长期培养的红豆草愈伤组织及其分化芽中染色体变异的研究

对长城１号和埃斯基红豆草在组织培养和原生质体培养中形成的愈伤组织及分化的芽进行了细胞学研究．结果表明，在上述材料中均存在染色体数的变异，其变化范围为７～１１２，主要变异类型是以７为基数的整倍性增减，非整倍性变化的较少．染色体数的变异程度与愈伤组织的性质、培养时间的长短、继代培养中激素的累积浓度以及２，４－Ｄ的浓度有着密切的关系．在丧失分化能力的长城１号红豆草愈伤组织中，正常核型的细胞仅占３３％～３５％；有分化能力的埃斯基红豆草愈伤组织中，正常细胞为４１％～５０％；而在分化的芽中正常细胞数均超过５０％．培养时间越长，激素累积浓度越高，染色体的变异程度越大．在短时间内使用高浓度的２，４－Ｄ进行培养，也可以引起较大的变异．另外，还观察到了染色体结构的各种变异和有丝分裂异常     

茴香原生质体培养研究

以茴香（ＦｏｅｎｉｃｕｌｕｍｖｕｌｇａｒｅＬ．）幼苗茎切段在ＭＳ附近２，４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ、６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上诱导产生愈伤组织，经４～５次继代后形成胚性愈伤组织。将胚性愈伤组织转至ＭＳ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ＋２，４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．２５ｍｇ／Ｌ的液体培养基中培养，形成胚性细胞悬浮系。悬浮细胞在含有１．５％纤维素酶、１％果胶酶、０．５％蜗牛酶的混合酶液中酶解得到大量的原生质体，原生质体用修改的ＫＭ８Ｐ培养基中做液体浅层培养。２天后细胞发生一裂，两个月后形成０．５～１ｍｍ大小的小愈伤组织，转入含琼脂糖的固体培养基中３周后形成２～３ｍｍ的愈伤组织     

GUS和HPT基因的基因枪法转化水稻

以水稻（丹粳－５号）愈伤组织为受体材料，采用基因枪法将含有ＧＵＳ和ＨＰＴ基因的ＣＭ２质粒导入水稻细胞．经过５０ｍｇ／Ｌ的潮霉素筛选，获得抗性愈伤组织，并在同样筛选压力下诱导分化成苗，获得抗性苗．共获得１７个抗性克隆．ＧＵＳ组织化学检测表明，有１２个克隆为ＧＵＳ阳性，ＧＵＳ和ＨＰＴ基因共表达率为７０％左右．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分子检测证明ＨＰＴ基因已整合到水稻基因组中．     

小麦体细胞胚胎发生的细胞组织学研究

以小麦的幼穗为外植体，接种于Ｎ６Ｂ５ＭｓＩ培养基上，３０ｄ后可形成大量愈伤组织．该愈伤组织继代１次后即产生淡黄色颗粒状的胚性愈伤组织和白色致密状的非胚性愈伤组织．将此两种愈伤组织分别转入Ｎ６Ｂ５ＭｓⅡ培养基上，２５ｄ后胚性愈伤组织分化形成大量体细胞胚．本实验从外植体接种后的０～２５ｄ及胚性愈伤组织转入Ｎ６Ｂ５ＭｓⅡ培养基后的０～２６ｄ各分期取样固定，切片观察表明：小麦的幼穗诱导体细胞胚亦为间接发生，且多为外起源．但体细胞胚的发生既有来自于单个胚性细胞的，也有可能来自于多个胚性细胞或分生细胞团，经细胞分裂和分化发育而形成体细胞胚     

普通小麦,NaCl抗性细胞同工酶等电聚焦电泳分析

本研究报道了NaCl抗性愈伤组织和敏感愈伤组织的过氧化物酶同工醇和苹果酸脱氨酶同工酶等电焦聚分析。结果表明:两种愈伤组织的遗传特性是不同的。这两种同工酶酶谱的差异有可能作为NaCl抗性细胞的生化指标。     

小麦耐盐愈伤组织内源脯氨酸含量和细胞学特征

以小麦幼穗和幼胚为外植体，诱导出愈伤组织，通过在培养基中逐渐增加选择剂（ＮａＣｌ：Ｎａ２ＳＯ４＝４：１）方法，获得耐０．８％至２．０％选择剂的耐盐愈伤组织，其内源脯氨酸含量显著高于相同盐渍条件下的对照组，培养基中选择剂浓度达到１．６％耐盐细胞仍能保持细胞及细胞器正常形态，液泡化程度低，细胞核大，有的细胞中出现二或二个以上核仁，在培养基中选择剂超过１．２％，绝大多数细胞处于坏死或类坏死状态，耐愈伤组     

草木樨抗乙硫氨酸变异系的筛选

用草木樨的愈伤组织，经ＮａＮ３诱为和筛选得到了抗ｄｌ－乙硫氨酸变异细胞系。该变异系在离开选择５个月后，仍明显表现出高于对照系的抗性。ｄｌ－乙硫氨酸变异细胞系愈伤组织中蛋氨酸含量是对照的３１倍，其可溶性蛋白ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳图谱、过氧化酶同功酶图谱、细胞色素氧化酶同功酶图谱均呈现变异。     

刺五加愈伤组织的遗传转化

刺五加胚性愈伤组织经根癌农杆菌Ｃ５８Ｃ１感染后，共培养４７－７２ｈ，再转移到含氯霉素５０ｍｇ／Ｌ的ＭＳ选择培养基上继代培养５０－６０ｄ，筛选得到氯霉素抗性愈伤组织。该愈伤组织能在无激素的ＭＳ培养基上增殖，并检测到胭脂碱合成酶活性，表明是转化愈伤组织。     

不同理化因子对黄花乌头花药愈伤组织诱导的影响

目的：通过不同理化因子对黄花乌头花药愈伤组织诱导研究，为国家一类新药关附甲素的工业化生产提供新的原料来源．方法：以黄花乌头花药为外植体，考察不同植物激素及其配比、不同种类的培养基、碳源、NH4^ 与NO3^-比例、天然添加物及低温处理对花药愈伤组织诱导的影响．结果：2，4—D 2mg/L，KT 0．2mg／L为最佳激素配比；MS培养基诱导愈伤组织效果最好;以蔗糖为碳源，ρ(NH4^ )/ρ(NO3^-)为4：1时有利于愈伤组织的诱导；分别以0．03mmol/L的组氨酸、赖氨酸、色氨酸、谷氨酰胺代替MS培养基中的甘氨酸有利于愈伤组织的诱导，而丝氨酸对其有抑制作用；水解酪蛋白能提高愈伤组织诱导率；低温(4—10℃)处理48—120h能促进愈伤组织生成．结论：植物细胞工程技术是解决黄花乌头原料匮乏问题的可行方法之一．     

小麦耐盐愈伤组织内源脯氨酸含量和细胞学特征

以小麦幼穗和幼胚为外植体，诱导出愈伤组织，通过在培养基中逐渐增加选择剂（ＮａＣｌ：Ｎａ２ＳＯ４＝４：１）方法，获得耐０．８％至２．０％选择剂的耐盐愈伤组织，其内源脯氨酸含量显著高于相同盐渍条件下的对照组．培养基中选择剂浓度达到１．６％耐盐细胞仍能保持细胞及细胞器正常形态，液泡化程度低，细胞核大，有的细胞中出现二或二个以上核仁．在培养基中选择剂超过１．２％，绝大多数细胞处于坏死或类坏死状态．耐盐愈伤组织在培养基中选择剂不超过２．０％，生长良好，可以再生植株，其后代在０．３％ＮａＣｌ土壤中仍表现耐盐性．     

苜蓿乙硫氨酸抗性变异细胞系的筛选及特性分析

用经返地卫星搭载诱变处理豆科牧草紫花苜蓿（Ｍｅｄｉｃａｇｏ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）干种子种植后长出的花序为外植体诱导愈伤组织,以Ｌ－乙硫氨酸为筛选剂,通过多步正筛选途径获得了苜蓿乙硫氨酸抗性细胞系ＭＥ＾ｒＢ．ＭＥ＾ｒＢ在脱离选择压９个月后,其对Ｌ－乙硫氨酸的抗性Ｉ５０（生长量半抑制时的Ｌ－乙硫氨酸浓度）比野生型高１４．２倍,表明抗性系抗笥表达稳定。抗性系还表现出对ＤＬ－甲硫氨酸的交叉抗性和对于冬氨酸     

苜蓿乙硫氨酸抗性变异细胞系的筛选

用经返地卫星搭载诱变处理的豆科牧草紫花苜蓿（Ｍｅｄｉｃａｇｏ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）干种子种植后长出的花序为外植体诱导愈伤组织,以Ｌ－乙硫氨酸为筛选剂,通过多步正筛选途径获得了苜蓿乙硫氨酸抗性细胞系ＭＥ＾ｒＢ,ＭＥ＾ｒＢ在脱离选择压力９个月后,其对Ｌ－乙硫氨酸的抗性Ｉ＾５０（生长量半抑制时的Ｌ－乙硫氨酸浓度）比野生型高１４．２倍,表明抗性系抗性表达稳定。抗性系还表现出对ＤＬ－甲硫氨酸的交叉抗性和对天     

厚朴组织培养与高产细胞系建立的研究

对来自厚朴种源试验林的10个不同基因型材料开展组织培养和高产细胞系,结果表明：基本培养基、激素种类与配比、外植体的取材部位等因素对厚朴愈伤组织的诱导率、生化、褐化均有显影响。B5＋2，4-D 4mg/L NAA 1mg/L培养基的诱导率达到100％；而采用B5＋BA 1.0-2.0mg/L NAA 1.0MG/l的培养基，愈伤组织的增殖率最高，褐化率最低；140、54两个基因型的细胞增殖最快，是其它基因型细胞均值的2．12倍；不同的基因型、培养基、培养时间所产生愈伤组织细胞的厚朴酚类含量不同，以140基因型的细胞系在B5＋BA 2.0mg/L NAA 1.0mg/L的培养基上培养60d为最优。     

激素对小麦愈伤组织诱导和植株再生的影响

比较了2,4-D和Picloram对小麦愈伤组织诱导和植株再生的影响．实验结果表明,培养基中加入2,4-D的诱导效果优于Picloram,2,4-D加入量为6mg／L时,诱导的愈伤组织的分化效果最好．对不同小麦品种幼穗愈伤组织诱导和植株再生的比较结果表明,鄂恩1号、鄂麦11、鄂麦12和山农1355等有较高的植株再生率。其中前3个材料植株再生率达90％以上;从幼穗、幼胚和成熟胚的比较结果来看,幼穗的愈伤组织诱导率和植株再生频率高于幼胚的和成熟胚．     

水稻悬浮细胞的固体表面培养及植株再生

报道了水稻根部悬浮细胞固体表面培养的试验结果。由水稻种子根部细胞诱导的愈伤组织,经两次继代培养后进行液体悬浮培养。除培养基成分外,愈伤组织的分裂活性及生理状态,是影响悬浮细胞迅速增殖的重要因素之一.在固体培养基表面培养悬浮细胞,对细胞团的出现和增殖有显著效果.再生小愈伤组织在再分化前进行一次固体继代培养,对再生愈伤组织的增殖和分化有明显的促进作用.     

山梨醇、ABA和干燥处理对玉米愈伤组织生长的影响

以长期继代培养的玉米愈伤组织为材料,研究了山梨醇、ABA和干燥48h对愈伤组织生长的影响.结果表明,同一基因型随着继代次数的增多,愈伤组织的生长量呈下降趋势;除自交系87-1外,40g/L或50g/L质量浓度的山梨醇能够加快愈伤组织的生长;ABA处理对愈伤组织生长量的影响不明显,仅个别基因型的生长量比对照有所增加;48h干燥处理对所有基因型愈伤组织的生长都有明显的促进作用.比较山梨醇、ABA和干燥48h处理,干燥48h在提高玉米愈伤组织生长量方面效果最好,并且操作简便、没有基因型的差异,具有广泛的适用性.     

用基因枪法转bar基因以培育抗除草剂的直播稻

用基因枪法将 p CB1 质粒 (含 bar基因和 cecropin B基因 )导入到三种有应用前景的直播稻品种中 ,受体材料为来源于水稻未成熟胚的胚性愈伤组织和来源于成熟胚的悬浮细胞系 .当代转化植株显示出很强的对除草剂 Basta的抗性 ,Southern-blot分析显示 :两个外源基因共整合到转化植株基因组中 ;子一代植株中仍含有外源基因 ;来源于同一块愈伤组织的转化植株的整合模式可能是相似的 ,也可能完全不同 .     

钝齿棒状杆菌二氢吡啶二羧酸合成酶的初步研究

本工作对钝齿棒状杆菌AS1.542及其产赖氨酸诱变株253(AEC),365-25P-3(AEC,Hosor~-)赖氨酸分枝途径的第一个酶DDP Sase进行初步纯化,研究天门冬系氨基酸对该酶活性的影响,对钝齿棒状杆菌AS1.542的赖氨酸生物合成调节机制进行初步探讨,发现钝齿棒状杆菌AS1.542赖氨酸分枝途径的第一个酶DDP Sase受末端产物赖氨酸的反馈抑制,在诱变株253(AEC),365-25P-3(AEC,Hoser~-)菌中,赖氨酸对DDP Sase的反馈抑制被部分解除,因而有利于产生大量赖氨酸。     

硝态氮和氨态氮对玉米幼胚愈伤组织的影响

以自交系87-1和组合87-1×5237、A188×87-1的幼胚为材料,在降低氮含量的筛选培养基(8个浓度N0,N25,N50,N75,T0,T25,T50,T75)上筛选三次,进行生长量的测定、筛选后培养基pH值的测定和愈伤组织类型变化情况的观察,结果表明:降低培养基中氮含量,愈伤组织生长变慢,Ⅱ型愈伤组织逐渐减少,Ⅲ型和混合型增多;硝态氮系列浓度筛选培养基的pH值下降幅度较大;硝态氮对玉米愈伤组织的影响大于氨态氮.     

Enhanced urease inhibition activity of Ag nanomaterials capped with N-substituted methyl 5-acetamido-β-resorcylate

Medically, bacterial ureases are important virulent factors and are used for treatment of peptic ulcers and urinary tones. Reported urease inhibitors are associated with various side effects including antibiotic resistance as a major one. Still there is an urgent need to synthesize new urease inhibitors. In this context we have synthesized new urease inhibitor i.e. AgL that is composed of Ag nanomaterials capped with N-substituted methyl 5-acetamido-β-resorcylate(L). The conjugation of L to silver was confirmed through FTIR, UV–vis and TEM analysis.Bare silver nanomaterials(Ag) were also prepared. The stability of AgL nanostructures was determined against various parameters(temperature, high salt concentration, pH) and found to be stable. The in vitro antimicrobial(antibacterial, antifungal), enzyme inhibition(xanthine oxidase, urease, carbonic anhydrase, α-chymotrypsin,cholinesterase) and antioxidant activities of AgL were investigated and compared with Ag, L and standard drugs.In comparison to other bioactivities, AgL shows statistically enhanced selective enzyme inhibition activity against urease enzyme. Urease inhibition activity of AgL was significantly greater than standard drug(thiourea),L and Ag. On a per weight basis, AgL required about 11–18 times less amount of L for inhibition of urease enzyme.