H5N1亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆与表达

 根据已知H5N1亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因序列设计、合成克隆引物.自灭活的云南地方H5N1亚型病毒阳性临床组织样品中提取总RNA,反转录后采用高可信度DNA聚合酶(Pyobest^TMDNA Polymerase)扩增HA基因,采用Invitrogen定向表达系统(Champion^TMpET directional TOPO expression system)进行克隆表达,纯化获得N末端携带多聚组氨酸标签的重组HA,分子质量约78ku.采用阳性血清经免疫印迹及ELISA分析重组HA的免疫反应性,结果表明重组HA能与H5N1亚型病毒抗血清发生特异性结合,具有良好的免疫反应性.     

中山大学科学家已经获得抵御禽流感病毒的抗体

最近，科学家从马身上获得了抵御禽流感病毒H5N1的抗体，救活了感染H5N1病毒的老鼠。 在《呼吸器官研究》杂志上出版的一份研究报告显示，一份100μg剂量的马的抗血清能有效地保护受感染的老鼠。这些结果意味着，从马身上提取的反H5NI禽流感病毒抗体或许能用来防止因感染H5NI禽流感病毒的死亡，或许，能被用来更早地预防人类感染禽流感病毒。     

科学家修改H5N1病毒帮助疫苗研究

科学家修改了H5N1病毒的一个蛋白,从而使其用于发现哪些突变可能让这种病毒进行人际传播,并创造出能用来制作预先防范性疫苗的毒株。H5N1病毒引发了禽流感,它也能偶然传给人类。目前还没有报道H5N1禽流感病毒在人际间传播的病例。科学家相信,如果这种病毒要在人际传播,它表面的一种名为血凝素的刺状蛋白必须发生变异。血凝素蛋白的一个称之为受体结合区(RBD)的部分与宿主细胞的特定部分结合在一起之后,这种病毒才能再进入宿主细胞。科学家让H5N1禽流感病毒受体结合区发生特定变化,然后测试结构发生变化的受体结合区识别禽类和人体细胞…     

H5N1型禽流感病毒HA基因在烟草中的表达

禽流感病毒H5N1是可以直接感染人类的甲型流感病毒,发展植物源口服疫苗是疫苗研究的方向之一.本研究通过农杆菌介导的方法将禽流感病毒H5N1的HA基因转化烟草.共获得38株潮霉素抗性植株,经PCR和Southern-blotting检测,目的基因已整合到转基因植株的基因组中.Western-dotting检测结果表明,目的基因在转基因烟草中得到表达,具有免疫原性,获得了能够表达HA基因的植物口服疫苗候选植株.     

禽流感病毒H5亚型特异性抗原捕捉ELISA检测方法的研究

 在获得禽流感病毒多克隆抗体及H5亚型特异性单克隆抗体的基础上,研究建立H5亚型特异性抗原捕捉ELISA检测方法,用于检测H5亚型禽流感病毒.优化反应条件,确定包被抗体、检测抗体及酶结合物的最佳工作浓度,进行敏感性、特异性、重复性及稳定性分析,并与RT-PCR方法比较.同时使用该方法对野外样品进行检测.结果表明:该方法敏感、特异,具有良好的重复性和稳定性,可用于检测临床样品、鸡胚培养物及细胞培养物中的H5亚型禽流感病毒.     

探讨基于平衡能的禽流感病毒结构分析

该文针对高致病禽流感病毒中的H5N1亚型,利用平衡能的方法,从二级结构的角度,对19株病毒做出功能分类,针对其所包含的八个片段,进行关联分析,对于不同片段对病毒的生物特性的影响做出解释。     

H5N1亚型禽流感的研究

对发生在通辽地区的一起鸡的传染病进行了病原及其型的鉴定、流行病学调查、临床病理学研究，同时采取了综合性防制措施，结果为：该起鸡病为A型禽流感(Avian Influenza AI)H5N1亚型、为高致死性(HPAI)、极具传染性．临床病理学表现为急性热性出血性败血症、急性坏死性胰腺炎、非化脓性脑炎、卡他性上呼吸道炎、卡他性间质性肺炎及多个器官变质性坏死性炎．由于及时采取了隔离封锁，扑杀、消毒、无害化处理，疫情跟踪监测和免疫接种等有效的综合性防制措施，而使该传染病就地扑灭，疫情未造成扩散蔓延．     

艾滋病病毒起源终被发现

在首例艾滋病例出现的25年里,科学家们不断的追寻着艾滋病病毒的祸源,希望能够从这里找到攻克艾滋病病毒的办法。如今,艾滋病病毒的起源终于被发现。美国伯明翰阿拉巴马大学的科研小组证实,人类感染的艾滋病病毒中的H IV-1是起源于喀麦隆的黑猩猩。据报道,由医学教授比阿特丽斯·哈恩领导的科研小组已经将她们的研究成果发表在了《科学》杂志上。科学家收集野生黑猩猩的新鲜粪便样本1300多个哈恩对H IV-1病毒来源的研究工作已经进行了十余年,在喀麦隆政府积极配合下终于迈向了成功。解开H IV-1病毒起源谜团是一件很艰苦的工作,科学家们…     

H5N1亚型禽流感病毒NS1基因的克隆及原核表达

克隆、表达和纯化禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为筛选与NS1相互作用的宿主蛋白以及深入研究NS1蛋白的功能打下基础.根据GenBank中收录的H5N1亚型禽流感病毒NS1基因序列,设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增AIV NS1基因,将酶切处理后的基因片段定向克隆到原核表达载体pET-28a载体上,经酶切分析及序列测定正确后,鉴定出NS1基因的阳性重组子.阳性质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,用1 mmol/L IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE检测,获得预期蛋白的表达,通过Ni-NTA树脂蛋白纯化系统对NS1蛋白进行纯化.结果成功克隆H5N1亚型AIV的NSl基因,其核苷酸序列长度为678 bp,重组蛋白在大肠杆菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示其相对分子质量与预计大小一致,表达产物在上清及包涵体中均有表达.经纯化,目的蛋白纯度高达90%,成功表达纯化出28KD的NS1融合蛋白并鉴定其免疫学活性.成功克隆和表达了禽流感病毒H5N1 NS1基因序列,为进一步研究NS1蛋白的生物学功能奠定了坚实基础.     

中国大陆H9N2亚型禽流感病毒HA基因遗传分析及抗原相关性研究

为研究我国大陆H9N2亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因的分子进化及抗原相关性, 本研究对来自15个省、市、自治区的34株H9N2亚型禽流感病毒的HA基因进行了测序及系统发育分析, 并采用交叉血凝抑制试验及交叉攻毒保护试验对不同遗传分支下毒株间抗原相关性进行了分析. 结果表明, 所有34个毒株HA基因均符合低致病性禽流感病毒的特征, 但毒株间变异程度增加. 系统发育分析表明, 我国大陆H9N2亚型禽流感病毒主要分为三个系列, 各系列内毒株没有明显的地区及时间特征. 抗原相关性研究表明, 不同遗传系列下的毒株其抗原相关性明显低于同一系列内部毒株间的抗原相关性, 说明我国H9N2亚型禽流感病毒抗原性差异较大. 此外, 本研究同时筛选得到了用于制备多价苗的代表毒株.     

禽流感病毒H5N1血凝素基因和神经氨酸酶基因在真核酵母菌中的表达

目的克隆、表达和鉴定禽流感病毒H5N1血凝素基因（hemagglutinin,HA）和神经氨酸酶基因（neuramidinase,NA）序列,为制备抗体和基因工程疫苗打下基础。方法在成功克隆禽流感病毒H5N1全长HA、NA基因并测序的基础上,将部分基因序列克隆到表达载体pMET A上,构建了重组表达质粒pMET A/HA（49～1 587 bp）、pMET A/NA（121～1 200 bp）,电转化真核酵母菌pMAD16,甲醇诱导表达,利用Ni2＋亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,并用Western Blotting和ELISA方法检测其抗原性。结果重组蛋白在酵母菌中可以高效表达,SDS-PAGE显示蛋白表达后形成了二聚体,蛋白纯度占总蛋白的95%以上,ELISA和Western Blotting实验证实,重组蛋白具有良好的抗原性。结论本研究成功克隆和表达了禽流感病毒H5N1 HA、NA基因序列,为禽流感病毒H5N1诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究提供了依据。     

科学家发现“钻石星球”

据英国《每日邮报》8月25日报道,英国科学家新近发现了一颗完全由钻石组成的小行星。这是英国曼彻斯特大学的研究人员发现的,他们近日在《科学》杂志上撰文宣布了这一成果。“钻石星球”的发现源自该科研小组先发现了一颗脉冲星,     

“重要病毒跨种间感染与传播致病的分子机制研究”项目启动

[微生物研究所]4月8日,中国科学院微生物研究所高福研究员主持的973计划"重要病毒跨种间感染与传播致病的分子机制研究"项目实施启动会在北京召开。来自中国科学院微生物研究所、中国农业大学、中国科学院武汉病毒研究所、军事医学科学院军事兽医研究所、军事医学科学院微生物流行病研究所、中国疾病预防控制中心病     

不可思议：动物也有“文化”

美国《科学》杂志日前刊载的两篇论文,用科学证据表明动物文化是存在的——猴子和座头鲸就有。这两项研究成果让学术界颇有点激动。一些科学家认为,“动物有没有文化”的争论从此可以结束了。     

H5N1亚型禽流感毒株A/Duck/HuBei/3/2005的分子特征及致病性研究

采用分子生物学方法,对1株2005年从湖北省某县分离获得的禽流感病毒株(A/Duck/HuBei/3/2005)进行全基因组序列测定.序列分析显示,该分离株为H5N1亚型.HA蛋白在HA1和HA2连接处,含有连续多碱性氨基酸模体(-RRKKR-).根据进化分析结果,分离株A/Duck/HuBei/3/2005的7个基因来源于2004～2005年湖南地区流行株(CK/HN/999/05,DK/HN303/04),但是PA基因片段发生了重排,来源于野禽.动物实验显示DK/HB/3/05对鸡和鸭均具有高致病性;对小鼠有较低致病性.