罗丹明6G发光分子纳米微球标记凝集素-亲和吸附固体基质室温燐光法测定碱性磷酸酶

在外重原子微扰刑Pb(Ac)2存在下,基于罗丹明6 G(Rhodamine 6G,简写为R)的SiO2纳米微球(简写为R-SiO2)在醋酸纤维素膜(ACM)上于λex/λem=482.38/648.59 nm处能发射强而稳定的室温烧光信号.由该发光微球标记的麦胚凝集素(Triticum vulgate lectin简称WGA),不仅仍能在ACM上与碱性磷酸酶(AP)发生定量的特异性亲和吸附反应,且亲和吸附反应产物能发射更强的室温烧光(RTP)信号,据此建立了R-SiO2纳米微球标记凝集素(WGA)亲和吸附(AA)固体基质室温燐光法(AA-SS-RTP)测定AP的一种新方法.本法的线性范围为1.00～360.00 ag AP spot-1(样品体积0.4μL/斑,对应浓度2.50～900.00fg/ml)),工作曲线的回归方程为△Ip=16.24+0.8856m AP/ag spot-1,r=0.9993.检出限为0.14ag spot-1.分别对1.00和360.00 ag spot-1 AP重复测定11次,RSD为3.9%和3.1.%.本方法灵敏、准确、精密度好,已成功用于人血清中AP的测定.     

一种新的室温燐光法及其分析应用

提出一种新的4代树枝状分子(4G-D)-曲拉通-100X(Triton-100X)磷光标记试剂.基于Triton-100X-4G-D标记的麦胚凝集素(WGA)的产物(Triton-100X-4G-D-WGA),能与碱性磷酸酶(ALP)发生两种(直接法和夹心法)特异性亲和吸附反应(AA),其AA的产物仍然保持4G-D室温磷光的优良性质,且AA产物的△Ip值与ALP的含量成线性关系,据此建立了Triton-100X-4G-D标记麦胚凝集素-亲和吸附固体基质室温燐光法(AA-SS-RTP)测定痕量ALP的新方法,该方法的检出限为0.20ag spot-1(直接法,对应浓度:5.0×10-18 mol L-1),0.14 ag spot-1 (夹心法,对应浓度:3.5x10-18 mol L-1),灵敏度高,重现性和精密度好,直接法和夹心法用于血清中ALP含量的测定,与漳州市中医院ELISA法临床检测的结果相吻合.     

亲和吸附固体基质室温燐光法测定痕量糖

在外重原子微扰剂Pb(Ac)2存在下,异硫氰酸荧光素(FITC)的SiO2纳米微球(简写作FITC-SiO2)在醋酸纤维素膜(ACM)上能发射强而稳定的室温燐光(room temperature phosphorescence,简称RTP)信号.由FITC-SiO2标记的麦胚凝集素(Triticum vulgare lectin,简称WGA)产物(FITC-SiO2-WGA),不仅仍能在ACM上与葡萄糖(glucose,简称G)发生定量的特异性亲和吸附(affinity adsorption,简称AA)反应,且AA反应产物(WGA -G-WGA-FITC-SiO2)能发射更强的RTP信号,其△Ip值与G的含量成线性关系,据此建立了FITC-SiO2标记WGA-AA固体基质室温燐光法(affinity adsorption solid substrate-room temperature phosphorimetry,简称AASSRTP)测定G的一种新方法.按3Sb/k计算,本方法的检出限(LD)为0.47pg spot-1(对应浓度为1.2x10-9 g m L-1,即5.3x10-9 mol L-1),灵敏度高,用本法和G氧化酶法对比测定了血清试样中G的含量,结果相吻合.同时讨论了AASSRTP测定G的反应机理.     

富勒醇-FITC磷光标记固体基质室温磷光法测定痕量碱性磷酸酶

开发了新的富勒醇、异硫氰酸荧光素和N,N-二甲基苯胺(F-ol-(FITC)n-DMA)标记试剂.基于F-ol的活性-OH与FITC游离的-COOH反应生成含有多个FITC分子的复合物(F-ol-(FITC)n-DMA),增加WGA-AP-WGA-F-ol FITC-DMA(WGA和AP分别为麦胚凝集素与碱性磷酸酶)生物靶的发光分子数而进一步提高SSRTP(固体基质室温磷光法)的灵敏度.用F-ol-(FITC)n-DMA标记WGA方法的检出限为0.15 ag spot-1(F-ol)与0.097 ag spot-1((FITC),比F-o1-DMA、FITC-DEA单发光分子标记WGA方法的检出限(0.20 ag spot-1(F-ol),0.22 ag spot-1(FITC)低.用于血清试样中AP含量的测定结果与酶联免疫法相吻合.     

罗丹明6G-二溴荧光素发光分子纳米微球标记凝集素及其分析应用

基于外重原子微扰剂LiAc存在下,罗丹明6G(R)-二溴荧光素(D)SiO2发光纳米微球(R-D-SiO2)在醋酸纤维素膜(ACM)上可分别发射R(λex/λem=481/648nm)和D(λex/λem=457/622nm)强而稳定的室温光信号.用R-D-SiO2标记麦胚凝集素(WGA),在ACM上采用R-D-SiO2-WGA-ALP(直接法)亲和吸附反应方式,研究了利用亲和吸附固体基质室温磷光法(AA-SS-RTP)测定碱性磷酸酶(ALP)的条件和分析性能.研究结果表明,对0.4ml点样量,R-D-SiO2-WGA-ALP法的检出限为0.41agspot-1(457/622nm)与0.44agspot-1(481/648nm).用本法和ELISA方法对比测定了血清试样中ALP的含量,结果相吻合.本研究表明,可分别采用D或R的磷光激发/发射波长进行测定,不仅提高了AA-SS-RTP的灵活性,而且适应性更广.     

一种新的四溴荧光素-六氢吡啶磷光自组装环室温磷光标记试剂与人体疾病预报

发现四溴荧光素(HFinBr4)-六氢吡啶(Piperidine,P)在聚酰胺膜(PAM)的憎水性表面上能形成含多个HFinBr4发光分子的自组装环[(HFinBr4)n-PvSOR,其中SOR是"self-ordered ring"的缩写)]与(HFinBr4)n-P-SOR的室温磷光(RTP)特性.以(HFinBr4)n-P-SOR标记麦胚凝集素(WGA)的产物(WGA-(HFinBr4)n-P-SOR)能与碱性磷酸酶(ALP)发生特异性的亲和吸附(AA)反应.生成的反应产物(ALP-WGA-(HFinBr4)n-P-SOR)能极大程度地提高生物靶上HFinBr4的分子数目,导致HFinBr4的RTP信号剧烈增强,比无形成(HFinBr4)n-P-SOR时的△Ip增大7.8倍,据此建立了(HFinBr4)n-P-SOR亲和吸附固体基质室温磷光法(solid substrate-room temperature phosphorimetry,SS-RTP)测定痕量ALP的新方法(简称为(HFinBr4)n-P-SOR-AA-SS-RTP).该方法灵敏(LD为64.2 zg spot-1)、选择性好、简便、准确,用于人血清中痕量ALP含量的测定与人体疾病的预报,结果与酶联免疫法(ELISA)相吻合,同时,探讨了(HFinBr4)n-P-SOR-AA-SS-RTP测定ALP的反应机理.     

红色偶氮化合物固体基质室温燐光猝灭法测定痕量汞

基于100℃反应1.0min和pH=4.0HAC-NaAC缓冲溶液的条件下,NO_2~-与Griess试剂(对氨基苯磺酸,α-萘胺)反应生成红色偶氮化合物在固体基质上能发射强而稳定的室温燐光,Hg~(2 )能催化红色偶氮化合物致使其燐光激烈猝灭,且Hg~(2 )的含量与△Ip成正比,据此建立了红色偶氮化合物固体基质室温燐光猝灭法测定痕量Hg~(2 )的新方法.Hg2 的含量在0.0080～4.0(fg/spot)(对应浓度0.020～10.00pg/ml)范围内与△Ip符合比尔定律,检出限为4.1ag/spot(对应浓度1.0×10~(-14)g/ml),对0.0080和4.0(fg/spot)的Hg~(2 )进行8次平行测定,其RSD分别为3.6%与4.1%,本方法成功用于水中痕量Hg2 的测定.     

羧甲基纤维素钠增敏铬天青S-邻二氮菲-钙络合物固体基质室温燐光法测定痕量钙

研究了各种表面活性剂对铬天青S（CAS）-邻二氮菲（phen）-钙络合物体系固体基质室温燐光光谱的影响；基于CAS-phen-NaCMC体系能在滤纸固体基质上发射强而稳定的室温燐光，Ca^2＋与phen作用先形成Ca（phen）3^2＋络离子，该络离子与CAS反应生成[Ca（phen）3（CAS）2]三元络合物，从而增加了斑点上CAS的分子数目，使CAS—phen-NaCMC体系的室温燐光信号剧烈增强，羧甲基纤维素钠（NaCMC）对CAS—phen—Ca络合物体系燐光的显著增敏作用，据此建立了一种羧甲基纤维素钠增敏CAS—phen—Ca络合物固体基质室温燐光法测定痕量钙的新方法．在0．4μL（取样浓度为32．0—400．0pg／mL）点样体积内，即Ca^2＋含量在12．8-160．Ofg／斑点范围内与△Ip呈良好的线性关系，工作曲线的回归方程△Ip=14．57＋0．5607mCa^2＋（fg／斑），n=7．相关系数r=0．9990．检出限：2．2fg／斑（相应浓度为5．50pg／mL）．该方法简单、快速、重现性好，用于样品中钙含量的测定，结果满意．同时探讨了铬天青S-邻二氮菲-钙络合物固体基质室温燐光量法测定痕钙的反应机理．     

邻二氮菲增敏锡催化过硫酸钾氧化钙黄绿素固体基质室温燐光法测定痕量锡

基于60℃反应10 min的条件下,过硫酸钾能氧化钙黄绿素(Calcein)在滤纸基质上发射较强且稳定的固体基质室温燐光,锡能催化过硫酸钾氧化钙黄绿素的反应,使钙黄绿素的室温燐光显著增强,phen(邻二氮菲)对该催化反应有显著的增敏作用,据此建立了phen增敏锡催化过硫酸钾氧化钙黄绿素固体基质室温燐光测定痕量锡的新方法.加phen比不加phen时,△Ip提高6.0倍.锡含量为4.0～112.0fg/斑(浓度为10.0～280.0pg/mL,取样量0.4 L)与△Ip成良好的线性关系,线性回归方程△Ip=19.85 2.349C Sn(Ⅳ)(fg/斑)(n=5),r=0.9996,检出限为0.52fg/斑(对应浓度1.3 pg/mL).该方法准确、灵敏、快速、重现性好,并成功用于人发和水样中锡含量的测定.     

发光分子水杨基荧光酮羧甲基纤维素铅微球固体基质室温燐光猝灭法测定痕量的钯

以NaCMC(羧甲基纤维素钠)为前驱体,掺杂水杨基荧光酮(THBF),Pb2 为沉淀剂,用Sol-gel法合成发光分子水杨基荧光酮羧甲基纤维素铅微球(简记为Pb(CMC)2–THBF).Pb(CMC)2–THBF在滤纸基质上可发射强而稳定的室温燐光(RTP).基于EDTA与Pb2 的络合反应,使Pb(CMC)2–THBF微球转化为水溶性组分(PbY2-、2CMC-、THBF),该水溶性组分与痕量上Pd2 作用生成(CMC)2 Pd–THBF,导致Pb(CMC)2–THBF上RTP猝灭,Pd2 上含量与△Ip值成线性关系,据此建立了Pb(CMC)2–THBF固体基质室温燐光猝灭燐上痕量钯上新方法.该方法上检出限为0.38fg/斑(对应浓度为9.5×10-13g/mL),工作曲线回归方程为△Ip=17.95 0.7847 C Pd2 (fg/斑),r=0.9989.本方法用于分子筛催化剂和黄矿石中痕量钯上燐上,结果满意.同时时时了固体基质室温燐光测定钯的反应机理.