一种四膜虫线粒体DNA提取的新方法

本文根据四膜虫线粒体DNA（mtDNA）对碱稳定这一特性，建立了一种更为简便的，能直接提取四膜虫线粒体DNA的方法。该方法快速简便，重复性好，可用于游离细胞材料mtDNA的提取。     

利用线粒体 DNA Cytb 基因 PCR-RFLP 分析方法鉴别青鱼和草鱼

建立了一种以线粒体细胞色素 b（Cyt b）基因为标靶,应用 PCR -RFLP 技术进行草鱼和青鱼种质鉴定的分析方法。设计一对引物 QYCYT -S 和 QYCTY -A 分别对青鱼和草鱼的 Cyt b 基因进行了 PCR 扩增,并选用 BglⅠ和 EcoRⅡ两种限制性内切酶对扩增产物进行酶切分析。结果表明,草鱼和青鱼都可以扩增出1111 bp 的条带,两种酶切检验发现,草鱼扩增产物能被 BglⅠ切成247 bp 和864 bp 两个片段,而青鱼的 PCR 产物能被 EcoRⅡ切成140 bp 和971 bp 两个片段,这表明,mtDNA Cyt b 基因 BglⅠ和EcoRⅡ的酶切位点都可作为鉴定青鱼和草鱼的有效分子标记。利用 PCR -RFLP 分析 mtDNA Cyt b 基因的方法操作简单,是一种快速鉴别草鱼和青鱼的可靠方法。     

珠鸡mtDNA的限制性图谱

应用AvaⅠ，BamHⅠ,BglⅠ,DraⅠ,EcoRⅠ,HpaⅠ,PvuⅡ,SacⅠ,SalⅠ,ScaⅠ和StuⅠ共11种限制酶对珠鸡（Acryllium vulturinum)mtDNA进行单酶切分析，结果表明，珠鸡mtDNA的分子量为16.7kb，另以其中除AvaⅠ和StuⅠ外的9种限制酶进行双酶切分析，构建了珠鸡mtDNA的限制性图谱，并与家鸡（Gallus gallus domesticus)比较，二者mtDNA序列歧异值为0.073。     

白蚁mtDNA提取方法改良及检测

利用mtDNA多态性进行种类鉴定是一种分子生物学常用方法,从DNA水平对白蚁进行物种鉴别并探讨物种的进化,其必要前提是提取到一定数量和质量的mtDNA．在分离得到线粒体后,分别采用CTAB、SDS2种方法提取mtDNA．紫外分光光度计检~I]DNA纯度及浓度,用mtDNA特异性引物进行PCR扩增检测．试验证明2种方法均能成功提取白蚁的mtDNA,SDS法提取效果较好．     

从微量血中快速制备线粒体DNA片段

目的　建立并鉴定用于从微量血中快速制备线粒体DNA片段的技术 .方法　采用微量血样品 ,改进提取线粒体DNA的方法 ;以不同的方法提取的血DNA为模板 ,同时扩增nDNA上的基因片段和mtDNA上的基因片段 ,PCR相对定量分析比较各种方法提取的mtDNA片段的纯度 ;结果　用华美公司生产的ReadyPCR(tm)微量全血DNA纯化系统和作者的方法都得到了mtDNA ,而用作者的方法获得的mtDNA的纯度较高 ;结论　由于线粒体DNA与核DNA存在有同源片段 ,ReadyPCR(tm)微量全血DNA纯化系统和常规酶解法提取DNA不适合用于对mtDNA的鉴定 ,作者的方法简便快捷地排除了核DNA的污染 ,非常适合于对mtDNA进行PCR分析 .     

三索线蛇与过树容蛇肝线粒体DNA的纯化与限制酶图谱

用Sepharose 4B凝胶柱过滤和NaCl离心法纯化了三索线蛇及过树容蛇肝线粒体DNA(mtDNA),它们的分子长度分别为17.75kb及19.70kb。分别用EcoRⅠ,XbaⅠ,BamHⅠ及BglⅡ等4种限制酶消化这两种mtDNA,结果表明:EcoRⅠ,XbaⅠ,BamHⅠ和BglⅡ在三索线蛇肝mtDNA上分别有1,1,2及3个切点;在过树容蛇肝mtDNA上各有4,1,1和2个切点。根据mtDNA的单酶、双酶和部份酶解片段的分析,建立了三索线蛇及过树容蛇肝mtDNA的限制酶图谱。     

8种肉类线粒体DNA的提取及貂源性成分PCR检测方法的建立

目的 研究肉类线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)的提取方法,对8种生肉中貂源性成分进行检测,建立生肉中貂源性成分PCR检测方法.方法 应用改良SDS碱变性法和盐析法提取肉类mtDNA,设计貂肉细胞色素b(cytochromeb, cytb)特异性引物,应用PCR对8种生肉中貂源性成分进行鉴别.结果 两种方法提取肉类mtDNA的浓度和纯度均能保证PCR要求,改良SDS碱变性法提取的貂DNA样品纯度和产率较高;貂引物可以从8种生肉中鉴别出貂源性成分;经过多次重复试验证明了貂肉引物的特异性.结论 该方法快速简便,为肉制品质量监控提供了实验基础.     

小麦线粒体DNA理化特性的初步研究

对小麦(冀麦七号)线粒体DNA(mtDNA)理化特性的初步研究实验表明,小麦mtDNA由主带(大分子)和小分子群两部分组成。在1×SSC溶液中,对小麦mtDNA的热变性特性进行了分析,其Tm值为86℃,(G+C)％含量为40.8。本实验制备的小麦mtDNA大分子都是线状分子;mtDNA小分子中,主要是线状分子,也有少量的环状分子。mtDNA大分子的分子量为58.02—103.09×10~6道尔顿,线状和环状mtDNA小分子量分别为2.4—11.6×10~6道尔顿和0.4—9.1×10~6道尔顿。     

一母系遗传非综合征耳聋家系的线粒体DNA突变分析

在问卷调查及家系随访的基础上,在安徽省淮北市收集到一母系遗传非综合征耳聋家系,利用聚合酶链式反应-限制片段长度多态性分析(PCR-RFLP)和测序技术,检测了该家系成员线粒体DNA(mtDNA)上可导致非综合征耳聋的两个突变热点处(12S rRNA基因上的1 555位点和tRNASer(UCN)基因上的7 445位点)的碱基变化,发现该家系所有母系成员的mtDNA上都有A1555G同质型突变,但7 445位点无异常;进而对该家系两个表型明显不同母系成员(一例具有先天性耳聋表型,另一例听力正常)的mtDNA进行全长测序,结果未在mtDNA上发现除A1555G以外的其他位点突变,只发现了27处多态性序列变化,且两成员的mtDNA无序列差异.说明mtDNA上的A1555G同质型突变是该家系部分母系成员致聋的分子生物学基础之一;推测该家系A1555G突变携带者临床表型的差异可能与mtDNA多态性无关,而更可能是核修饰基因与A1555G突变协同作用的结果.     

光肩星天牛及其近缘种mtDNA序列和基因特点

通过对光肩星天牛及其近缘种mtDNA的7个基因片段的测序，分析了光肩星天牛mtDNA的特点。结果表明，所测的光肩星天牛mtDNA7个基因序列与其近缘种差异达11．3％以上，光肩星天牛种群及个体间碱基差异小于3％，大部分基因基本没有差异，光肩星天牛mtDNA的这一特点说明这些基因在种内较为保守，可用于该虫的鉴定和系统遗传分析；光肩星天牛与黄斑星天牛在这些基因上差异很小，有可能为同一个种。在COI，Cytb等基因测序中，发现部分个体出现差异大的序列，有的为其近缘种基因。     

中国猛禽类线粒体DNA遗传多态性研究进展

鸟类线粒体ＤＮＡ的研究在种群生物学和进化生物学研究方面越来越显示出重要的作用,特别是在遗传多态性和基因流研究方面更具特殊意义。简要回顾了鸟类线粒体ＤＮＡ的研究历史,并分析了中国猛离线粒体ＤＮＡ遗传多态性的研究现状及进展,要点：１．猛禽类线粒体基因组大小存在遗传多态性,２：猛禽类线粒体ＤＮＡ的进化速率与哺乳类相同,３;种间或种内存在丰富的遗传变异;４．不同地理种群存在ｍｔＤＮＡ克隆群的连续性。     

衰老与线粒体DNA缺失

简略综述人体衰老过程中出现的线粒体DNA缺失，包括mtDNA与衰老的关系；衰老过程中的mtDNA容易变异的原因；衰老过程中发生的dmtDNA种类和数量改变等内容．     

Direct evidence for extensive paternal mitochondrial DNA inheritance in the marine mussel Mytilus.

Inheritance of mitochondrial DNA in animals was thought to be strictly maternal. Recently, evidence for incidental paternal mtDNA leakage was obtained in hybrid crosses of Drosophila and mice. In mice, the frequency of paternal mtDNA contributions was estimated at 10(-4), compared with maternal contributions. The common occurrence in the marine mussel Mytilus of heteroplasmic individuals with two or more types of highly diverged mtDNA molecules was interpreted as strong evidence for biparental mtDNA inheritance by some, but not by others. We report here results from pair-matings involving two species of mussels, Mytilus edulis and Mytilus trossulus. Extensive contribution of paternal mtDNA, amounting to several orders of magnitude higher than that inferred for Drosophila or mice, was observed in both intra- and interspecific crosses.     

凤尾菇线粒体DNA片段的克隆与同源性分析

将Ｓａｕ３ＡＩ部分酶切的凤尾菇线粒体ＤＮＡ插入质粒载体的ｐＢＳ＾＋的ＢａｍＨＩ位点，然后以凤尾基线粒体ＤＮＡ为探针与重组质粒ＤＮＡ进行斑点杂交，筛选到６个阳性克隆，选取其中２个阳性克隆的插入片段分别与来６个属的１３个食用菌品种的线粒体ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交，其结果显示两探针能与所有测定的侧耳属品种的线粒体ＤＮＡ杂交，并具多态性，但与其它属线粒体ＤＮＡ只有不同程度的杂交，两探针中Ｈ４的杂交范     

Mitochondrial DNA analysis of ancient Sampula population in Xinjiang

The archaeological site of Sampula cemetery was located about 14 km to the southwest of the Luo County in Xinjiang Khotan, China, belonging to the ancient Yutian kingdom. ¹⁴C analysis showed that this cemetery was used from 217 B.C. to 283 A.D. Ancient DNA was analyzed by 364 bp of the mitochondrial DNA hypervariable region I (mtDNA HVR-I), and by six restriction fragment length polymorphism (RFLP) sites of mtDNA coding region. We successfully extracted and sequenced intact stretches of maternally inherited mtDNA from 13 out of 16 ancient Sampula samples. The analysis of mtDNA haplogroup distribution showed that the ancient Sampula was a complex population with both European and Asian characteristics. Median joining network of U3 sub-haplogroup and multi-dimensional scaling analysis all showed that the ancient Sampula had maternal relationship with Ossetian and Iranian.     

改良碱变性法抽提冷冻山羊肝脏组织线粒体DNA

通过实验建立了一种简便、快捷地从冷冻山羊肝脏组织中制备高质量线粒体DNA（mtDNA）的方法.以差速离心法分离线粒体,用碱性SDS法裂解线粒体膜,释放线粒体DNA后用酚／氯仿抽提.与其他方法相比较,该方法具有对组织新鲜度要求不高,快速、简便、经济、产品产量高以及稳定性好等特点,其得率和纯度均能满足mtDNA多样性分析的要求.     

Deletions of muscle mitochondrial DNA in patients with mitochondrial myopathies

In vitro studies of muscle mitochondrial metabolism in patients with mitochondrial myopathy have identified a variety of functional defects of the mitochondrial respiratory chain, predominantly affecting complex I (NADH-CoQ reductase) or complex III (ubiquinol-cytochrome c reductase) in adult cases. These two enzymes consist of approximately 36 subunits, eight of which are encoded by mitochondrial DNA (mtDNA). The increased incidence of maternal, as opposed to paternal, transmission in familial mitochondrial myopathy suggests that these disorders may be caused by mutations of mtDNA. Multiple restriction endonuclease analysis of leukocyte mtDNA from patients with the disease, and their relatives, showed no differences in cleavage patterns between affected and unaffected individuals in any single maternal line. When muscle mtDNA was studied, nine of 25 patients were found to have two populations of muscle mtDNA, one of which had deletions of up to 7 kilobases in length. These observations demonstrate that mtDNA heteroplasmy can occur in man and that human disease may be associated with defects of the mitochondrial genome.     

动物mtDNA的研究及在鱼类生态学中的应用

概述了动物线粒体的主要特征、动物线粒体DNA(mtDNA)的结构特点、多态和进化；以及线粒体DNA多态研究方法，最后介绍了动物mtDNA的多态性在研究鱼类群体遗传结构上的应用。