Paenibacillus sp. K1 β-半乳糖苷酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

从鲜牛奶中分离到1株产β-galactosidase的细菌,经16S rDNA序列比对鉴定为类芽孢菌Paenibacillus sp. K1。提取该菌株的染色体DNA,以pUC18（lac-）为载体,构建其DNA文库;在含有X-gal的LB平板上筛选该文库,得到6个蓝色菌落;对阳性克隆中插入的DNA片段序列测定,鉴定出1个编码全长为2028bp并携带有组成型启动子的β-半乳糖苷酶基因。将该基因导入大肠杆菌BL21（DE3）中,实现了β-半乳糖苷酶高效表达,其酶活为25.06U/mL,高于原始菌株的4.55U/mL,并进一步用亲和层析将该酶进行了纯化。     

T7 DNA 聚合酶基因的改造及其在大肠杆菌中的表达

用聚合酶链式反应技术,从Ｔ７噬菌体中选择扩增编码Ｔ７ＤＮＡ滞酶５’→３’聚合酶的基因序列,扩增片段利用引入的酶切位点克隆至载体ＰＳＫ上,从而得到了不含有３’→５’外切酶基因的Ｔ７ＤＮＡ聚合酶基因,并将该重组基因克隆至原核表达质粒ｐＥＴ２８ａ上,在大肠杆菌中进行了表达。     

DNA计算的应用与展望

DNA 计算机是当前研究的热点问题，我国的研究刚刚起步，本文详细论述了DNA序列的概念及性质，DNA计算的原理，同时介绍了DNA计算的研究进展概况。     

麂属(Muntiacus)动物12SrRNA基因序列分析及其分子进化关系

对麂属（Muntiacus)中3种动物，赤麂（M.muntjak)(2n=6♀，7♂），小麂（M.reevesi)(2n=46),黑麂（M.crinifrons)(2n 8♀,9♂)线粒体DNA12SrRNA基因450bp左右的片段进行序列分析，并根据序列信息建立分子类聚图，同时探讨了这3种动物的起源，分类地位及进行关系，结果表明黑麂起源最早，赤麂次之，小麂最晚。     

AFLP fingerprinting of Chinese epidemic strains of Puccinia striiformis f. sp. tritici

Amplified fragment length polymorphism (AFLP) was used to fingerprint the epidemic strains CY25, CY27, CY28, CY29, CY30, CY31, Hy3, Hy7, Sy13 and a mutant strain WV-4 of P. striiformis f. sp. tritici, the pathogen of wheat stripe rust. The results showed that (i) genetic diversity existed in the pathogen populations, and based on it a dendrogram of these strains was constructed by unweighted pair-group mean average to demonstrate the relationships of the tested strains; (ii) no significant correlation between virulence of the pathogens and the polymorphism of DNA fingerprints was found; ( iii ) AFLP fingerprints showed higher polymorphism than that of the virulence variation; (iv) several new pathotypes identified might evolve independently of the reference strains identified before.     

尼罗罗非鱼和奥利亚罗非鱼性腺的RAPD分析

奥利亚罗非鱼（Ｔ．ａｕｒｅａ）和尼罗罗非鱼（Ｔ．ｎｉｌｏｔｉｃａ）属于鲈形目（Ｐｅｒｃｉｆｏｒｍｅｓ）鲡鱼科（Ｃｉｃｈｉｄａｅ）罗非鱼属（Ｔｉｌａｐｉａ）内的两种鱼类［１］,它们繁殖周期短,生长速度快,抗逆性能强,是热带和亚热带地区重要的淡水经济鱼种,在淡水养殖业中占有重要的地位．但是由于罗非鱼种类繁多,种间杂交容易发生,致使罗非鱼养殖群体之间,或者野生种群和养殖种群之间多有程度不同的混杂,因而出现诸如群体种系不纯,优良经济性状衰减退化（性成熟提早,生长缓慢,个体趋小）等不良后果,直接影响了养殖…     

莲藕DNA纤维的制备方法

建立了一种高效制备莲藕伸展DNA纤维的方法，为莲藕基因组及染色体结构等方面的研究提供了技术支撑。     

不同保存条件下白刺属植物基因组DNA的提取

以硅胶干燥的白刺叶片为材料,分别在-84℃、-20℃冰箱保存和常温保存,对三种不同保存条件下的白刺叶片进行DNA的提取,结果表明,在-84℃和-20℃冰箱里保存1～2年的材料均可采用3×CTAB法有效去除多糖、酚及蛋白质,可获得高质量基因组DNA,而常温保存半年的材料无法获得DNA．通过进行ISSR—PCR实验,提取的DNA扩增均可得到稳定、清晰、多态性好的PCR扩增图谱,-84℃保存的材料所得到的DNA在ISSR—PCR扩增中条楷数目和清晰唐明昴优于-20℃保存的材料．     

紫外辐射对Fei鱼精DNA溶液影响的拉曼光谱研究

报道了鲱鱼精DNA水溶液的拉曼光谱及其分别被UVA(320-400?nm)和UVA&UVB(280-400?nm)两个区段紫外辐射后的拉曼光谱.实验中所用的紫外辐射强度与中国南京地区冬季日光辐射强度相当.实验表明,在仅用UVA区段紫外辐射时,短时间内未见DNA分子结构有明显的变化;而UVA&UVB区段的紫外辐射则对水溶液中的DNA分子造成一定的损害,照射时间愈长损害愈大,首先受到损害的是嘧啶碱基和脱氧核糖.     

乌头基因组DNA提取与RAPD反应体系优化

采用改进方法提取乌头基因组DNA,建立乌头RAPD分析的PCR反应体系,成功地进行了RAPD扩增,筛选出乌头RAPD的最佳方案为:25μl反应体系中包括dNTPs 0.06 mmol·L-1,引物0.2μmol.μL-1,模板DNA40 ng,Taq酶1U,Mg2+ 4 mmol·L-1,10×buffer缓冲液2.5μl,其余部分为无菌超纯水。PCR扩增循环为95℃3 min,38 ℃1 min,72 ℃2min 1次循环;94 ℃=1 min,38℃1 min,72 ℃2 min,45次循环,最后72℃延伸10 min。     

龙眼基因组DNA提取及RAPD反应体系优化的研究

采用改良CTAB法提取龙眼幼叶基因组DNA,并以其为模板对影响RAPD扩增反应的主要因子采用单因素递进分析方法进行优化,建立了龙眼基因组DNA最佳RAPD反应体系,即在25μL的反应体积中,含20 ng模板, 1．0 U Taq DNA聚合酶,2．0 mmol／L MgCl2,各0．20 mmol／L dNTP,0．20μmol／L引物．     

耐热碱性磷酸酯酶基因的DNA序列分析

从栖热菌中克隆到产耐热碱性磷酸酯酶（FD－TAP）基因并进行了DNA序列分析,结果表明此2．0kb的片段含有一个1056bp的开放阅读框,编码501个氨基酸的蛋白质,其N端有一26个氨基酸的信号肽．在起始密码子的上游5bp处有一个5＇－GGAGGT－3＇的SD序列．基因编码区的（G＋C）％为68．7％,第3位密码子（G＋C）％为92．7％．FD－TAP的氨基酸序列与大肠杆菌等生物的碱性磷酸酯酶氨基酸序列比较,相同性为27％,相似性为38％．中央β－折叠区及与活性中心相关的氨基酸残基高度保守．表明FD－TAP具有与大肠杆菌碱性磷酸酯酶相似的结构和作用机制．在相当于大肠杆菌碱性磷酸酯酶的His370至His412两个金属离子结合部位之间,FD－TAP有一72个氨基酸的插入片段,提示该插入片段与FD－TAP的高耐热性相关．     

试剂盒法提取蓖麻基因组DNA的条件优化

利用DNA提取试剂盒提取蓖麻叶片DNA,对其过程进行改良优化,从而获得一种快速、简便的提取蓖麻高质量基因组DNA的方法.在原试剂盒的操作基础上,对乙醇是否冰预冷、消化时间、洗脱液用量、材料用量等条件进行了优化,并对所提取的基因组DNA的浓度、纯度进行了检测.优化后的方法提取到了较高质量的蓖麻基因组DNA.     

聚乙烯基吡咯烷酮对质粒DNA降解效应的研究

为评估聚乙烯基吡咯烷酮（Polyvinylpyrrolidone,PVP）的生物可利用性,研究了不同相对分子质量PVP对闭合环状双链质粒DNA pBR322的降解效应.实验结果表明：在常温、非光催化条件下,相对分子质量小的PVP（PVP8000）可引起质粒DNA构象的改变,并且这种效应与反应温度、反应时间及PVP的相对...     

纳米材料对DNA热变性行为的影响

在基因操作过程中经常需要对脱氧核糖核酸(DNA)进行高温处理,如在聚合酶链式反应PCR操作中就需要对模板DNA进行升降温的操作,因此,DNA的热变性行为是关系到一些基因操作效率高低的关键,琼脂糖凝胶电泳实验显示,1972bp的短链入DNA高温处理后在1000bp左右处出现额外一条下带,而且此条带经过37℃处理数小时即可恢复到1 972bp,不像48 000 bp长链λDNA那样在高温处理后出现弥散现象.另外,显著添加不同的纳米材料对下带出现的温度有明显的影响,意味着添加适量纳米材料可以改变DNA分子结构对温度的敏感性,所发现的下带可能具有尚未报道过的特殊结构.     

DNA在纳米组装技术中的应用

对近年来人们在利用DNA组装纳米结构材料方面所作的研究和取得的成就进行了评述。     

DNA分子标记在真菌系统分类与鉴定中的应用

近年来分子生物学技术的发展,为从核酸分子水平上研究真菌的遗传本质,为真菌的进化研究、系统分类和鉴定开辟了新的途径.概述了几种主要的DNA分子标记的基本原理和特点,以及在真菌鉴定与分类中的应用.     

DNA分子的电性质研究进展

DNA(脱氧核糖核苷酸)分子的电学性质关系到生命信息静态的存储和动态的释放,因此一直备受关注.但仅是随着物理实验手段在生物学研究领域的广泛应用,特别是纳米观测和纳米操纵技术的提高,才使研究单个DNA分子的电学性质成为可能.从20世纪90年代以来开展的大量研究工作表明,探明DNA的电学性质不仅能够帮助理解DNA复制和修复的物理机制,而且指出作为天然的纳米结构材料,DNA分子在分子器件学领域具有巨大的应用潜力.回顾了DNA电学性质的研究成果,并对DNA分子在材料学及分子器件学领域的应用前景作以展望.     

单核苷酸多态性研究进展及其在法庭科学中的应用

单核苷酸多态性(Singlenucleotidepolymorphism,SNP)是人类基因组中单个碱基的变异,其最低基因频率不低于1%,是倍受关注的第三代多态性遗传标记,为法医物证检验提供了新的方向,本文就其研究最新进展、应用及检测手段作一综述.