高效液相色谱法测定多组分样品的实验教学探讨

高效液相色谱法是天然有机化合物定性定量分析测试的重要手段。该文探讨建立一种采用RP-HPLC同时测定丹皮中几种单萜苷类化合物含量的方法。研究确定了HPLC法分离和测定的色谱条件,包括色谱柱、流动相、流速、检测波长等。该实验为课题组实际研究过程中多组分样品的分析,实验过程中采用流动相梯度洗脱和测试波长变换测试的方法,实验方案的设计涵盖了高效液相色谱法测试中的主要知识点。实践表明,通过实验提高了学生的学习兴趣,锻炼了动手能力。     

高效液相色谱法测定6个不同产地的牡丹叶中丹皮酚和芍药苷含量

采用高效液相色谱法测定6个不同产地来源的牡丹叶中丹皮酚和芍药苷的含量。丹皮酚与芍药苷的测定均以Waters Xbridge shield RP18色谱柱(5μm,4.6 mm×150.0 mm)为固定相,流速1.0 m L/min,柱温30℃,进样量为10μL;丹皮酚检测以甲醇-水(体积比45:55)为流动相,检测波长275 nm;芍药苷检测以乙腈-0.1%磷酸溶液(体积比15:85)为流动相,检测波长230 nm。结果显示,丹皮酚和芍药苷分别在浓度12.5～400.0μg/m L和50.0～800.0μg/m L的范围内与峰面积具有良好的线性关系,精密度、稳定性、重复性和加样回收率都较好,6个不同产地的牡丹叶中丹皮酚和芍药苷的含量有所差别。该研究为牡丹叶质量综合评价及药效的科学解释提供了准确、快速的定量分析方法,同时为探讨不同产地来源牡丹叶的化学成分及其开发利用提供了数据支持。     

RP-HPLC法同时测定加味逍遥口服液中栀子苷、芍药苷和丹皮酚的含量

建立同时测定加味逍遥口服液中栀子苷、芍药苷和丹皮酚含量的RP-HPLC法.采用Inertsil(ODS C18柱(4.6 mm×250 mmi.d.5μm)以乙腈-水梯度洗脱,流速1 mL.min-1,柱温20℃,检测波长235nm.结果表明栀子苷、芍药苷和丹皮酚的线性范围分别为2.25～38.25 mg.L-1、1.69～4.96 mg.L-1和0.585～17.55 mg.L-1;栀子苷的加样回收率平均为98.7%(RSD=2.15%);芍药苷的加样回收率平均为99.79%(RSD=0.31%);丹皮酚的加样回收率平均为98.86%(RSD=2.41%).该法用于同时测定加味逍遥口服液中栀子苷、芍药苷和丹皮酚的含量,该方法具有简便、快速、准确等优点.     

壮药制剂武打将军酊质量标准研究

【目的】为确保壮药制剂武打将军酊临床用药安全有效,建立其质量标准。【方法】采用薄层色谱法对武打将军酊处方中的虎杖、莪术、川芎、徐长卿、龙血竭、薄荷脑等药材进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对酊剂中的虎杖苷、丹皮酚有效成分进行含量测定。【结果】建立上述6味药材的薄层色谱鉴别法,色谱图特征斑点分离清晰、集中。高效液相色谱法中虎杖苷对照品进样量在0.1~0.7μg时,进样量与峰面积呈良好的线性关系;丹皮酚对照品进样量在0.052~0.364μg时,进样量与峰面积呈良好的线性关系;虎杖苷平均回收率为100.98%,RSD=1.09%;丹皮酚平均回收率为99.62%,RSD=0.91%。【结论】本文建立的武打将军酊质量标准可有效控制壮药制剂武打将军酊的质量。     

黄芩苷工业化生产的实验研究

本文采用高效液相色谱法对黄芩苷含量进行测定,采用正交试验设计,以醇浓度、提取次数、提取时间进行考察,优选黄芩苷的最佳提取工艺;以静置时间、酸沉p H值、保温时间为考察因素,优选黄芩苷的最佳纯化条件.结果表明,黄芩苷最佳提取工艺为用70%的乙醇提取3次,2h/次;最佳纯化工艺为将提取液用酸调整p H值为2. 0,保温30min,静置12h,由此提取工艺和纯化工艺可以获得含量较高的黄芩苷,工艺稳定可行.确定黄芩苷的最佳提取工艺和纯化工艺,为黄芩苷的工业生产提供实验数据.     

将小檗碱的提取分离实验打造成综合性实验

以中药三棵针为实验对象,在提高学生综合应用所学知识、激发学生创新激情和创新能力的思想的指导下,设计涵盖天然产物小檗碱的提取、分离、鉴定及含量测定的综合性实验教学方案。在天然药物化学、分析化学等多个相互紧密关联的二级学科上设计和开展实验,通过多种实验方法结合大型仪器的教学应用,提高药学本科生综合应用专业课基础知识的能力,达到将以往的单元实验能力训练向更高层次综合性实验能力提升的目的。     

痛泻要方分煎液和合煎液有效成分变化分析

对于常见中药复方痛泻要方的分煎液和合煎液中芍药苷和橙皮苷的溶出量采用高效液相色谱法(HPLC)进行分析比较,以确认是否适合采用临床颗粒复配方法使用。发现合煎更有利于芍药苷和橙皮苷的溶出,使得药效更为明显一些。同时对合煎液和分煎液中丹皮酚含量进行测定,均未发现丹皮酚。痛泻要方临床建议采用合煎服用汤剂的方法。     

复方丹皮酚纳米乳中丹皮酚和灵芝多糖的含量测定

建立了复方丹皮酚纳米乳中丹皮酚和灵芝多糖的含量测定方法，丹皮酚测定选用HPLC法，灵芝多糖的测定采用蒽酮硫酸比色法。结果3批乳剂中丹皮酚、灵芝多糖的平均含量分别为7.612和6.127 mg/mL，平均包封率为97.99%，含量稳定均一，包封率高。该方法简便、准确可靠、重复性好，可作为复方丹皮酚纳米乳中丹皮酚和灵芝多糖的含量测定方法。     

复方丹皮酚纳米乳中丹皮酚和灵芝多糖的含量测定

建立了复方丹皮酚纳米乳中丹皮酚和灵芝多糖的含量测定方法，丹皮酚测定选用HPLC法，灵芝多糖的测定采用蒽酮硫酸比色法。结果3批乳剂中丹皮酚、灵芝多糖的平均含量分别为7.612和6.127 mg/mL，平均包封率为97.99%，含量稳定均一，包封率高。该方法简便、准确可靠、重复性好，可作为复方丹皮酚纳米乳中丹皮酚和灵芝多糖的含量测定方法。     

超临界CO2萃取-高速逆流色谱分离纯化丹皮中丹皮酚

采用超临界CO2提取中药丹皮中总丹皮酚,选择萃取温度、萃取压力、物料粒度为因素进行正交实验优选出超临界CO2萃取的最佳工艺条件：即物料粒度40～60目,萃取温度40℃,萃取压力20MPa,提取率可达90%以上。将萃取后的总丹皮酚应用高速逆流色谱进行分离纯化,两相溶剂系统为石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水（1：0.4：1：0.4）,进样量为330mg,得180mg纯度为99.0%的丹皮酚。     

胡黄连酚苷提取工艺研究

应用医药用高浓度乙醇回流提取药材胡黄连的方法,以胡黄连酚苷得量和提取物中胡黄连酚苷含量为主要指标,采用L9(34)正交设计优选胡黄连酚苷最佳提取工艺条件。由正交试验结果得出最佳提取方案为A1B3C3,即用药材量20倍的95%乙醇,分3次回流提取,共4.5 h,其中第一次加10倍量回流2 h,第二次6倍量回流1.5 h,第三次4倍量回流1 h。     

高效液相色谱法检测花椒中黄酮类成分综合实验设计

针对学校林产化工专业天然产物现代分析方法实验课程教学的需要,结合“双一流”专业建设,设计了“不同产地花椒中黄酮类成分的高效液相色谱法检测”综合实验。采用甲醇浸提-盐酸水解法提取花椒中黄酮类成分槲皮素和山奈酚,然后利用高效液相色谱法测定了不同产地花椒中槲皮素和山奈酚的含量。结果表明,实验建立的方法准确可靠,检出限为0.125μg/g,相对标准偏差（RSD）小于2%。教学实践表明,实验加深了学生对理论知识的理解,有效促进了学生理论知识和实践能力的融合,提高了学生的科学素养及综合思维能力,同时也培养了学生的创新思维和团队合作精神。     

高分子科学综合选修实验的教学模式探索与实践

为培养高素质的创新人才,设计基于专业基础实验之上的综合性选修实验的新教学模式,引入"翻转课堂"、"过程评价"等先进的教育理念,将实验课堂从以"教师为中心"转变为以"学生为中心",充分发挥学生的自主性;注重实验内容的整合,将分散的基础实验串联起来,集成为新的综合实验,提高了学生综合分析能力;创新考核方式,采用PPT汇报的形式展示实验过程和结果。这种新的教学模式体现了高分子实验教学的创新性、完整性、可操作性,引领了新时期高分子实验教学的潮流。     

分子生物学综合实验课程的设计和实践

为了培养学生的综合素质和科学的思维方式,提高实际操作能力,对分子生物学实验教学内容进行了改革.在为生物技术专业本科生新增设的"综合性实验"中,把科研成果转化为综合性、设计性实验教学内容,设计了"环境胁迫下拟南芥蜡质基因的表达研究"实验,建立了以"引物设计、RNA提取、cDNA制备、PCR扩增、琼脂糖凝胶电泳"等为实验教学内容的综合实验教学体系,把分子生物学实验中各个独立的实验教学内容整合为一个综合的教学实验项目,取得了较好的教学效果.     

牡丹皮中丹皮酚的提取工艺研究

比较了牡丹皮中丹皮酚的两种不同的提取方法,即水蒸气蒸馏法和乙醇渗漉法,结果乙醇渗漉法比水蒸气蒸馏法丹皮酚的提取率高。因此,进一步考察了乙醇渗漉法的乙醇浓度(75%~95%)、浸泡时间(12~36h)、渗漉速度(2~6ml/min)、乙醇用量(6~10倍)对牡丹皮中丹皮酚提取的影响,利用正交实验设计(4因素3水平)获取9个不同实验条件,并用HLPC法检测丹皮酚,对实验结果分析并结合实际生产得出结论。乙醇渗漉法的最佳条件:乙醇浓度75%、浸泡时间12h、渗漉速度6ml/min、收集相当药材8倍量的体积,丹皮酚的提取率为最高95%。乙醇渗漉法比水蒸气蒸馏法提取丹皮酚,工艺流程简单,可操纵性强,得率高。确定的参数可为以后的生产提供参考。     

材料物理专业实验课程体系的改革与实践

针对材料物理专业的特点,对材料物理专业实验课程设置、实验内容体系等方面进行了改革和探索,将实验课程内容分成"材料科学基础实验"、"材料分析测试实验"、"设计型综合实验"三个模块,采用开放式教学和导师制相结合的教学手段,全程打分的考核办法,提高学生的实践能力.     

地道药材凤丹根际AM真菌与丹皮酚含量的相关性分析

凤丹(Paeonia ostii)含有重要药用价值的次生代谢产物丹皮酚.丛枝菌根真菌(AM真菌)与凤丹存在密切的共生关系,菌根真菌能够直接或间接影响植物次级代谢过程.采用HPLC法测定凤丹中丹皮酚的含量、碱解离-酸性品红染色法测定侵染率、曲利苯兰染色法测定菌丝量、湿筛沉淀法测定孢子密度.结果发现,凤丹根际丛枝菌根侵染率、孢子密度和菌丝量与丹皮酚含量呈显著的正相关.本文通过AM真菌的孢子密度、菌丝量、侵染率与凤丹丹皮酚含量的相关性分析,表明AM真菌是凤丹中丹皮酚含量的促进因素,凤丹体内AM真菌侵染越强,根际土壤中AM孢子产生越多,土壤菌丝量越高,则丹皮酚含量积累越高.研究AM真菌对丹皮酚次级代谢物生成的影响,对进一步研究AM真菌对丹皮酚在药用价值方面提供重要依据.     

丹皮酚及其衍生物的性质研究

从有机胂的角度出发,结合丹皮酚的抗炎、活血和抗肿瘤等特性,合成了一系列的有关丹皮酚和有机胂的衍生物,均为创新化合物;采用正交实验和方差分析对合成化合物的条件进行了探讨,同时对丹皮酚的提取条件进行了优化研究;以创新化合物对人肝癌细胞株HepG2细胞的抗肿瘤活性进行了筛选,获得效果较佳的化合物和最佳的试验浓度,通过对HepG2细胞生长抑制实验、诱导HepG2细胞凋亡分析及机制等的探讨,探索了一类结构简单、较低浓度下可以诱导体外及体内肿瘤细胞凋亡,而对正常细胞影响较小的新型有机胂药物.     

提高“精细化工实验”课教学效果的探索

以粉末涂料固化剂的合成、分析及其应用实验为例,构建以培养应用型本科人才的"精细化工实验"的新式教学模式。这类实验对学生综合利用所学知识的能力是一种挑战,能有效地锻炼和培养学生解决综合问题的能力。对精细化工实验教学综合性、设计性、研究性实验项目中的选题、实施及教学方法进行了探讨。对精细化工专业实验中提高学生综合素质的探索与实践的结果进行了小结。着重提出了将课堂教学、实验教学与生产实际紧密结合,注重培养学生的应用型综合素质。     

丹皮酚及其衍生物的性质研究

从有机胂的角度出发,结合丹皮酚的抗炎、活血和抗肿瘤等特性,合成了一系列的有关丹皮酚和有机胂的衍生物,均为创新化合物;采用正交实验和方差分析对合成化合物的条件进行了探讨,同时对丹皮酚的提取条件进行了优化研究;以创新化合物对人肝癌细胞株HepG2细胞的抗肿瘤活性进行了筛选,获得效果较佳的化合物和最佳的试验浓度,通过对HepG2细胞生长抑制实验、诱导HepG2细胞凋亡分析及机制等的探讨,探索了一类结构简单、较低浓度下可以诱导体外及体内肿瘤细胞凋亡,而对正常细胞影响较小的新型有机胂药物.