乙二胺羟丙基壳聚糖固定化天门冬酰胺酶的研究

研制了新型壳聚糖胺基衍生物-乙二胺羟丙基壳聚糖（EDA-HPCS）,并将其用于固定天门冬酰胺酶,分别考察了甲醛活化载体和戊二醛活化载体对固定化酶活力的影响,结果表明,在适当的固定化条件下,甲醛活化EDA-HPCS的固定化酶活力约为30U/g载体,而戊二醛活化EDA-HPCS固定化酶活力约为16U/g载体。     

聚乙二醇改性壳聚糖固定化L-天门冬酰胺酶反应性质研究

研究了聚乙二醇改性壳聚糖(PEG-CS)固定化L-天门冬酰胺酶催化缓冲液中天冬酰胺的反应过程,考察了底物浓度、给酶量、温度、搅拌速率等条件对固定化酶在缓冲液中间歇催化反应过程的影响;以及底物浓度、流量、温度、床层高度等因素对固定化酶在缓冲液中连续催化反应过程的影响。实验结果表明:在适当的反应条件下,聚乙二醇改性壳聚糖固定化L-天门冬酰胺酶可以很好地水解缓冲液中的天冬酰胺。     

壳聚糖修饰L-天门冬酰胺酶对酶活及抗原的影响

采用水溶性壳聚糖对L－天门冬酶胺酶进行化学修饰，修饰后的酶活回收率高达705，修饰酶的比活为每毫克蛋白质121.79U，pH值为7.4，更接近于人体血浆pH值(7.2-7.4），对底物的亲和力有所提高，稳定性增加，抗原性仅为自然酶的1／3，增加了临床使用的安全性。     

聚乙二醇改性壳聚糖固定化L-天门冬酰胺酶的工艺研究

采用交联法制备了聚乙二醇改性壳聚糖(PEG-CS)载体,并将其用于固定化L-天门冬酰胺酶。研究了聚乙二醇浓度、交联剂戊二醛浓度、活化剂甲醛浓度、酶溶液浓度等因素对PEG-CS固定化L-天门冬酰胺酶活力的影响。结果表明：在适当的条件下,PEG-CS固定化L-天门冬酰胺酶的活力可达20～40U／g,并且PEG-CS固定化L-天门冬酰胺酶具有良好的生化性质。     

固定化L-天冬酰胺酶间歇催化反应的动力学模型

测定了３７°Ｃ下以固定化Ｌ－天冬酰胺酶为催化剂,５０μｍｏｌ／ＬＬ－天冬酰胺的Ｔｒｉｓ缓冲液（ｐＨ＝７．４）为底物的时歇反应转化率,并用建立的数学模型对反应过程进行拟合。计算结果表明,提出的传质－催化反应动力学模型能较好地描述反应过程,并揭示固定化酶的传质－催化过程受扩散作用控制。     

壳聚糖固定化果胶酶的制备及其酶学性质研究

以1％壳聚糖与5％戊二醛交联8h制得交联壳聚糖载体,1g载体固定10mg的果胶酶,载体先与酶液缓慢振荡混合30min后,在固定化体系（pH3．4,4℃）中固定反应12h,该条件下制得的固定化酶强度大韧性好。酶活力回收率高达56．31％;固定化酶的最适温度50℃,最适pH3．4,Km^app值为5．42mg·mL^-1,连续使用7次后,酶活力还保留70．45％以上,具有较好的操作稳定性。     

壳聚糖固定化乙醇脱氢酶的酶学性质研究

以壳聚糖作载体,戊二醛作交联剂,并以游离的乙醇脱氢酶作为对照,对壳聚糖固定化乙醇脱氢酶的酶学性质进行研究.结果表明,当戊二醛浓度为0.6%(v/v),交联时间为6 h时,壳聚糖固定化乙醇脱氢酶对温度、碱性环境以及金属离子Cu~(2+)溶液的耐受性均明显增强,且操作稳定性明显提高.     

固定化L—天冬酰胺酶间催化反应的动力学模型

测定了３７℃下以固定化Ｌ－天冬酰胺酶为催化剂，５０μｍｏｌ／ＬＬ－天冬酰胺的Ｔｒｉｓ缓冲液为底时歇反应转化率，并用建立的数学模型对反应过程进行拟合。计算结果表明，提出的传质－催化反应动力学模型能罗好地描述反应过程，并揭示固定化酶的传质－催化过程受扩攻作用控制。     

固定化L—天冬酰胺酶连续催化过程的数学描述

研究了固定化Ｌ－天冬酰胺酶连续化血浆过程，提出描述固定化酶连续催化过程的反应动力学模型，得到的拟合曲线能够和实验值较好地吻合，表明该数学模型能适用于类似血浆的生物流体     

固定化α_葡萄糖苷酶的性质研究

研究了以微球形壳聚糖为载体采用吸附－交联法制备的固定化α-葡萄糖苷酶（简称“ITGL”）的理化特性。结果表明,ITGL的最适pH值为4．5,游离酶（简称“TGL”）的最适pH值为5．0;ITGL的最适温度达到70℃,比TGL的提高5℃,并且ITGL的最适作用温度范围显著变宽,在40－70℃范围内活力较为稳定;ITGL的酸碱稳定性、热稳定性和贮存稳定性均比TGL有较大提高;TGL和ITGL均对高离子强度和脲不稳定;低浓度的Ca^2 和Mg^2 对TGL和ITGL的活力均有增强作用,而Fe^2 、Ag^2 、Cu^2 、Hg^2 对TGL和ITGL的活力均有明显的抑制作用;ITGL的操作半衰期可达24d;以麦芽糖为底物时,ITGL的反应动力学参数无显著变化。     

多孔壳聚糖膜固定化脲酶活性的X射线微区分析

以邻苯二甲酸二丁酯为致孔剂,制备多孔壳聚糖膜,用作固定化脲酶的载体.利用X射线微区分析方法,对其活性进行了定位分析:以BaCl2为捕捉剂,在Tris-HCl缓冲溶液中,底物尿素经固定化脲酶催化水解产生NH3和CO2,后者和捕捉剂反应生成BaCO3,沉积在固定化脲酶的催化活性部位.结果表明:BaCl2可用作固定化脲酶活性定位的捕捉剂;多孔壳聚糖膜通透性好、比表面积大、载酶量高,脲酶均匀分布在膜的外表面和膜内的孔隙中.     

流加葡萄糖对L-天冬酰胺酶发酵的影响及其动力学特性

着重讨论了葡萄糖对Ｌ－天冬酰胺酶发酵过程的影响,并对其发酵动力学特性进行了分析。采用自动流加葡萄糖控制发酵ｐＨ的工艺,可使Ｌ－天冬酰胺酶活力达到６４ｕ／ｍｌ,比添加葡萄糖的摇瓶发酵提高了１４６％。流加葡萄糖控制ｐＨ的Ｌ－天冬酰胺酶发酵是生长相关的;维持２～５ｍｇ／ｍｌ和１．２～１．４ｍｇ／ｍｌ的葡萄糖浓度,可分别使比生长速率和比产酶速率达到０．８１／ｈ和１２００ｕ／ｇ．ｈ。     

壳聚糖固定化纤维素酶在填充床式反应器中反应条件的研究

报道以自制的壳聚糖为载体，戊二醛为双官能团交联剂，将纤维素酶固定化，并制成填充术式反应器，探讨了固定化后纤维素酶的活性回收率，考察了相同底物浓度，顺逆流通过反应器时的反应速度。还探讨了不同温度，ＰＨ值，离子强度条件下反应器的酶促反应速度，以及在最佳温度，一定ＰＨ值条件下流速与反应速度的关系。