麻疯树花药愈伤组织诱导分化与生根培养

以麻疯树花粉处于单核中晚期的花药作为实验材料,探讨了麻疯树花药培养从愈伤组织诱导,愈伤组织分化芽,壮苗,生根的整个过程.其中愈伤组织诱导的最好培养基为N6+2,4-D 1.0 mg/L+KT 0.4 mg/L+10%蔗糖,避光培养;在愈伤组织分化芽的过程中,TDZ起到了非常明显的效果,最佳的培养基为MS+TDZ 2.0 mg/L+IAA 2.0 mg/L+水解酪蛋白1g/L+3%蔗糖;最合适的壮苗培养基为MS+GA3 1.0mg/L+6-BA 0.5 mg/L+IBA 1.0 mg/L+3%蔗糖;生根效果     

外源诱导子和温度对黑果枸杞悬浮细胞花青素积累的影响

黑果枸杞富含花青素,是一种具有很高开发利用价值的药食同源植物。以黑果枸杞无菌苗的叶片为外植体诱导愈伤组织建立细胞悬浮体系,研究不同外源激素和温度对黑果枸杞悬浮细胞中花青素含量的影响。黑果枸杞愈伤组织诱导的最佳培养体系为WPM+0.5 mg/L激动素+2.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸+20.0 g/L蔗糖+6.0 g/L琼脂,悬浮细胞培养的最优体系为WPM+0.5 mg/L激动素+2.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸+0.01 mg/L萘乙酸+20.0 g/L蔗糖,其生长曲线呈“S”形,活细胞数量在悬浮培养第18天时达到峰值,为7.93×10⁵个/mL。30 g/L蔗糖、200 mg/L茉莉酸甲酯、2 mg/L脱落酸及16℃单一处理均能显著促进悬浮细胞花青素产量的提升(P<0.05),2 mg/L脱落酸诱导效果最佳。在16℃和3种外源激素的复合处理下,200 mg/L茉莉酸甲酯+16℃的复合诱导处理能显著促进细胞花青素积累(P<0.05),含量是16℃单因素处理的1.13倍。研究结果为进一步优化黑果枸杞悬浮细胞培养体系、促进花青素积累奠定了基础。     

黄芩愈伤组织培养及细胞形态学观察

采用不同的植物激素、碳源、水解乳蛋白(LH)和水解酪蛋白(CH)、光暗条件对黄芩愈伤组织进行培养,通过石蜡切片观察愈伤组织细胞形态。结果表明:0.5mg/LNAA和2.0mg/LKt组合时愈伤组织生长量最多;1.0mg/L2,4-D和0.5mg/LKt组合时,黄芩甙含量最高;蔗糖为2%,葡萄糖为3%或4%时,都不利于黄芩甙的积累;LH、CH、黑暗条件能促进愈伤组织的生长而不利于黄芩甙的积累;光照能显著提高黄芩甙的含量;胚性愈伤组织占优势,已出现明显的微管组织的分化。     

山苦菜无性系建立的研究

以山苦菜无芽嫩茎为外植体诱导愈伤组织,经过继代培养后,以生长状态良好的愈伤组织进行分化培养,继续进行分化苗的生根培养,建立起山苦菜的无性系.结果表明:MS+BA(1.0mg/L)+NAA(0.1mg/L)+蔗糖(30g/L)是愈伤组织诱导和继代培养的最佳培养基;愈伤组织分化的最佳培养基为1/2MS+蔗糖(15g/L);诱导不定芽生根的最佳培养基是1/4MS+IAA(0.2mg/L)+蔗糖(20g/L);山苦菜试管苗移栽的最佳基质为1/2园土+1/2河沙.     

香樟愈伤组织的诱导和改良

以香樟幼嫩茎段为外植体,以MS为基本培养基,以激素和蔗糖质量分数以及pH为实验因子,设计正交实验,探索诱导其愈伤组织的最优培养基.结果表明,培养基为MS+2,4-D 1.5mg/L1+KT1.0mg/L+20 g/L蔗糖,pH为6.0时,愈伤组织诱导率可达89.9%.对所得愈伤组织进行改良,转入到减少硝酸钾质量分数1/4的继代培养基上,其生长旺盛、结构致密,可用于诱导分化.     

钻天柳无芽嫩茎离体快速繁殖的研究

为保护钻天柳这一濒危物种,以无芽嫩茎为材料,进行了愈伤组织诱导和分化,不定芽生根,试管苗的继代培养、移栽、扦插和移植的研究,建立起钻天柳离体繁殖技术.结果证明:MS+BA0.5 mg/L(以下单位相同者略)+2,4-D0.5+NAA1.0+蔗糖30 g/L为无芽嫩茎愈伤组织的诱导的适宜培养基;MS+BA1.0+NAA0.8+蔗糖30 g/L为颗粒状愈伤组织继代培养的适宜培养基;MS+AgNO31.0+BA 0.6+NAA 0.1+蔗糖30 g/L是愈伤组织分化培养和不定芽继代分化培养的适宜培养基;1/2MS+IAA 0.5+NAA 0.1+蔗糖20 g/L是生根及生根继代培养的理想培养基;移植到河岸上的试管苗生长旺盛,生物性状保持不变.     

蔗糖浓度和外源2,4-D与KT浓度对三七幼叶细胞悬浮培养影响的研究

将云南文山三七幼叶诱导出愈伤组织,并采用悬浮震荡培养三七细胞.细胞培养基质中的碳源浓度和激素浓度对培养细胞生长的影响进行研究,实验结果显示:MS+1.5 mg/L2,4-D+1.0 mg/L KT+28 g/L蔗糖,pH为5.8的培养基最适合文山三七幼叶诱导得到的愈伤组织细胞悬浮的培养.     

蝙蝠葛根茎愈伤组织培养及试管苗分化的研究

为保护蝙蝠葛的野生资源,该研究以嫩茎为材料,进行了愈伤组织生长、愈伤组织分化培养,生长芽生根及试管苗移栽和定植的研究。结果证明:MS+琼脂0.46%+蔗糖37 g/L+ZT 0.5 mg/L+La(NO3)3.6H2O 0.3 mg/L+2,4-D 2.4 mg/L是嫩根茎段愈伤组织生长培养的适宜培养基;1/2 MS+AgN030.6 40 g/L+琼脂0.47%+蔗糖3.3%+NAA 0.075 mg/L+BA 0.45 mg/L是愈伤组织分化培养的适宜培养基;White+琼脂0.48%+ABT2号0.6 mg/L+蔗糖1.4%+IAA 0.1 mg/L是生长芽生根培养的适宜培养基;试管苗移栽成活率为89.2%;定植成活率为98.9%。定植的试管苗次年正常开花结果,保持了野生蝙蝠葛的植物学性状。     

中间锦鸡儿组织培养体系的建立

以中间锦鸡儿茎段为外植体,建立了它的组织培养体系,具体条件如下:愈伤组织诱导培养基为MS+GA30.15mg/L+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.4mg/L+AC 0.1g/L+蔗糖25g/L+琼脂6g/L,愈伤诱导率达33.33%;丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖25g/L+琼脂6g/L,诱导率为13.33%;诱导生根培养基为MS+IAA 0.5mg/L+GA30.15mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,生根率达60%;将生根幼苗移至蛭石和营养土体积比为2∶1的基质中,移栽成活率高达100%.     

4种植物激素对紫苏叶愈伤组织诱导及黄酮积累的影响

以紫苏叶为外植体,采用单因素和正交设计试验研究了植物激素对紫苏叶愈伤组织诱导和黄酮积累的影响。结果表明:4种激素对紫苏叶愈伤组织诱导的影响依次为2,4-D>6-BA>NAA>KT;对愈伤组织积累黄酮的影响依次为2.4-D>6-BA>KT>NAA;紫苏叶愈伤组织培养的最佳激素组合为6-BA 2.0 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L+KT 0.6 mg/L+NAA 0.8 mg/L;经愈伤组织培养获得的黄酮含量最高达到3.925%,远高于自然界紫苏叶黄酮含量。上述试验结果说明利用组培技术获得紫苏黄酮有可行性。     

高压静电场对蒙古黄芪愈伤组织增殖和分化的影响

蒙古黄芪愈伤组织经场强为±1.0 kV/cm的高压静电场处理后生长速率明显提高,超氧化物酶(SOD)活性,过氧化氢酶(CAT) 活性和蛋白含量明显高于对照,过氧化物酶(POD)、吲哚乙酸(IAA)氧化酶活性和丙二醛(MDA)含量明显降低.正负高压静电场处理的结果存在着明显差异,正高压静电场能够有效地促进蒙古黄芪愈伤组织芽的分化,而负高压静电场能够有效地促进根的分化.     

蒙古黄芪的组织培养研究

对蒙古黄芪无菌苗的不同外植体(叶片、子叶、下胚轴)进行组织培养研究.结果表明:该三种外植体分别在MS BA2.0mg/L NAA2.0mg/L、LS BA2.0mg/L NAA0.1mg/L、MS BA2.0mg/L NAA2.0mg/L 培养基上的愈伤组织诱导率很高;在这三种外植体中,子叶和下胚轴所诱导的愈伤组织在继代培养基上能分化出芽;试管苗在1/2MS NAA5.0mg/L培养基上生根效果好.     

植物生长调节剂对黄芪愈伤组织中次生代谢物质含量的影响

以膜荚黄芪幼叶为外植体,运用正交设计研究2,4-D、6-BA和NAA等3种植物生长调节剂组合对愈伤组织生产黄芪黄酮和黄芪皂苷的影响．结果表明对黄芪黄酮合成的影响顺序是：NAA〉6-BA〉2,4-D;对黄芪皂苷合成的影响顺序是：2,4-D〉6-BA〉NAA．生产黄芪黄酮和黄芪皂苷的最佳培养基分别为;MS＋2,4-D（0．5mg·L^-1）＋6-BA（1．0mg·L^-1）＋NAA（2．0mg·L^-1和MS＋2,4-D（2．0mg·L^-1）＋6-BA（2．0mg·L^-1）＋NAA（1．0mg·L^-1）．细胞伸长有利于愈伤组织中次生代谢物质的合成．     

碳源对不同产地香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响

【目的】 探究渗透调节物质种类及其不同浓度对香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响,为提高香樟体胚诱导率、优化体细胞胚胎发生体系奠定理论基础。【方法】 以7月初在湖南省郴州、长沙、娄底及怀化市采集的香樟(Cinnamomum camphora L.)的未成熟合子胚为试验材料,分析不同碳源种类、浓度及组合方式对香樟体胚诱导、芽萌发、生根等方面的影响。【结果】 适合香樟的体胚诱导培养基为MS+1.0 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+0.3 mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+1.0 mg/L 链霉素+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L水解酪蛋白;增殖培养基为MS+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L 水解酪蛋白;芽萌发培养基为MS+0.1 mg/L 苯基噻二唑基脲(TDZ)+0.5 mg/L 萘乙酸(NAA)+0.1 mg/L 吲哚丁酸(IBA)+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂;生根培养基为MS+1.0 mg/L IBA+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂。【结论】 经过改良,添加15 g/L蔗糖和30 g/L山梨醇的组合碳源,香樟体胚的诱导率明显提高;添加15 g/L蔗糖和15 g/L山梨醇的组合碳源处理的新植株生根条数多、主根明显,生长状况更优。     

植物生长调节物质对华黄芪愈伤组织诱导、增殖及芽分化的效应

以华黄芪叶片为外植体,在附加不同浓度和比例的２,４－Ｄ与６－ＢＡ的ＭＳ培养基上,探讨植物生长调节物质对华黄芪愈伤组织诱导、增殖及芽分化的效应,并在愈伤组织增殖过程中,初步对愈伤指数与愈伤组织生长量的关系进行了比较,结果表明：在ＭＳ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ培养基上诱导率最高,且形成愈伤组织时间最短;在ＭＳ＋２,４－Ｄ０ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．３ｍｇ／Ｌ培养基上,芽的分化率最高;愈伤指数与“称重法”测定愈伤组织生长所得结果一致．     

白簕愈伤组织的诱导及褐化的防治

研究了不同培养条件、激素和外植体对白簕愈伤组织诱导的影响,并探讨其愈伤组织褐化的防治．结果表明：白簕愈伤组织诱导的适宜外植体为叶片,叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS＋2,4-D1．0mg／L＋6-BA1．0mg／L,诱导率高达92．7％．在继代培养中,采用固体培养对防止愈伤组织的褐化效果最佳,在培养基中分别添加1g/L的活性炭1g／LPVP,也可以有效防止褐化．     

‘黄樽’薄叶金花茶组培苗生根与移栽技术研究

【目的】优化组培苗生根和移栽技术,提高‘黄樽’薄叶金花茶组培生根率和移栽成活率。【方法】以苗龄60 d的继代芽苗为材料,在优选基本培养基(1/2 B5、3/4 B5、B5)与植物生长调节剂(ABT、IBA)组合的基础上,研究2种培养基质[(V_细河沙:V_蛭石=1∶1)(河沙蛭石基质)、琼脂]与2种附加物(白糖、活性炭)形成的5种组合对生根率的影响;以河沙蛭石基质+1/2 B5+ABT 0.5 mg/L+IBA 0.5 mg/L为生根培养基,培养35 d,分别补充白糖15.0 g/L、K₂HPO₄15.0 mg/L、白糖15.0 g/L+K₂HPO₄15.0 mg/L及对照组(CK)等4种处理,培养65 d后,将生根苗移栽到V_细河沙∶V_蛭石=3∶1的基质上,研究4种处理对芽苗生根率、移栽成活率、芽苗茎粗和黄化率的影响。【结果】在优选的培养基1/2 B5+ABT 0.5~1.0 mg/L+IBA 0.5~1.0 mg/L+白糖15 g/L+琼脂6.0 g/L,芽苗生根率仅41.1%~42.2%;培养基质与附加物的5种组合对生根率的影响达极显著水平,河沙蛭石基质+白糖0 g/L和河沙蛭石基质+白糖15 g/L的生根率分别为84.4%和68.9%,高于传统的琼脂白糖组合;生根培养后期,4种处理对生根率的影响不显著,但对移栽成活率影响极显著,补充白糖15 g/L+K₂HPO₄ 15.0 mg/L,克服了芽苗黄化,提高芽苗质量,进一步提高了芽苗生根率和移栽成活率,生根率和移栽成活率分别为91.1%和93.3%。【结论】 ‘黄樽’薄叶金花茶采用传统的白糖琼脂培养方式,其组培生根及组培苗移栽效果不理想。生根培养前期用河沙蛭石基质+1/2 B5+ABT 0.5~1.0 mg/L+IBA 0.5~1.0 mg/L的无糖培养,培养后期补充白糖15 g/L+K₂HPO₄ 15.0 mg/L,是提高‘黄樽’薄叶金花茶生根率和移栽成活率的有效方法,也为其他组培生根困难的植物,尤其是金花茶组植物离体培养,提供了可借鉴的培养方法。     

黄芪愈伤组织的培养及其蛋白质含量的测定

使用不同激素浓度组合的MS培养基对黄芪无菌苗的子叶进行愈伤组织的诱导,并对愈伤组织的可溶性和非可溶性蛋白含量进行测定。结果表明：该外植体在MS＋6-BA0．5mg／l＋NAA1．0mg／l培养基上的愈伤组织诱导率很高。两种蛋白质在前三十天的生长阶段都不断积累,之后开始下降。其中可溶性蛋白质含量在后期有所回升,而非可溶性蛋白质含量下降趋势则更加明显。