甘蔗愈伤组织耐盐性研究:耐盐愈伤组织的筛选及脯氨酸、还原糖含量变化

在附加不同浓度NaCl及2.4-D 2mg/L的MS培养基上,甘蔗愈伤组织表现出不同的生长效应。培养基中NaCl浓度低时(1%以下),甘蔗愈伤组织表现为适应性生长;而在高NaCl浓度时(2%以上),愈伤组织生长表现出盐害特征。脯氨酸、还原糖测定结果显示,在盐适应情况下,甘蔗愈伤组织中的脯氨酸含量较高,还原糖含量较低;在盐害情况下则相反。     

甘蔗愈伤组织耐盐性研究:耐盐愈伤组织的筛选及脯氨酸、还原糖含量变化

在附加不同浓度NaCl及2.4-D2mg/L的MS培养基上,甘蔗愈伤组织表现出不同的生长效应。培养基中NaCl浓度低时(1％以下),甘蔗愈伤组织表现为适应性生长;而在高NaCl浓度时(2％以上),愈伤组织生长表现出盐害特征。脯氨酸、还原糖测定结果显示,在盐适应情况下,甘蔗愈伤组织中的脯氨酸含量较高,还原糖含量较低;在盐害情况下则相反。     

热胁迫下菜心脯氨酸含量变化及其在耐热中的作用*

在 35℃热胁迫下 ,菜心子叶期幼苗、组织培养再生苗和愈伤组织内游离脯氨酸含量迅速出现积累 ,子叶期幼苗和愈伤组织内脯氨酸含量比对照 ( 2 5℃ )高 2 - 3倍 ,耐热的四九菜心品种内的脯氨酸含量高于较不耐热的六十天特青 .在培养基中加入 1mg·l- 1脯氨酸 ,可降低愈伤组织细胞在热胁迫下的相对电解质渗出率 ,减轻褐变 ,延缓衰老 ,促进鲜重的增加 .外源脯氨酸促进热胁迫下愈伤组织细胞POD、CAT和SOD酶活性保持较高水平 ,增强耐热性     

獐毛愈伤组织耐盐性研究及耐盐变异体的筛选

獐毛 (Aeluropuslittoralisvar.sinensis)匍匐茎茎尖来源的原始型愈伤组织 ,测定其耐盐范围为 0 .3 %～ 1 .5% .盐胁迫下 ,脯氨酸及K 、Na 、Ca2 离子在渗透调节中起重要作用 .用直接筛选的方法 ,将原始型愈伤组织放在含 2 %NaCl的选择培养基上连续筛选 ,获得耐盐性进一步提高的愈伤组织耐盐变异体 ,在选择培养基上 ,变异型愈伤组织鲜重相对生长率显著大于原始型愈伤组织 ,在变异型愈伤组织耐盐性提高中 ,脯氨酸及无机离子K 、Na 、Ca2 起重要作用 .耐 2 %NaCl的变异型愈伤组织在无NaCl培养基中培养 1 1代后 ,仍能耐受 2 %NaCl,愈伤组织的耐盐性没有退化 ,说明筛选得到的耐盐变异体不是生理适应性的而是由遗传变异而来的 .     

NaCl或KCl对甘薯块根愈伤组织生长和溶质积累的影响

受NaCl胁迫时,甘薯块根愈伤组织积累大量Na~ 和Cl~-,其含量和Na~ /K~ 比值随培养时间的延长和培养基NaCl浓度增加而提高,受KCl胁迫的组织,积累K~ 和Cl~-,Na~ /K~ 比值较低,两者均抑制Ca~(2 )的吸收.NaCl或KCl胁迫都促进可溶性糖大量积累,对脯氨酸的累积也有一定的促进作用,可溶性糖的积累效应NaCl>KCl,而脯氨酸是KCl>NaCl.NaCl和KC胁迫均降低组织的渗透势,在相等渗透势的培养基中,组织的渗透势相近.NaCl抑制组织生长大于KCl.     

獐毛愈伤组织耐盐性研究及耐盐变异体的筛选

獐毛（Ａｅｌｕｒｏｐｕｓ ｌｉｔｔｏｒａｌｉｓ ｖａｒ．ｓｉｎｅｎｓｉｓ）匍匐茎茎尖来源的原始型愈伤组织,测定其耐范围为０．３％～１．５％。盐胁迫下,脯氨酸及Ｋ＾＋、Ｎａ＾＋、Ｃａ＾２＋离子在渗透调节中起重要作用。用直接筛选的方法,将原始型愈伤组织放在含２％ＮａＣＬ的选择培养基上连续筛选,获得耐盐性进一步提高的愈伤组织耐盐变异体,在选择培养基上,变异型愈伤组织鲜重相对生长率显大于原始型愈伤组织,     

甘薯愈伤组织对干旱胁迫的生理反应研究

以“芦选一号”甘薯盆栽苗叶片为外植体进行组织培养，建立甘薯愈伤组织诱导和扩繁体系，并以从叶片诱导产生的均匀一致愈伤组织为材料，研究干旱胁迫对细胞膜透性、可溶性糖、脯氨酸含量、SOD、POD、CAT活性的影响，从而在细胞水平上探讨甘薯抵御干旱胁迫的生理机制，主要结果如下：干旱胁迫下，甘薯愈伤组织的膜透性显著增大；中度和重度胁迫下，SOD活性升高；不同胁迫程度处理下，POD活性普遍下降；中度和重度胁迫下，CAT活性普遍升高；不同胁迫程度处理下脯氨酸和可溶性糖含量普遍升高．     

渗透胁迫对小麦愈伤组织GST活性的影响

比较了渗透胁迫下抗旱性不同的小麦愈伤组织GST活性的变化。结果表明 ,水分胁迫初期2种愈伤组织GST活性均明显高于对照 ,重度胁迫的高于轻度胁迫 ;但在轻度胁迫下的后期小偃22细胞GST活性明显高于对照或与对照无明显差别 ,而郑引1号GST活性明显低于对照 ;说明GST可能与细胞对渗透胁迫的适应有关     

脯氨酸和硝酸银对甜玉米幼胚愈伤组织诱导与分化的影响

以甜玉米TD08、TD10的幼胚为外植体,利用不同培养基对其幼胚进行愈伤组织诱导,着重探讨脯氨酸对玉米愈伤组织诱导的影响,同时检验硝酸银是否能替代脯氨酸在玉米愈伤组织诱导中所起的作用.结果表明,脯氨酸有利于玉米愈伤组织诱导且愈伤质量较好;硝酸银不能替代脯氨酸在玉米愈伤组织诱导及分化中所起的作用.     

甘草根愈伤组织诱导与可溶性蛋白含量变化

利用胀果甘草无菌苗根作为外植体诱导愈伤组织,经过多次继代培养筛选出4种类型的愈伤组织,并以不同质量浓度的NaCl胁迫处理Ⅰ型愈伤组织.测定了在根愈伤组织诱导过程中,不同类型愈伤组织继代培养中和Ⅰ型愈伤组织在NaCl胁迫处理条件下的生长情况及可溶性蛋白含量的变化情况.结果显示,以苗龄10d的无菌苗根为外植体可以诱导产生愈伤组织,以MS培养基附加1.0mg/L 2,4-D和0.2mg/L6-BA时,根愈伤组织的诱导率最高,继代培养生长状况良好为Ⅰ型愈伤组织;根外植体两端开始形成愈伤组织时可溶性蛋白含量最高,为2.01mg/g;不同培养基上继代培养的根愈伤组织生长状态不同,可溶性蛋白含量也有不同,以Ⅰ型愈伤组织中可溶性蛋白含量最高;Ⅰ型愈伤组织在5g/L NaCl胁迫下,继代培养21d后,愈伤组织生长量明显提升,在14~21d愈伤组织可溶性蛋白含量明显提高.本研究表明甘草愈伤组织对低质量浓度的盐胁迫有一定的适应性,使其可溶性蛋白含量升高,在可溶性蛋白含量剧烈变化期间,愈伤组织生长量明显提高.     

非生物胁迫处理对植物离体组织培养再生效果影响研究进展

植物离体组织培养再生性能受多种因素影响。早期关于提高植物组织培养和植株再生效率的策略往往侧重于基因型筛选、培养基改良和植物生长调节剂搭配等方面,忽略了环境胁迫条件对植物离体培养再生效果的影响。据此,综述了不同胁迫诱导对植物离体组织培养再生的影响,主要包括氧化、渗透、水分、伤害和温度等胁迫。氧化胁迫对植物细胞的再生过程具有双重作用,即氧化胁迫引发植物体内相关抗氧化胁迫酶类合成,从而促进再生,但是发生氧化胁迫的细胞因其细胞膜通透性发生改变,易导致细胞死亡;短期渗透胁迫对植物胚性愈伤组织再生能力具有明显的促进作用;伤害通过影响相关基因表达而对体细胞胚胎产生积极作用;温度对植物体细胞胚胎发生的影响具有发育阶段的特异性以及处理强度的依赖性,适度的温度处理可诱导出较多的胚性愈伤组织。因此,对用于组织培养的外植体进行适当的逆境胁迫前处理,有助于植物组织培养过程胚性愈伤组织的产生,并最终促进植物离体组织培养再生性能的提升。     

红芪组织培养中次生代谢产物的研究：Ⅲ.黄芪甲甙和游离？…

利用ＨＰＬＣ和高速氨基酸分析仪测定红芪各种愈伤组织中黄芪甲甙和游离氨基酸的含量。结果表明，黄氏甲甙含量以分化愈伤组织为最高，是未分化愈伤组织的１２．５倍。而游离氨基酸含量化愈伤组织与未分化愈伤相比较表明：脯氨酸、胱氨酸、精氨酸和谷氨酸都有一定程度的降低，其中尤以脯氨酸，胱氨酸的降低幅度较大。     

愈伤组织生长的影响

通过对不同盐浓度胁迫下小麦愈伤组织增重百分率数据的统计分析可知,一般敏盐小麦的愈伤组织增重百分率随着盐浓度的增加而显著降低.H870634小麦的愈伤组织增重百分率对盐浓度的回归方程为yH870634=-18167x 109.31,即当非盐胁迫时,其愈伤组织每天增长7.29%;在0.5%NaCl时,其增长降低到1.23%,几乎接近停滞生长的状态.     

红芪组织培养中次生代谢产物的研究 Ⅲ.黄芪甲甙和游离氨基酸在红芪愈伤组织中含量变化的相关性

利用ＨＰＬＣ和高速氨基酸分析仪测定红芪各种愈伤组织中黄芪甲甙和游离氨基酸的含量．结果表明,黄芪甲甙含量以分化愈伤组织为最高,是未分化愈伤组织的１２ ．５ 倍,而游离氨基酸含量分化愈伤组织与未分化愈伤组织相比较表明：脯氨酸、胱氨酸、精氨酸和谷氨酸都有一定程度的降低,其中尤以脯氨酸、胱氨酸的降低幅度较大．由此推测这４ 种氨基酸可能是次生代谢产生黄芪的前体物质．     

盐胁迫下龙爪稷愈伤组织内脯氨酸和丙酮酸含量变化的关系

盐胁迫下，龙爪稷愈伤组织内脯氨酸积累，在胁迫后第１～７ｄ内脯氨酸变化迅速；游离氨基酸构成发生变化；组织内丙酮酸含量出现高峰，此峰与脯氨酸峰在出现时间上有一定关系．     

盐胁迫对不同基因型小麦成熟胚愈伤组织生长的影响

通过对不同盐浓度胁迫下小麦愈伤组织增重百分率数据的统计分析可知,一般敏盐小麦的愈伤组织增重百分率随着盐浓度的增加而显著降低．H8706-34小麦的愈伤组织增重百分率对盐浓度的回归方程为yH8706-34=-18167x 109．31,即当非盐胁迫时,其愈伤组织每天增长7．29％;在0．5％NaCl时,其增长降低到1．23％,几乎接近停滞生长的状态。     

甘蔗组织培养中不同阶段的抗生素及PPT抗性筛选试验

本试验在甘蔗高效再生体系的基础上,在心叶愈伤组织诱导、胚性愈伤组织芽分化、生长以及生根各阶段的培养基中,分别附加不同质量浓度的G418、潮霉素(Hyg)和除草剂PPT3种选择性试剂,以确定甘蔗遗传转化所用的最佳筛选浓度.试验表明:福农81-745(糖蔗)与Badila(果蔗)2个品种对G418、Hyg和PPT的抗性差异不大;G418、潮霉素和PPT在甘蔗组培各个阶段均对外植体有强烈的抑制作用.因此建议在甘蔗遗传转化中,G418和Hyg对甘蔗愈伤组织诱导生长,芽分化、生长及试管苗生根3个阶段的抗性筛选质量浓度均为30mg·L-1;PPT对愈伤诱导生长和芽分化、生长2个阶段的抗性筛选质量浓度为0.75mg·L-1,而生根阶段为1.00mg·L-1.     

基因型及生长调节物质对玉米成熟胚培养的影响

对30个基因型的玉米成熟胚进行离体培养,研究不同基因型对培养的反应和培养基对成熟胚愈伤组织诱导和生长的影响.结果表明,成熟胚的愈伤可诱导能力较为普遍,但诱导频率因基因型的不同有很大差异,不同基因型所诱导出的愈伤质量也有所不同;MS、N6两种基本培养基对成熟胚出愈率的高低影响不大;不同的生长调节物质对成熟胚愈伤组织生长状况有明显的影响,脯氨酸的添加对愈伤组织质量有促进作用;细胞分裂素对愈伤组织的质量和长势均有一定的负面影响.     

干旱胁迫下红砂渗透调节和抗氧化保护系统的响应研究

采用盆栽试验,测定了在不同土壤水分胁迫下红砂一些渗透调节物质和抗氧化保护酶,探讨渗透调节物质和抗氧化保护系统对干旱胁迫的响应。结果表明:叶绿素、类胡萝卜素和可溶性糖含量在中度干旱条件下增加,在重度干旱胁迫下减少并且低于对照;POD活性和CAT活性在中度和重度干旱胁迫下上升,但中度干旱胁迫高于重度;随着干旱胁迫程度的加强,脯氨酸含量、MDA含量、SOD活性一直呈上升趋势。研究表明,可溶性糖在中度干旱胁迫下起到了很重要的渗透调节作用,但在重度干旱胁迫下没有起到积极的作用;无论在中度还是重度干旱胁迫下,脯氨酸都起到了很重要的渗透调节作用。胡萝卜素、MDA、脯氨酸、SOD、POD和CAT在防御干旱引起的氧化胁迫中起到了显著保护作用,POD和CAT在中度干旱胁迫的保护作用更显著;无论在中度还是重度干旱胁迫下,MDA、脯氨酸和SOD都有显著的保护作用。     

脯氨酸与植物抗渗透胁迫基因工程改良研究进展

综述了脯氨酸的生理功能、生物合成途径、脯氨酸在植物体内的分布和脯氨酸运输蛋白基因、脯氨酸的抗渗透胁迫机制以及植物抗渗透胁迫基因工程改良等方面的研究进展．