RNA干扰技术在植物遗传特性改良中的应用研究

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一项新的分子生物学技术,是外源和内源性双链RNA(double-strands RNA,dsRNA)在生物体内诱导同源靶基因的mRNA特异性降解,从而导致转录后基因沉默的现象。RNAi现象广泛存在于生物体中,是2l世纪的研究热点之一。目前,RNAi及相关沉默反应的机制在植物中的研究取得了重大进展,RNAi已发展成为一种强有力的实验工具,用来控制植物目的基因的表达以获取预期的生物表型,具有广阔的应用前景。在此对RNAi在植物遗传特性改良的研究现状进行概述,以期为RNAi技术在植物上的深入研究提供参考。     

RNA干扰的机制与应用

RNAi是双链RNA介导的一种基因沉默 .通过对果蝇、线虫、真菌及植物的研究 ,RNAi的机制逐渐被证实 .Dicer切割产生的小干扰片断在RNAi过程中发挥主要的作用 .现在 ,越来越多的证据证实RNAi技术在现代生物技术中的重要性 ,并可应用于人类基因治疗 .     

RNAi机制的研究进展

RNA干涉广泛存在于各种真核生物中,而且其基本的作用机制也具有高度的保守性．最近,研究发现RNAi在许多重要的生物学过程中发挥调节作用,具有重要的生物学功能．而且RNAi技术已经成为研究功能基因组学的一种有力工具．     

聚类分析用于序列SAR干涉像对选取

该文分析了干涉像对选取过程,提出一种利用聚类分析进行序列SAR干涉像对选取的方法. 选择合适的去相干因素构建特征空间,将序列SAR影像所有干涉组合的去相干因素映射到该特征空间,从而将干涉像对选取问题转换为特征空间的聚类分析. 根据干涉像对选取原则设计合适的聚类方法对去相干因素进行聚类,聚类结果对应于符合要求的干涉像对,实现序列SAR干涉像对的选取. 实验结果表明该方法简单有效.     

马赫干涉仪

本文讨论了平面波与平面波相干和平面波与球面波相干两种情况下马赫干涉的工作原理及所产生的干涉条纹的特征     

光的干涉与衍射现象的物理本质

以光学课程教学中反映出来的疑难问题为线索,分析了光的干涉与衍射现象,讨论了干涉与衍射现象中光程差的问题,指出了光程差的不同是光的干涉与衍射现象的本质差别.帮助学生更好地掌握光的干涉与衍射的知识,深刻理解干涉与衍射的区别和联系.     

混沌光的杨氏干涉条纹

本文提出了混沌光的一种理想微观模型，在此基础上运用统计方法推出了混沌光呸杨氏干涉条纹的强度空间分布及可见度，给出了一幅从微观到宏观的清晰物理图表。     

利用光的干涉测金属体线胀系数的方法

根据光的干涉原理 ,通过测定空气劈尖的光的干涉条纹间距精确地测量了金属棒受热的微小伸长量 .进而对黄铜的线胀系数进行了测量 .给出了测量金属体线胀系数的一种方法     

X射线小角散射中的粒子间相互干涉效应

X射线小角散射中的粒子间干涉效应是影响实验结果的一个重要因素.已有的若干粒子间干涉的模型和理论不能很好地解释实验事实.实际使用的粒子间干涉效应校正方法为不同浓度试样归一化散射曲线作图外推法.然而在材料科学的许多应用中常常无法测量不同浓度的稀释试样.因此找出干涉函数的经验方程有重要意义.该文测定了超细二硫化钼不同浓度试样在不同角度下的强度衰减因子,从而导出了干涉函数的经验方程:(?)~(-1)=[1+2.5ω~(1.4)+2θ°(15.4ω~(0.5)-23.6ω~2-1.3ω~(0.01))]~(-1)     

牛顿环实验装置的改进及干涉条纹的分析

通过改进牛顿环装置，获得了更加清晰的干涉条纹，从而使得条纹更易于观察，同时也提高了测量的精确度；并运用干涉理论对不同情况下的干涉条纹的光强和对比度进行了分析。     

郁金香ACC氧化酶基因RNAi表达载体的构建

为了构建郁金香ACC氧化酶基因的RNAi表达载体.采用Trizol法提取了郁金香花瓣总RNA,根据郁金香ACC氧化酶基因编码区序列,设计了带有限制性内切酶位点的特异性引物,成功地扩增得到了郁金香ACO基因保守片段.将此片段以正向和反向插入到中间载体pBSin内含子的两端,构建成发卡结构的RNA片段,利用pCAMBIA35S-1301作为桥梁载体,构建了带发卡结构的RNAi表达载体pCAMBIA-ACO.     

RNA干扰技术及其应用

RNA干扰(RNA in terference,RNA i)技术是抑制和逆转基因表达的新型生物学研究工具.论述了RNA i的作用机制及其在基因组学、基因治疗、药物探查等方面的应用情况.d sRNA在酶切作用下产生siRNA,后者与RNA诱导沉默复合物R ISC结合,共同降解靶mRNA,从而达到阻断特异基因表达的目的.该技术已对基因功能、基因治疗和药物筛选等方面的体外实验产生了深刻的影响,但由于存在一些尚未解决的问题,这项技术尚未进行大规模临床应用.     

由mdr_1基因引起的MDR表型的逆转

多药耐药(M DR)是肿瘤治疗失败的主要原因,而肿瘤细胞多药耐药基因(m dr1)编码的细胞膜糖蛋白P170的过度表达是最常见的发生机制.论述了M DR表型在蛋白质和基因水平逆转的研究进展情况,蛋白质水平的逆转过程通过寻找合适的P-gp抑制剂来实现.目前正在进行以traiq-u idar为代表的第3代抑制剂的研究,基因水平的逆转根据机理不同,可分为反义RNA、反义寡核苷酸、核酸和RNA i等4种技术,其中RNA干扰技术是目前逆转肿瘤M DR现象的最新技术,它具有高效性、高特异性和快速性等特点,该技术正在为肿瘤的化疗开创新的前景.     

RNAi在哺乳动物抗病防御中的应用及研究进展

RNAi具有特异性的抑制甚至关闭相关序列基因表达的特点,现已应用于哺乳动物重大传染病治疗、肿瘤治疗、基因功能研究和新基因的发现等领域．本文主要对RNAi在哺乳动物抗病防御中的作用机制、重大疾病的探索、研究新进展及其应用前景等方面作一较为全面的综述．     

大豆胚芽中RNA提取方法的比较评价

从细胞中分离完整性好、纯度高的RNA是进行基因克隆和基因表达研究的基础，不同植物、不同组织的RNA提取难点各异，适宜方法也不尽相同，大豆胚芽富含蛋白质、脂质、多糖、酚类化合物及未知次级代谢产物，其组成成分的复杂性增加了从大豆胚芽中提取高质量的RNA的难度，本文采用了尿素-LiCi法、异硫氰酸胍法及改进的异硫氰酸胍法等三种方法从大豆胚芽中提取了RNA，从RNA的完整性、产率和纯度等方面对这三种方法进行了比较和评价，结果发现改进的异硫氰酸胍法是从大豆胚芽中提取RNA的适宜方法。     

基于C#语言的PKI/CA认证中心的设计

PKI／CA认证中心是目前保证网络信息安全的一种比较可靠的安全体系．本文依照PKI系统的结构框架，给出了一个CA认证中心的结构设计，同时应用目前最先进的C#编程语言，给出了在．NET环境下实现CA认证中心的一种编程方法．     

一步法和离心柱法提取小鼠肝组织RNA的比较研究

从动物组织中提取总RNA技术被广泛使用在现代生物学研究中.文中比较了两种从新鲜动物组织中提取、鉴定纯度及完整性较高的总RNA的技术方法.用进口离心柱法和自行研制的一步法RNA提取试剂TRI-pure分别提取12例小鼠肝脏组织的总RNA,并通过电泳和紫外分光光度计检测,鉴定其提取效率和纯度.两种方法提取小鼠肝组织总RNA的纯度和产量经t检验无显著性差异.自行研制的一步法RNA提取试剂TRIpure可以取代进口离心柱法.     

用TRIzol试剂一步法提取甜菜花蕾中的总RNA

在花期分别对无融合生殖甜菜M14品系和进行正常有性生殖的二倍体甜菜A2Y品系的花蕾进行取样,采用TRIzol试剂一步法,分别提取了它们的总RNA,并测定了总RNA的浓度及纯度。讨论去除RNA酶的方法、具体操作的注意事项和TRIzol试剂一步法与其它方法相比的优越性。该方法为进一步进行mRNA差异显示分析和抑制消减杂交研究提供了总RNA的来源,也为今后能在甜菜中寻找和克隆与无融合生殖相关的基因提供了可靠的保证。