技术对蛇毒组分进行全方位研究,是近年来蛋白组学研究中的一个热点.蛇毒蛋白质组学研究包括粗毒分离、质谱分析及生物信息学鉴定三个部分.粗毒分离的主要方法包括双向电泳、凝胶过滤及反相-高效液相色谱;质谱分析的方法包括基质辅助激光解离-飞行时间质谱、液相色谱质谱联用、电喷雾离子化串联质谱和电喷雾离子化傅立叶变换离子回旋共振质谱;而利用MS-Fit或Mascot搜索引擎访问相应的蛋白质专门网站对质谱所获肽序进行查询则是生物信息学鉴定的主要方法.迄今,利用蛋白质组技术已经对游蛇科、眼镜蛇科、蝰科中的58个属100多种（亚种）蛇毒的毒物进行了研究,鉴定出了十多个蛋白质家族.这些结果不仅有助于增强人们对毒素进化与分化以及中毒机理的了解,并对新药设计中的先导化合物寻找具有重要意义.未来,蛇毒蛋白质组学研究在与高通量蛇毒组的绝对定量及所鉴定蛋白的功能表征有关的方法技术方面仍有待突破.     

陕西蝮蛇蛇毒的比较研究

对陕西分布的日本蝮蛇短尾亚种（Agkistrodon blomhoffii breuicaudus)，秦岭蝮（A.qinlingensis)及中介蝮（A.intermedius)的蛇毒进行了聚丙烯酰胺凝胶电泳研究，结果表明，蝮蛇蛇毒电泳具有种的特异性，三种蛇毒泳图谱无论在带的数目，含量及分布特征方面均存在明显差异，三者之间应为种间关系。     

蛇毒抗肿瘤活性成分的研究进展

癌症严重威胁人类健康,寻找有效的抗癌药物与方法,彻底攻克癌症,是世界医学界重要的研究课题.目前治疗癌症常用的药物一般为合成药物,但合成药物在治疗中可能会出现明显的毒副作用,天然药物越来越受到人们的重视.天然毒素在生物学、医学及药学等许多领域有广阔的应用前景,其中蛇毒的研究最为广泛.蛇毒的成分复杂且毒性较大,但研究发现蛇毒的许多组分可以抑制肿瘤生长,对肿瘤的治疗有很好的临床效果.概述了近年来关于蛇毒抗肿瘤的活性成分及机制的研究进展.     

国产六种小型蝰科毒蛇蛇毒免疫原性比较

以国产小型蝰科毒蛇短尾蝮（Gloydius brevicaudus）、岩栖蝮（Gloydius saxatilis）、乌苏里蝮（Gloydius ussuriensis）、山烙铁头（Ovophis monticola）、原矛头蝮（Protobothrops mucrosquamatus）和竹叶青（Trimeresurus stejnegeri）蛇毒为对象，用国产商用抗蝮蛇毒血清和抗五步蛇毒血清分别检测这6种蛇毒的免疫原性。间接ELISA和western blot两种方法的检测结果表明：6种蛇毒有共同的抗原组分，且在免疫反应中大部分组分表现出免疫原性；同种蛇毒和抗血清之间显示出最高的免疫结合强度；近缘物种间的免疫结合强度更接近；随着抗体浓度的升高，免疫结合强度增加。抗蝮蛇毒血清对短尾蝮、乌苏里蝮和岩栖蝮蛇毒的免疫中和效价高于抗五步蛇毒血清；两种抗蛇毒血清中和山烙铁头、原矛头蝮和竹叶青蛇毒的效价相近。     

蛇毒中生物活性酶的研究进展

蛇毒是一类包含蛋白质、多肽和金属离子等成份的混合物.蛇毒中的多种生物活性酶决定了其功能的多样性,例如凝血、溶栓、止痛和抗肿瘤作用等.然而,由于蛇粗毒免疫原性强和副作用多等缺点,其临床应用受到了一定的限制.随着新技术和分离纯化方法的发展,越来越多蛇毒产品的新功能被开发出来.针对蛇毒成分的分离纯化技术和分析鉴定方法,对研究...     

中华眼镜蛇血清对自身蛇毒中主要酶类活性的抑制作用

【目的】探究中华眼镜蛇(Naja atra)血清对自身蛇毒中主要酶类活性的抑制作用。【方法】不同稀释倍数的中华眼镜蛇血清与蛇毒于37℃孵育30min后,检测蛇毒中磷脂酶A2、透明质酸酶、乙酰胆碱酯酶、L-氨基酸氧化酶和5′-核苷酸酶活性的变化情况。【结果】中华眼镜蛇血清对自身蛇毒中磷脂酶A2和5′-核苷酸酶具有明显的抑制作用:当血清稀释2倍时,可以使蛇毒磷脂酶A2活性降低28.44%(p<0.001);当血清稀释8倍时,可以使蛇毒中5′-核苷酸酶活性活性降低23.44%(p<0.001)。中华眼镜蛇血清对自身蛇毒中的透明质酸酶、乙酰胆碱酯酶和L-氨基酸氧化酶均无抑制作用。【结论】中华眼镜蛇血清中存在蛇毒磷脂酶A2和5′-核苷酸酶的抑制剂,该结果为后期蛇毒抑制剂的筛选提供了理论依据。     

若干蛇毒蛋白的结构生物学研究

以本研究组较有研究特色的五种蛇毒蛋白家族为线索,简要综述了蛇毒金属蛋白酶、蛇毒丝氨酸蛋白酶、蛇毒crisp蛋白、蛇毒磷脂酶A2及蛇毒神经毒素等蛋白家族有关结构生物学研究的结果、现状及进展.强调了蛇毒蛋白研究中蛇毒糖蛋白的结构生物学研究、超高分辨率晶体学研究及与蛇毒蛋白相关的复合物结构生物学研究的重要性.     

蛇毒蛋白质毛细管高效液相色谱分离

利用高分离效能、高灵敏度的毛细管高效液相色谱法, 实现皮摩尔级微量蛇毒蛋白质的组分分离同时利用自行充填的毛细管高效液相色谱柱替代昂贵的原装柱, 既能较好分离复杂的蛇毒蛋白质, 又可满足不同的分离纯化要求     

蛇毒神经毒素和肌肉毒素研究进展

对蛇毒中神经毒素和肌肉毒素的分类、理化性质、结构及药理学活性进行了综述。当前研究表明,蛇毒神经毒素可分为3类：突触前神经毒素、突触后神经毒素和类神经毒素;前两者主要抑制运动终板处的神经肌肉传导,造成肌肉麻痹和呼吸衰竭;而后者可以阻断平滑肌收缩和离子通道,表现出类神经毒活性。蛇毒肌肉毒素主要分为3类：响尾蛇毒素、心脏毒素和肌肉毒 PLA2;它们主要表现为破坏肌细胞膜,降解肌纤维,造成肌肉坏死。近年来,大量的蛇毒神经毒素和肌肉毒素的结构与功能得以确定,其在临床医学及研究领域中将有着重要的应用前景。随着在作用机制等方面研究的不断深入,蛇毒蛇毒毒素和肌肉毒素的用途也将越来越广泛。
     

精制蛇毒乳膏治疗痤疮的疗效观察

选用中国医科大学老年病防治中心研制的精制蛇毒乳膏治疗100例额面痤疮患者。痊愈率65 % ,有效率99 % ,疗效满意     

蛇毒的研究进展及其在医药领域的应用

就国内外主要毒蛇的蛇毒组分、对凝血系统的影响及蛇毒在医药领域的应用进行了综述．蛇毒的化学成分十分复杂,主要包括酶、神经毒性多肽、神经生长因子、膜活性多肽及其他生物活性肽,其中酶类包含多种与凝血系统、纤溶系统相关的成分．蛇毒在医药领域具有非常重要的作用,主要有促凝作用、溶栓作用、镇痛作用、降压作用和抗肿瘤作用．     

天然植物中抗蛇毒活性成分的研究进展

对天然植物中抗蛇毒活性成分的分类、理化性质、结构及药理学活性等研究情况进行了综述。目前治疗蛇伤主要使用抗蛇毒血清,但存在一定的局限性,尤其在偏远山区不易获得抗蛇毒血清,通常采取天然植物进行替代治疗。为了弄清天然植物活性成分治疗蛇伤的机制,近些年来国内外开展了很多抗蛇毒天然植物活性成分的研究和探索。结果显示,从植物的水提取物和醇提取物中得到的活性成分如甾醇类、黄酮类、五环三帖类、植物单宁类、马兜铃酸类等对抗蛇毒均有很好的疗效;特别是植物单宁类是很好的蛋白质沉淀剂,它与蛇毒作用对蛇毒中酶的抑制效果尤为显著。大量抗蛇毒天然植物活性成分的结构与功能得以确定,其在临床医学等研究领域中有着重要的应用背景。随着作用机制等方面研究的不断深入,抗蛇毒活性成分的用途也将越来越广泛。
     

硫酸铵盐析在蕲蛇毒凝血酶样酶分离中的应用

探讨了硫酸铵沉降对蕲蛇毒中凝血酶样酶的初步分离效果的影响 ,确定出最佳处理条件 :2 .0 %的蕲蛇毒在pH 5 .0及 4 5 %饱和度的硫酸铵溶液中盐析沉降蕲蛇毒中非凝血酶样酶杂蛋白 ,上清液即为所分离的凝血酶样酶组分     

蛇毒分子结构研究取得成果

安徽医学院在上海生物化学研究所的协作下,对蛇毒成分及其结构组成进行了研究。首先测定了浙江蝮蛇亚种的蛇毒。经测定,从这种蛇毒中分离出三个舒缓激肽增强肽的组分(BPP),并对其中之一进行了分离提纯。经鉴定,其N末端为焦谷氨酸、氨     

蛇毒血凝酶用于老年高血压患者拔牙术后止血的临床研究

探讨蛇毒血凝酶注射液用于老年高血压患者拔牙术后止血的临床效果。选取需要拔牙的老年高血压患者200例,随机分为观察组和对照组:观察组100例;对照组100例。观察组拔除患牙后将牙槽窝搔刮干净,直接将蛇毒血凝酶注射液喷射于拔牙创局部,进行创口缝合后,并用棉球压迫止血;对照组拔牙后除不喷射蛇毒血凝酶注射液外,其余同对照组,观察拔牙后出血情况。观察组拔牙后出血率1.89%,对照组出血率8.82%,二者差异有统计学意义(P0.05);拔牙后出血观察组明显低于对照组,观察组止血效果优于对照组。蛇毒血凝酶注射液用于老年高血压患者拔牙术后止血,止血迅速,效果满意。     

北疆地区常见3种毒蛇蛇毒酶活力的测定

章对北疆地区3种常见的毒蛇，即中介蝮，草原蝰和华条蛇的蛇毒7种酶活力进行了测定，结果显示；蝮亚科的中介蝮和游蛇科的华条蛇，不仅在形态上存在着明显的区别，而且其蛇毒成分也有很大的不同，L—氨基酸氧化酶、磷酸二酯酶、精氨酸酯酶等3种酶的活力与蛇毒的种属特异性无关，在不同亚科毒蛇毒中其活力数值均相近。     

同步荧光法研究白眉蝮蛇蛇毒酶发色团的微环境

利用同步荧光技术对长白山白眉蝮蛇蛇毒中纯化得到的４ 种酶： 磷脂酶Ａ２ （ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２ , ＰＬＡ２） 、精氨酸酯酶（ａｒｇｉｎｉｎｅ ｅｓｔｅｒａｓｅ,ＡＥａｓｅ） 、纤溶酶（ｆｉｂｒｉｎｏｌｙｔｉｃ ｅｎｚｙｍｅ,ＦＥａｓｅ） 和Ｌ－ 氨基酸氧化酶（Ｌ－ａｍｉｎｏ ａｃｉｄ ｏｘｉｄａｓｅ, Ｌ－ ａ ａ ｏｘｉｄａｓｅ） 进行了研究． 结果表明： 当Δλ＝ ２０ｎｍ 时, 酶的荧光主要由酪氨酸（Ｔｙｒ） 残基所贡献; 当Δλ≥７５ｎｍ 时, 酶的荧光主要由色氨酸（Ｔｒｐ） 所贡献． 而且, 长白山白眉蝮蛇蛇毒４ 种酶的Ｔｙｒ 和Ｔｒｐ 残基所处的微环境并不相同．     

竹叶青蛇毒5‘—核苷酸酶对血小板聚集功能的抑制机制…

本文报道了竹叶青蛇毒中分离的５＇－核苷酸酶对家兔血小板的聚集抑制机制探讨。该酶能抑制ＡＤＰ、ＡＡ、ＴＭＶＡ、凝血酶诱导的血小板聚集，且对ＡＤＰ诱导的血小板聚集有明显的解聚作用。其抑制率与剂量增加成正比。该酶在抑制ＡＡ和ＴＭＶＡ诱导的血小板聚集的同时，对于血小板中５－羟色胺（５－ＨＴ）释放亦有明显抑制，抑制率同样与剂量相关，不能抑制ＴＸＢ２的生成。洗涤血小板抑制作用实验表明对竹叶青蛇毒５＇－核苷酸酶