蓝细菌光系统Ⅱ的组成相关基因和遗传修饰

蓝细菌是研究光合作用的理想实验系统，在光系统Ⅱ组成，相关基因及遗传修饰等分子水平上的探索已取得重大进展，主要介绍了光系统Ⅱ反应中心蛋白复合物，天线色素蛋白复合物，细胞色素蛋白复合物，锰稳定蛋白复合物等主在蛋白成份，相关基因，以及利用分子生物学操作对蛋白组分功能的研究工作。     

丝瓜和苦瓜核糖体失活蛋白的比较研究

从丝瓜和苦瓜种子中分离得到的丝瓜子和苦瓜子蛋白，均是含糖的单链核糖体失活蛋白，等电点在9-10之间，在抑制蛋白合成中丝瓜子蛋白的毒性高，而在抗生育活性中，苦瓜子蛋白较好。     

嗜水气单胞菌外膜蛋白omp TS基因的高效表达及其免疫原性

根据嗜水气单胞菌外膜蛋白基因ompTS的核苷酸序列设计引物，运用聚合酶链式反应(PCR)扩增出与预期大小相符的基因片段。将此基因片段克隆至质粒pRSET A的BamH I和EcoR I位点，构建重组质粒，转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTC诱导获得高效表达，SDS—PAGE蛋白电泳表明在39．9kD处出现超强特异带，占总蛋白的51％。以Ni-NTA-Conjugate抗体进行Western blot分析证明该39．9kD的蛋白为所表达的融合蛋白。纯化融合蛋白注射雄性新西兰大白兔可诱导产生特异抗体。ELISA和Western blot检测结果显示，该抗体与表达的融合蛋白和嗜水气单胞菌中提取的36．9kD外膜蛋白均呈阳性反应，表明所表达的融合蛋白仍保持原有外膜蛋白的免疫原性，从而为此融合蛋白作为疫苗的候选成份提供理论依据。     

花生蛋白微粒ζ—电位的测定

应用捣碎、离心分离方法，从去红衣花生仁制取花生蛋白乳状液，使用界面移动法测定花生蛋白微粒在一系列ｐＨ值的花生蛋白乳液中的ζ－电位和微粒荷电状态，探讨了花生蛋白乳状液在不同ｐＨ值下的稳定性，发现ζ＝０时不是处于特定的ｐＨ值，而是在一个ｐＨ值区间内，从而认为花生蛋白乳状液中最少有两种或两种以上花生蛋白质。     

对BIV—Gag和Env抗原特异性抗体的免疫检测

本文用高效表达载体表达出的融合ＢＩＶ核心蛋白和外膜蛋白作为Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ检测的抗原，分别对Ⅰ，Ⅱ两口岸进口奶牛及后代进行了流行病学调查，发现用外膜蛋白检测阳性率比核心蛋白阳性率高，进一步的追踪调查表明核心蛋白的抗体水平在减弱的同时外膜蛋白的抗体有加强的趋势。     

大肠杆菌S12无细胞系统合成AgrA蛋白的研究

利用无细胞合成方法，对AgrA蛋白进行了生物体系外合成，且研究了不同反应温度和时间对蛋白合成的影响。结果表明，AgrA蛋白在无细胞系统中成功被合成，且30℃、4h条件下蛋白合成效果较好。     

不同折叠类型蛋白编码基因的密码子使用

对195个编码不同折叠类型蛋白（50种全α结构蛋白，66种全β结构蛋白，37种α β结构蛋白，42种α/β结构蛋白）基因的密码子使用偏性的方差分析研究表明，不同折叠类型蛋白的密码子使用偏性有着显著的区别，特定折叠类型的蛋白有着特定的编码基因的密码子使用模式，这一结果表明，在蛋白质折叠类型和蛋白质二级结构的预测过程中，编码基因的密码子使用偏性可以作为蛋白质一级结构以外的一项重要的预测标准。     

人源锌指蛋白ZNF24及其锌指结构域的表达、纯化及DNA结合性质的研究

转录因子是调控基因表达的关键蛋白，能够以序列特异性方式结合DNA。ZNF24是Krüppel-like锌指转录因子家族成员之一，在细胞增殖和分化中起重要作用，能促进肝癌细胞的增殖，抑制神经元细胞的分化。ZNF24蛋白N端包含一个SCAN结构域，C端为锌指区，由4个串联的C2H2型锌指结构组成。ZNF24能特异性识别和结合基因的启动子，参与基因的表达调控，但其发挥功能的具体分子机制并不清楚。本文我们在大肠杆菌中成功表达了人源锌指蛋白ZNF24全长和其锌指结构域ZNF24(243～368),ZNF24全长蛋白在溶液中以三聚体形式存在，而锌指结构域在溶液中为单体，表明ZNF24蛋白N端的SCAN结构域能够促进全长蛋白的寡聚化。凝胶迁移实验验证ZNF24全长蛋白和锌指结构域与双链DNA底物结合能力，为进一步研究锌指蛋白ZNF24调控基因表达提供理论基础，相关结果表明SCAN结构域介导的蛋白寡聚可能代表了一种新的转录活性调节机制。     

基因编码的蛋白基生物材料的构建和生物医学应用

蛋白基生物材料具有生物相容性高、降解能力强、免疫反应低等特点，是近几年生物材料领域研究的又一热点。利用基因编辑结合合成生物学技术手段，可通过蛋白质重组，构建人工设计的重组蛋白生物材料，不仅可弥补天然蛋白在生物活性、理化性质等方面的不足，还可以人工修饰引入特定功能基团，极大扩展蛋白基生物材料的发展和应用。丝蛋白、弹性蛋白和胶原蛋白作为蛋白基生物材料常用的骨架蛋白，可通过基因编辑技术实现其对功能、理化性质等特性的精确控制。本文分别对丝蛋白、弹性蛋白、胶原蛋白的基本构建原理、生物合成与纯化方法等进行综述，探讨其在组织工程、药物递送领域中的应用，展望其发展，为开展相关研究提供基本参考。     

用瘦素蛋白重树减肥信心

瘦素蛋白是一类抑制食欲的激素，曾经被作为战胜肥胖难题的解决方法而受到追捧，但瘦素蛋白在肥胖者体内会失效。日前，美国哈佛医学院的科学家称，他们揭开了瘦素蛋白战胜肥胖的“秘密”，这可能会重新点燃使用瘦素蛋白减肥的希望之火。研究成果发表在近期出版的《细胞一代谢》（Cell Metabolism）杂志上。     

热滞蛋白活性的化学动力学的进一步研究

根据热滞蛋白溶液中抗冻分子与冰晶表面相互作用特点，提出了热滞蛋白在冰晶表面吸附的动力学理论，导出了热滞蛋白活性的表达式．计算了各种热滞蛋白溶液的热滞值，得到了与实验结果符合较好的结论，并讨论了热滞蛋白分子在冰晶表面吸附反应过程中的协同效应     

同向马达蛋白在细胞内的运输（英文）

细胞内物质的主动运输主要通过马达蛋白这一特殊的纳米机器来完成。在运输过程中，马达蛋白之间的协作性显著影响着距离、速度等重要的运输特性。为了理解这一机制，我们结合Gillespie模拟和理论推导，解释了单马达蛋白的力学特性如何影响了多个马达蛋白之间的协作性，进而对运输距离进行调节。我们建立了一个深度学习模型来帮助快速获得马达蛋白的运动参数。我们的结果揭示了同向马达蛋白在细胞内运输的物理本质。     

类产碱假单胞菌杀虫蛋白理化性质研究

类产碱假单胞菌杀虫蛋白对蝗虫具有较强的杀伤力，在ｐＨ６．０￣１０及４０℃以下，杀虫蛋白的活性是稳定的。该蛋白对胃蛋白酶敏感，对胰蛋白酶不敏感，不具溶血性。     

菜豆根瘤菌CFN42全基因组非经典分泌蛋白的预测与分析

为了深入了解生物固氮的分子机理，利用SecretomeP2.0和SignalP4.1对菜豆根瘤菌CFN42全基因组进行预测，结果发现，在5963个蛋白质中，非经典分泌蛋白596个，约占总数的10%，主要涉及底物转运，毒力侵染，物质代谢等方面。在有功能描述的215个分泌蛋白中，识别了I、III、IV型分泌系统，这些蛋白质在侵染和根瘤发育方面发挥了重要作用；在381个假定蛋白中，通过结构域分析，发现了Tad、Cupin、OmPA和CsbD结构域，含有这些结构域的非经典分泌蛋白可能参与了根瘤菌的宿主专一性。在豆科植物-根瘤菌固氮体系中，非经典分泌蛋白发挥了重要作用。     

新型冠状病毒复制依赖基因MTHFD1的表达及功能

【目的】研究新型冠状病毒(SARS CoV 2)复制依赖基因MTHFD1在人群间的功能差异以及该基因与病毒蛋白的相互作用关系。【方法】使用千人基因组计划和gnomAD数据库，系统分析MTHFD1基因的重要功能变异(包括有害错义变异和eQTL变异)在世界不同人群间的分布。并进一步通过蛋白互作数据库STRING和IntAct，以及手工文献检索，寻找与MTHFD1蛋白有相互作用的其他蛋白。【结果】MTHFD1基因上有419个错义突变，其中有害变异195个；大部分的有害变异都是低频的，唯一的例外是变异位点rs10813，它在全世界总人群中等位基因频率大于001且该位点在物种间具有保守性。此外，在肺组织中发现了1个MTHFD1基因的eQTL变异(rs57087457)，该位点在东亚人群中具有更低的等位基因频率，说明在东亚人群中MTHFD1基因可能具有较高表达水平。通过蛋白相互作用研究，发现GGH，ACSL3，MAT2B，ARF6，CUL2，BRD4等6个蛋白与MTHFD1蛋白存在蛋白互作。【结论】在不同人群中，MTHFD1存在天然抗性变异，这些变异的等位基因频率在人群间存在差异，可能对新型冠状病毒的易感性和感染后症状有影响；蛋白互作研究结果则提示MTHFD1基因在新型冠状病毒感染细胞中发挥了多种功能。     

麻疯树外植体愈伤组织中毒蛋白的Westem-blot鉴定

麻疯树(Jatropha curcas L.)系大戟科麻疯树属植物，耐干旱贫瘠，抗病虫能力强，主要生长在热带和亚热带地区，在我国西南地区有丰富的资源．麻疯树种子对整体动物，如小白鼠、羊及人，特别是幼儿表现出一定的毒性，且具有致死作用，麻疯树种子含毒成分主要是种子毒蛋白(curcin)，该蛋白是一种单链核糖体失活蛋白，具抗癌活性，是一种具开发成为新型抗癌药物潜力的蛋白．本文报道用组织培养的方法，从胚乳愈伤组织中可以获得此毒蛋白，为以后毒蛋白的进一步开发应用提供一定的基础。     

人工合成人表皮生长因子在大肠杆菌中的表达

目的：在大肠杆菌中高产表达人表皮生长因子（hEGF），并探索提高外源基因在pET-3c：BL（DE3）表达系统的表达水平的途径。方法：根据大肠杆菌对密码的偏爱性，合成编码53个氨基酸的hEGF基因，分别以非融合蛋白和融合蛋白两种方式表达。计算机两者mRNA的翻译起始区（translation initiation region，TIR）的结构。结果：融合蛋白表达产量为27％，非融合蛋白的表达用SDS－PAGE检测不到，两者均具有促细胞增殖的活性。融合蛋白mRNA的TIR的△G值较非融合蛋白的高。结论：在pET－3c：BL21（DE3）大肠杆菌表达系统中，以融合蛋白方式表达人表皮生长因子，表达效率高且不影响其活性，此外，mRNA的TIR的结构可能是影响外源基因在本研究的表达系统的表达效率的一个重要因素。     

用蛋白内源荧光法考察盐溶液中两种外周蛋白构象的变化

作者借助由278nm和295nm光源激发的蛋白质内源荧光分析，考察了在几种盐溶液(甲醇和NaCl，NaCl，脲，三氯乙酸，CaCl2)中23kD，17kD蛋白构象的变化。结果表明，由295nm波长的光激发时，17kD蛋白荧光发射峰位于328nm处和360nm附近，这表明大部分17kD蛋白的Trp^71处于分子内部；23kD蛋白具有326nm荧光发射峰，表明23kD蛋白所含2个色氨酸残基(Trp^34和Trp^168)处于其分子内部的疏水部位。CaCl2、脲、NaCl、三氯乙酸、甲醇和NaCl对17kD和23kD外周蛋白的内源荧光都有影响，其中CaCl2、甲醇和NaCl的影响较大，脲、NaCl的影响相对较小，这反映了两种蛋白在溶液中的构象易发生改变。     

羧基聚苯乙烯微球共价连接蛋白的定量分析

通过微球表面的羧基在有催化剂的条件下与蛋白质氨基共价连接，并且对微球上包被的蛋白质含量进行测定，探讨了初始加入蛋白量和混匀反应时间对微球蛋白包被率的影响。结果表明羧基微球包被上的蛋白可以精确定量；在蛋白初始加入量为400~1200μg范围内，初始加入蛋白量越多则微球包被蛋白量会增加；确定了混匀反应时间为1h是微球包被蛋白实验的最佳选择。     

视网膜母细胞瘤基因产物部分性质的研究

研究Ｒｂ基因产物的代谢动力学和功能调节，发现整个细胞周期中都有Ｒｂ蛋白合成，其含量随细胞周期进行而变化，蛋白代谢的半衰期约为１１—１２小时，有非磷酸化和多种程度磷酸化形式。Ｒｂ蛋白的磷酸化水平是随细胞周期过程和细胞生长状态而变化的，在Ｇ０、Ｇ１期蛋白处于低磷酸化状态，到达Ｇ１／Ｓ界限，细胞获得磷酸化Ｒｂ蛋白的能力．