猪圆环病毒的分子生物学特性及诊断方法

猪圆环病毒(PCV)病是近年来阻碍养猪业发展的重要传染病,PCV因而成为各国学者的研究热点.本文就猪圆环病毒的基因组结构与功能,主要的编码蛋白质及其功能,分子生物学诊断方法等领域的最新研究进展进行了综述.     

猪口蹄疫的症状和防治方法

猪口蹄疫是一种人畜共患病。口蹄疫俗称"口疮"",蹄癀",是偶蹄兽发生的一种急性、热性、高度接触性传染病。其病原体是微核糖核酸病毒科中的口蹄疫病毒属,此病毒不怕干燥,怕热不怕冷,在低温下(-70℃)十分稳定,可存活10年,在37℃下,48小时内就可灭活,在80℃～120℃病毒则立即死亡。     

猪口蹄疫病毒基因工程疫苗的工程菌的发酵研究

在猪口蹄疫病毒活性肽ＶＰ１融合蛋白基因工程菌Ｅ．ｃｏｌｉＣ５００构建成功的基础上，研究了Ｃ５００的质粒稳定性，Ｃ５００在４种不同培养基中的生长曲线，以及不同种龄，接种量，装液量，碳源氮源对菌体生长的影响。     

猪圆环病毒病诊断技术研究进展

从临床症状和病理变化、病毒的分离和鉴定、针对病毒抗原和抗体的诊断技术等方面,综述了猪圆环病毒病诊断技术的研究进展.     

从疫病监测浅谈对临沧猪圆环病毒病防控的思考

圆环病毒病已成为影响养猪业发展的重要传染病之一。近年以来，部分地区虽然认真开展猪瘟免疫工作，甚至加大免疫剂量，但仍有猪瘟疫情发生，原因多数是已受到圆环病毒感染，抑制了免疫系统，导致不产生免疫抗体，从而激发或并发其它疾病，给养猪业带来严重威胁。     

猪细小病毒血清学检测方法的建立

目的建立猪细小病毒血清学检测方法。方法用抗猪细小病毒的猪源性血清,通过IFA和IEA两种方法,首先将阳性血清吸附PK-15细胞抗原,以排除非特异反应,通过对阳性血清及3种二抗(其中IFA以FITC标记的抗猪IgG抗体,IEA分别以HRP标记的抗猪IgG抗体和SPA-HRP作为二抗)进行浓度梯度滴定,确定最佳工作浓度,并比较三种反应体系的敏感性。结果IFA最高能检测出PPV-猪组织混合感染PK-15细胞模型中1个TCID50,而其它两种反应体系均只能检测100个TCID50。结论间接免疫荧光检测方法比其它两种方法敏感性更高。     

猪轮状病毒的细胞培养

在猴肾传代细胞系（MA－104）上成功培养了猪的轮状病毒。病毒接种前用胰酶处理且维持液中不含血清，连续传代后出现明显的细胞病变（CPE）：细胞先肿大变圆，边界不清，后聚集、萎缩，直到死亡脱落。     

猪口蹄病毒VP1活性肽融合蛋白的纯化

在猪口蹄疫病毒活性肽ＶＰ１融合蛋白基因工程菌Ｅ．ｃｏｌｉＣ５００构建成功的基础上，确定了融合蛋白的分子质量约为７１．０ｋｕ。     

高致病性猪蓝耳病防控知识

猪蓝耳病，又称猪繁殖与呼吸综合征（Porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS），是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）引起猪的一种接触性传染病。高致病性猪蓝耳病是以变异的猪蓝耳病病毒株为主要病原，其它多种病原混合感染发生的一种急性传染病。[第一段]     

288株猪圆环病毒的序列比较及遗传进化分析

目的为进一步了解猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)的遗传进化规律,为该病的预防和控制奠定基础。方法对来自世界各国的26株PCV1和262株PCV2的全序列用生物软件进行了核苷酸的同源性比较,并对其ORF1和ORF2进行了核苷酸和推导氨基酸的比较。结果从核苷酸水平来看,PCV1与PCV2明显分为两支,PCV1间分布没有规律,而PCV2间又分为以来自美国、加拿大、澳大利亚的序列为代表的亚型Ⅰ和以来自法国和新西兰的序列为代表的亚型Ⅱ;但从氨基酸水平来看,其分型并没有规律可循。从遗传进化树可以看出,PCV2的分布并没有地域性和时限性。数据统计显示,尽管相隔近十年之久,但其同源性并没有发生太大的改变,可见PCV2相当保守。另外对PCV2的碱基和氨基酸突变位点进行统计发现,PCV2序列间更倾向于碱基的颠换,但并无单个碱基和氨基酸的偏好性。结论PCV2相对保守,地域性和时限性分布不明显。     

猪圆环病毒2型与猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的诊断

2007年4月,龙岩市某存栏母猪达200头的规模化猪场,保育栏仔猪出现体温升高,呼吸困难,咳嗽,耳、鼻端、四肢及下腹部皮肤发紫,经临床剖检及病理观察大体判断为圆环病毒2型与猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染,为进一步确诊,进行了实验室诊断.分别设计了PCv2及PRRSV的扩增引物,结果从病例中扩增出相应的产物.通过临床、病理诊断及实验室检测.确诊为猪繁殖与呼吸综合征病毒与圆环病毒2型混合感染.     

猪圆环病毒Ⅱ型和链球菌混合感染自然病例的临床病理学研究

对经病原鉴定而确诊为猪圆环病毒Ⅱ型和链球菌的混合感染的自然病例进行了系统的临床病理学研究，结果表明：病猪主要出现PMWS，即（1）消瘦、发育迟缓，有的发热，有的贫血，呼吸困难、跛行、多数淤血、出血．（2）间质性肺炎，融合性肺炎，坏死性肺炎，支气管性肺炎．（3）亚急性淋巴结炎或出血性淋巴结炎．（4）轻度非化脓性脑炎．（5）多发性关节炎．（6）间质性肝炎．（7）纤维素性胸膜炎和纤维素性心包炎．（8）间质性肾炎和变质性肾炎．（9）全身性血液循环障碍．上述临床病理变化猪圆环病毒Ⅱ型和链球菌混合感染作用的结果．     

猪流行性腹泻病毒流行病学调查及毒株致病力研究

为掌握我国PEDV流行情况,在2020年8月至2023年5月期间,共收集160个场区、908份临床腹泻样品,采用qPCR方法进行PEDV抗原检测,并选取部分病料进行了S基因序列测定和分析,同时分离获得了两株GⅡ群流行毒株,并对其致病力进行了研究。结果显示：PEDV病料阳性率为50.7%(460/908),猪场阳性率为68.8%(110/160)。可见,在临床出现腹泻症状的猪中,有很大部分是由PEDV引起的;对S基因的分析显示,当前我国流行的PEDV主要为GⅡ群,占比为90.3%(65/72),而GⅠ群呈现零星发病,占比为9.7%(7/72);成功分离获得两株GⅡ群流行毒株,两者均对3～4月龄的育肥猪有致病力,口服后,33%～67%猪可出现腹泻,实验猪100%感染并持续排毒,最长排毒时间可达攻毒后13 d。对PEDV的流行病学、基因变异和致病力进行的研究为疫病防控和产品开发提供了依据。     

II型猪圆环病毒ORF2基因的原核表达与初步应用

II型猪圆环病毒(PCV2)是引起断奶仔猪多系统衰竭综合症(PMWS)的重要病原.本研究用PCR以构建的PCV2 ORF2重组质粒pBS-T-ORF2为模板,扩增截短的ORF2(tORF2)基因亚克隆至表达载体pGEX-4T-3,构建重组表达质粒pGEX-tORF2并转化大肠杆菌BL21(DE3).经SDS-PAGE及Western blot鉴定,成功表达了谷胱甘肽S转移酶(GST)融合的tORF2,重组蛋白分子量约为45ku,表达量约为菌体总蛋白的20%,重组蛋白具有良好的免疫学活性.用tORF2重组蛋白对20份临床猪繁殖与呼吸障碍综合征(PRRS)阳性猪血清进行Western blot检测,有4份(20%)血清显示PCV2抗体阳性,说明PCV2与PRRSV存在共同感染现象.本研究初步证明表达的tORF2重组融合蛋白可以应用于临床检测.     

猪病毒性脑心肌炎的诊断与防制

对一猪场的病猪进行了临床检查、免疫学检测、病理解剖及组织学观察,结果表明：经ELISA脑心肌炎病毒抗原检测,抗原阳性;临床检查显示急性出血性热性败血症、不典型神经症状;组织学检查显示急性心肌炎、非化脓性脑炎、急性出血性淋巴结炎;结论为猪病毒性脑心肌炎。     

猪伪狂犬病病毒抗体检测的研究进展

伪狂犬病(PR)又名Aujeszky病,是OIE规定的通报疫病,由疱疹病毒引起的严重传染病,具有传播速度快、传播途径多和流行范围广等特点,成为仅次于口蹄疫和猪瘟的主要疫病之一。一些猪场伪狂犬病发病和流行比较严重,而且还有逐渐扩大的趋势,给养猪行业带来了巨大的挑战和经济损失。因此掌握伪狂犬病病毒的临床诊断和防控措施很有必要。本文则对猪伪狂犬病病毒的抗体检测进行了阐述,希望对猪伪狂犬病的诊断有所帮助。     

猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒三重PCR检测方法的建立

通过设计三对引物分别扩增猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)及猪轮状病毒(RV)的特异性基因,建立了一个能对TGEV、PEDV及RV感染鉴别诊断的三重PCR方法。该方法能同时检测TGEV的M基因252bp片段、PEDV的N基因540bp片段及RV的VP7基因412bp片段,而对CSFV、PCV2、PRRSV、PRV等无扩增,其检测TGEV、PEDV及RV的极限为100pg核酸/μL;用该方法对临床收集的26份粪便样品进行检测,结果表明:建立的多重PCR方法具有特异性强,强灵敏度高等特点,能用于临床诊断及流行病学调查。     

牲猪销售的最佳时期

为使牲猪饲养者获得最大利润，本文利用数学模型，分析了牲猪销售的最佳时期。