烟草表皮细胞薄层培养中第一次无丝分裂时的核及核外微丝骨…

通过Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８和ＴＲＩＴＣ－Ｐｈａｌｌｏｉｄｉｎ对烟草茎表皮薄层２细胞的非固定染色观察，发现细胞无丝分裂过程中核及其外围微丝鞘发生了很大变化，染色质在分裂时形成卷曲拉裂状，此时核外微丝鞘完全消失，直至染色质分开后，两组以持同伸张状态回缩时，微丝才重新聚合排列，并最后形成两个子核的微丝鞘。     

药物诱发鲫鱼外周血红细胞无丝分裂的观察

本文报导了水污染物NaF和致癌诱变剂NaN_3诱发鲫鱼外周血红细胞无丝分裂率的初步结果。表明NaF和NaN_3都能诱发鲫鱼外周血红细胞无丝分裂,并给出了诱发药物NaN_3剂量的有效范围。在有效范围内,NaN_3的诱发率很明显。     

活体烟草BY-2悬浮细胞微丝骨架的标记

微丝骨架是细胞骨架的重要成员,在细胞的多项生理活动中发挥着重要作用.本论文利用荧光标记鬼笔环肽技术和GFP融合蛋白技术,对活体烟草BY-2悬浮细胞中微丝骨架的标记方法进行了探索,结果表明,10nmol/L的Alexa488-Phalloidin为细胞微丝骨架标记的最佳浓度,利用PCR等技术构建pPZP-NtFABD2-GFP植物表达载体后,转化烟草BY-2悬浮细胞,激光共聚焦扫描显微镜观察发现,NtFABD2-GFP融合蛋白能够清晰地显示活体烟草悬浮细胞内的微丝骨架.这些结果为进一步深入研究微丝骨架在活体植物细胞中的功能奠定了基础.     

荧光染色观察钝节拟丽藻中无丝分裂的研究

用DAPI荧光染色法对处于不同生长时期钝节拟丽藻(Nitellopsis obtuse)的节间,小枝,苞片,节部及假根中细胞的细胞核的分裂方式进行了研究,发现无丝分裂是钝节拟丽藻藻体细胞核的唯一分裂方式.在细胞核无丝分裂过程中,染色质不发生浓缩,不形成染色体,核膜不解体,核的分裂部位不定,产生的子核大小,形状各异.     

烟草薄层培养早期细胞核形态与核DNA含量变化的研究

通过应用ＤＮＡ专一性活体荧光染色剂Ｈｏｅｃｈｅｓｔ３３２５８对烟草茎表皮细胞薄层培养物的细胞核进行活体染色，发现在培养早期，细胞核发生了明显变化，由分化时的一般扁圆形和靠壁的位置逐渐变成圆形和居中的位置；核体积增大；染色质结构由致密变得疏松；而后染色质凝缩，发生无丝分裂；经数次分裂之后，细胞形态较一致，通过单细胞核内ＤＮＡ含量的测定，发现细胞分裂之前，核ＤＮＡ含量不增加；而最初几次分裂之后，含量减     

烟草悬浮细胞细胞核及核骨架中存在有肌动蛋白和肌球蛋白的证据

自烟草悬浮培养细胞中分离出细胞核,提取核总蛋白后,用DNase Ⅰ消化去除核酸和2M NaCl抽提后制备成细胞核骨架.以抗β-actin的抗体作一抗,辣根过氧化物酶标记(HRP)的羊抗兔抗体作二抗进行免疫印迹.结果证实,在细胞质、细胞核与核骨架中均存在与肌动蛋白抗体呈阳性反应的抗原.以抗myosin Ⅰβ抗体作一抗,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔抗体作二抗进行免疫印迹.也证实了细胞核中存在与肌球蛋白抗体呈阳性反应的抗原.上述结果证明,肌动蛋白和肌球蛋白是烟草悬浮细胞细胞核及核骨架的组成成分.来源于老鼠纤维原细胞细胞核中的肌球蛋白Ⅰ存在于烟草细胞核中也表明细胞核中的肌动蛋白和肌球蛋白在生物进化过程中是相当保守的.     

轮藻科(Characeae)三个属无丝分裂的研究

用Giemsa常规染色法和DAPI(4',6-diamidino-2'-phenylindole)荧光染色法对轮藻科(Characeae)3个属:乳突丽藻(Nitella papillata)、钝节拟丽藻(Nitellopsis obtusa)和弧枝轮藻(Chara connivens)进行了细胞核无丝分裂研究.结果发现无丝分裂是这几种藻体的主要分裂方式;同种藻不同部位,不同种藻之间,无丝分裂形态有所不同.     

降低PARP酶活性对培养细胞SCE及微核效应的影响

聚腺苷二磷酸核糖基化作用是细胞内的一种重要的核蛋白转译后加工修饰，它参与细胞内很多重要的生物事件．催化该反应的酶是聚腺苷二磷酸核糖合酶（ＰＡＲＰ），底物为ＮＡＤ．本文使用ＰＡＲＰ酶的抑制剂苯甲酰胺处理培养细胞，研究了降低ＰＡＲＰ酶活性对培养细胞姐妹染色单体交换及微核效应的影响，为全面评价ＰＡＲＰ酶抑制剂在细胞内的功效打下基础．     

新生小鼠神经干细胞的分离、培养和鉴定

目的：探讨新生小鼠神经干细胞(NSCs)分离、培养以及鉴定的方法。方法：分离新生昆明种小鼠(出生24h内)的大脑组织,经胰酶消化加机械吹打后,利用无血清培养基悬浮培养细胞,获得具有自我增殖能力的细胞克隆,并将细胞克隆贴壁培养测其分化能力。应用抗Ncstin、Musashi、SSEA-1、NSE免疫细胞化学方法及BrdU标记方法鉴定细胞克隆。结果：从新生昆明种小鼠大脑组织分离的细胞悬液,经悬浮培养,生成大量具有增殖能力的细胞,可形成神经球(neurosphercs),抗Nestin、Musashi、SSEA-1阳性,BrdU标记也呈阳性。细胞克隆贴壁培养后神经球分化为神经细胞,抗NSE阳性。结论：上述方法分离的细胞具有自我更新、自我复制及分化为神经细胞的能力,属于中枢神经系统干细胞。     

Dynamics and roles of phragmoplast microfilaments in cell plate formation during cytokinesis of tobacco BY-2 cells

The phragmoplast is a special apparatus that functions in establishing a cell plate in dividing plant cells. It is known that microfilaments （MFs） are involved in constituting phragmoplast structure, but the dynamic distribution and role of phragmoplast MFs are far from being understood. In this study, the precise structure and dynamics of MFs during the initiation and the late lateral expansion of the phragmoplast were observed by using a tobacco BY-2 cell line stably expressing the microfilament reporter construct GFP-fABD2. Three-dimensional imaging showed that the phragmoplast MFs were initiated by two populations of MFs emerging between the reconstituting daughter nuclei at anaphase, which migrated to the mid-zone and gave rise to two layers of microfilament arrays. FM4-64 stained vesicles accumulated and fused with the cell plate between the two populations of MFs. The two layers of microfilament arrays of phragmoplast with ends overlapped always surrounded the centrifugally expanding cell plate. Partial disruption of MFs at metaphase by low concentration of latrunculin B resulted in the inhibition of the cell plate consolidation and the blockage of cell plate lateral expansion, whereas high concentration of latrunculin B restrained the progression of the cell cycle. Treating the cell after the initiation of phragmoplast led to the cease of the expansion of the cell plate. Our observations provide new insights into the precise structure and dynamics of phragmoplast MFs during cytokinesis and suggest that dynamic phragmoplast MFs are important in cell plate formation.