乳酸脱氢酶同功酶在狗T、B淋巴细胞中的分布

本文中测定了狗淋巴结T、B淋巴细胞的乳酸脱氢酶(LDH)同功酶谱,借以了解这两类细胞在代谢方面的异同。狗淋巴结细胞悬液(含淋巴细胞98％)先形成FAG(绵羊红细胞-兔抗绵羊红细胞抗体-小鼠补体)花环,再于聚蔗糖-泛影葡胺分离液上梯度分离EAC成花细胞和EAC不成花细胞。界面细胞(T细胞丰富)含86.94±7.7％EAC不成花细胞,而沉淀细胞(B细胞丰富)含79.0±10.5％EAC成花细胞。分离的T细胞丰富,B细胞丰富细胞群,和未分T、B的淋巴细胞(49.8±7.896形成EAC花环)以蒸馏水30秒溶红细胞并冲洗,然后用Tris缓冲液     

血红蛋白沈阳(α26(B7)Ala→Glu)——在中国发现的一种新的不稳定血红蛋白

在辽宁沈阳202医院的一例眼科住院病人中发现一种新型的异常血红蛋白,其电泳位置相当于J组,含量为21.5％。患者虽无临床症状,但有轻微的血液学变化及血红蛋白不稳定特性。应用8M尿素-磷酸盐缓冲液的CM-纤维素柱层析分离珠蛋白肽链,在正常α链前可洗脱出一种异常的α链(α~x链)。分离得的α~x链用TPCK-胰蛋白酶消化,消化产物的     

小鼠血清脱氧核糖核酸结合蛋白的研究

细胞内的脱氧核糖核酸结合蛋白(DBP),种类繁多,在复制、转录、基因调控等细胞的主要生命环节中起着重要作用。但细胞外的生物体液中的DBP尚无系统研究。本文以小鼠为动物模型,以脱氧核糖核酸纤维素亲和层析法与聚丙烯酰胺凝胶电泳为主要分离手段,对小鼠血清DBP的含量在上述亲和层析柱上的层析行为、分子量分布范围等进行了观察和分析。小鼠血清取自20克左右瑞士种小白鼠,每批杀鼠20—30只,制备混合血清。DNA纤维     

猪肝中胚层诱导物质的纯化及其诱导性质的研究

我们曾报导过自猪肝得到一种中胚层诱导蛋白,电泳检查表明,它还含有一些杂质。最近,我们以上述蛋白为起点,直接在CM-纤维素柱上层析,用二次连续梯度洗脱(图1),得到了一个纯度提高、生物学活力加强的部分。以东方蝾螈(Cynops orientalis)原肠胚早期外胚层为材料,按Lowry等方法用牛血清白蛋白为标准测定蛋白浓度,用浸泡法试验了二个洗脱部分的诱导能力。发现中胚层诱导活性主要集中在第二个洗脱部分(F_2),而第一个洗脱部分(F_1)在浓度高达1毫克/毫升时尚未表现诱导活力。用Tiselius型自由电泳仪(Electrophoreseger(?)t35,Carl Zeiss)鉴定F_2纯度得图2。由图2可见,除了一个向负极移动、对称的主要组份外,还有—个量较少、移动较慢的成份。     

小鼠乳清酸蛋白启动区指导人促红细胞生成素在转基因小鼠乳腺的表达

以小鼠乳清酸蛋白基因 (mWAP)调控区与人促红细胞生成素基因 (hEPO)构建融合基因 ,经动物个体暂态表达方法确证hEPO可在乳腺特异表达后 ,用显微注射方法将融合基因导入小鼠受精卵 ,再将受精卵移植到假孕小鼠 ,获得 86只G0 代小鼠 ,经PCR Southernblot及Southernblot证实 ,有 5 8只整合阳性小鼠 ,整合率为 6 7% ,ELISAkit,dotELISA等方法检测小鼠39只 ,有 1 6只表达阳性 ,乳汁中人hEPO的表达量高于 1 5 μg/mL .     

单克隆抗体技术

1975年,科勒(Khler)和米尔斯坦(Milstein)证明,小鼠骨髓瘤细胞和用羊红细胞事先免疫过的小鼠脾细胞经过融合,可以从中获得分泌抗羊红细胞同源抗体的杂交体。这种杂交细胞可以在体外连续培养并产生大量的同源抗体。因为这个技术的基本环节在于淋巴细胞之间的融合,故称为“淋巴细胞杂交瘤技     

蓖麻酸多相脂质体的抑瘤作用及机理初探

本文报道一种新的抗癌活性制剂蓖麻酸多相脂质体的抑瘤作用,并对其抑瘤机理进行了探讨。用非离子表面活性剂助溶和注入——超声法,将蓖麻酸分别制成乳剂和多相脂质体,对它们进行动物体内抗癌活性研究的结果表明,在给小鼠腹腔注射300—400mg/kg·d的剂量下,蓖麻酸乳剂对小鼠S_(186)     

小鼠骨髓基质巨噬细胞系的建立及鉴定

将小鼠骨髓细胞进行体外长期培养 ,逐渐换液去掉悬浮造血细胞和多次传代 ,建立了一株小鼠骨髓基质细胞系 .目前在体外培养 15个月 ,传代 6 5次 ,细胞获得了永生化 ,我们将该细胞系命名为QXMSC1细胞 .该细胞平均染色体数为 6 6± 4 .光学显微镜下细胞为椭圆形 ,有多个伪足和单个细胞核 .透射电子显微镜下细胞浆内有许多脂质体和吞噬小体 ,细胞间无桥粒连接、无大量均匀脂滴 ,无中间丝 .组织细胞化学分析为波形蛋白 (Vimentin)阳性、角蛋白 (Keratin)阴性 .非特异性脂酶染色阳性 .该细胞与鸡红细胞共同孵育后可吞噬鸡红细胞 .上述结果表明 ,QXMSC1为小鼠骨髓巨噬细胞 .QXMSC1骨髓巨噬细胞系的建立为进一步研究巨噬细胞在造血与免疫功能重建中的作用创造了条件     

小鼠乳清酸蛋白启动区指导人促红细胞生成素在转基因小鼠乳腺的表达

以小鼠乳清酸蛋白基因（ｍＷＡＰ）调控区与人促红细胞生成素基因（ｈＥＰＯ）构建晤基因,经动物个体暂态表达方法确证ｈＥＰＯ可在乳特异表达后,用显微注射方法将融合基因导入小鼠受精卵,再将受精移植到假孕小鼠,获得８６只Ｇ０代小鼠,经ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ证实,有５８只整合阳性小鼠,整合率为６７％,ＥＬＩＳＡｋｉｔ,ｄｏｔＥＬＩＳＡ等方法检测小鼠３９只,有１６只表达阳性,     

二空缺Dawson型钨磷酸盐K_(10)Na_2H_2P_2W_(16)O_(60)·18H_2O的合成和结构

一空缺和三空缺Dawson型钨磷酸盐(简作P_2W_(17)和P_2W_(15))的存在已有定论。二空缺Dawson型钨磷酸盐(P_2W_(16)),Contant等曾报道过,用Na_2CO_3碱解饱和Dawson结构P_2W_(18)而得,但这一结果很快被他们自己所否定,Pinke和Acerete也证实了用碱解法得到的是三空缺的P_2W_(15),而不是二空缺的P_2W_(16)。因此,P_2W_(16)能否存在是一个值得探讨的问题。     

蚕豆叶细胞膜膜蛋白的研究

目前,人们对动物细胞膜,特别是对人红细胞膜的研究相当深入。现在已经证明,在人红细胞膜的内侧覆盖着一层浓密的网状结构——膜骨架(membrane skeleton)。它主要是由收缩蛋白(spectrin)、连接蛋白(ankyrin)和肌动蛋白(actin)等组成的。类似的膜骨架蛋白在其它动物细胞膜的存在也已经得到证明。     

跨膜Ca2+梯度的消失影响红细胞膜脂的不对称性分布

正常生理条件下,红细胞内Ca~(2+)浓度为10~(-6)mol/L,而血液中的Ca~(2+)浓度则约10~(-3)mol/L,因此红细胞膜两侧存在着1000倍的跨膜Ca~(2+)梯度.有报道在贫血病人的红细胞或老化的红细胞中,红细胞内的Ca~(2+)浓度大幅度上升,导致了跨膜Ca~(2+)梯度的下降.我们曾报道过一个合适的跨膜Ca~(2+)梯度可通过膜脂调节质膜腺苷酸环化酶、肌质网Ca~(2+)-ATP酶的构象和活力.最近,我们又初步报道了一个合适的跨膜Ca~(2+)梯度是红细胞带3蛋白(Band-3)表现较高阴离子转运活力所必须的.那么这种调节作用是否也是通过膜脂进行的呢?众所周     

[Cu(NTO)_2(H_2O)_2]·2H_2O的制备、分子结构和热分解机理

3-硝基-1,2,4-三唑-5-酮(NTO)作为一种高能低感度含能材料受到了有关工作者的极大重视。其金属盐在火炸药方面也有很重要的用途,因而引起了人们很大的兴趣。我们制备了NTO的铜(Ⅱ)配合物的单晶,测定了其结构,并研究了它的热分解机理。1实验部分1.1样品制备将NTO分散于蒸馏水中(M:V=1:4)。在60℃下,边搅拌边用氢氧化锂的水溶液中和至pH值7左右。然后将制得的溶液在60℃下逐渐滴加到硫酸铜水溶液中,得到淡蓝色     

植物蛋白质在溶液中的构型

目前,利用旋光和粘度的数据仍是研究蛋白质在溶液中的构型及其变化的主要依据。我们用这两个方法对南瓜种子球蛋白和赤豆β-球蛋白在溶液中的构型及其变化作了一些观察。将南瓜球蛋白与赤豆β-球蛋白分别溶解于含 Kcl 为 1M 的0.1M 磷酸盐缓冲液中(pH7),在苏联 CM 型旋光仪中测定其比旋[α]_D 值,并在毛细管直径为0.6 mm,长度为40cm 的奥氏型粘度计中,于20±0.05℃测定其粘度。特性粘度(η)是用外推法自粘度增量η_(?)/c—c 浓度曲线求得。在上述溶液中加入重结晶的脲使成 8M,冷却放置过     

国外单克隆抗体进展

1974年,柯勒和米尔斯坦运用乔纳等人的理论,选择经绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞和在体外培养中能持续繁殖的小鼠骨髓瘤细胞系作为融合材料试验将它们融合,以期得到具有两种亲本细胞各自特点(特定分泌抗体的免疫功能和持续繁殖能力)的杂交细胞。这一研究工作取得了决定性的突破。1975年8月7日,     

猪SRY基因的分子克隆及其序列分析

哺乳动物的胚胎发育成为雄性或雌性取决于是否携带有Y染色体.因为Y染色体上存在有能将未分化的性腺(生殖脊)诱导向睾丸分化(雄性)的基因,缺少Y染色体时向卵巢发育(雌性),该基因被命名为睾丸决定因子(Testis-determining factor,人用TDF表示、小鼠用Tdy表示).英国学者Koopman于1990年发现了一位于Y染色体短臂与假常染色体相邻的区域内编码80个氨基酸的单拷贝基因,它所编码的氨基酸序列高度保守.这一基因定名为Y     

跨膜Ca~(2+)梯度与红细胞骨架的稳定性

正常生理条件下,红细胞内Ca~(2+)浓度为10~(-6)mol/L,而血液中的Ca~(2+)浓度则约10~(-3)mol/L,因此在红细胞膜两侧存在着约1000倍的跨膜Ca~(2+)梯度.我们曾报道过跨膜Ca~(2+)梯度对通过膜脂调节质膜腺苷酸环化酶、肌质网膜Ca~(2+)-ATP酶构象和活力的重要性.红细胞骨架(Cell skeleton)是维持红细胞形态和功能的基础.它由两个结构单元组成——细胞膜和膜骨架(Membraneskeleton).     

用鳖红细胞作为流式细胞术内参考标准

流式细胞术(FCM)对细胞样品的测量是相对测量,所以必须有测量的参考标准,这些标准可以分为两类:一类是仪器调正标准,用以校正仪器以保证仪器工作状态的一致性,通常使用的是荧光微球,也有人用鸡红细胞;另一类是内参考标准,用于DNA倍性的测定中,以校正样品在固定、染色和测量过程中的差异,国外用过的内参考标准有鸡红细胞、人淋巴细胞、鳟鱼的红细胞和鲑鱼红细胞。     

心肌病人自由基O_2~水平的变化

本文用分光光度法测定心肌病患者血中红细胞的SOD(超氧化物歧化酶)的活性,以研究SOD活性与心肌病的关系,因为SOD活性直接左右着体内O_2~-的消长: