刺五加愈伤组织的遗传转化

刺五加胚性愈伤组织经根癌农杆菌Ｃ５８Ｃ１感染后，共培养４７－７２ｈ，再转移到含氯霉素５０ｍｇ／Ｌ的ＭＳ选择培养基上继代培养５０－６０ｄ，筛选得到氯霉素抗性愈伤组织。该愈伤组织能在无激素的ＭＳ培养基上增殖，并检测到胭脂碱合成酶活性，表明是转化愈伤组织。     

根癌农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化体系的研究

采用农杆菌介导法,对骏枣愈伤组织遗传转化体系进行研究.结果表明：进行遗传转化的合适条件为：愈伤诱导培养基MS＋6-BA 0.4 mg/L＋2,4-D 1.2 mg/L;浸染之前对愈伤组织进行6d的避光培养可提高愈伤组织在共培养过程中的成活率;愈伤组织在OD600=0.4～0.6的农杆菌菌液中浸染10 min,农杆菌LBA4404的生长情况最好;在28℃黑暗条件下共培养放置16 d对转化最适宜;头孢霉素的抑菌浓度为250 mg/L;卡那霉素的筛选浓度为125 mg/L.经PCR检测,初步证明外源目的基因已整合到骏枣基因组中,初步实现了农杆菌介导的骏枣愈伤组织遗传转化,与以骏枣茎叶外植体建立的遗传转化体系相比,以骏枣愈伤组织为外植体共培养时间长,有利于转化.     

苜蓿愈伤组织诱导及GUS基因瞬时表达

用电击转化法将质粒pBI121(含GUS基因,β-葡萄糖苷酸酶基因）导入苜蓿愈伤组织的小细胞团内,利用组织化学定位实验检测到GUS基因在受体组织中的瞬时表达。     

利用电击法转化玉米胚性愈伤组织获得GUS基因瞬时表达的研究

作者以成单玉米幼胚经诱导、继代、筛选,获得了可分化的胚性愈伤组织,采用电击转化法,将质粒PBI121导入成单玉米的胚性愈伤组织中,通过组织化学染色法,观察到了GUS基因的瞬时表达,并筛选出对愈伤组织损害轻、GUS表达较强的最适电击条件为：960μF,375V/cm,61ms。     

银杏愈伤组织诱导与增殖的效应研究

以银杏（Ｇｉｎｋｇｏ ｂｉｌｏｂａ Ｌ．）雄株幼叶为材料,系统研究了离体条件下不同外源激素种类与浓度、不同光质条件及不同培养基对银杏愈伤组织诱导与增殖的效应。以期为银杏细胞的进一步培养积累资料。     

用于基因转化的几个云南水稻品种的胚性愈伤组织的诱导

建立了几个云南水稻品种的长期胚性愈伤组织培养系。发现在所选用水稻品种中,Ｈ４２的愈伤组织诱导频率和绿苗分化频率为最高,分别达到７７％和８９％。为基因转化准备了受体材料。     

诱导小麦花药愈伤组织耐盐突变体的遗传参数

选用耐盐与丰产、不耐盐两套亲本品种,按不完全双列杂交设计,组配杂交组合,其F_1花药在筛选培养基(加0.3％NaCl)上诱导筛选耐盐突变体,摸清在诱导筛选过程中的主要遗传参数。结果表明:诱导筛选耐盐突变体的频率高低与亲本品种耐盐特性关系密切。就亲本品种耐盐性诱导率性状而言、亲本品种间的一般配合力高低差异明显。耐盐性诱导率的广义遗传力为97.9％,说明F_1的耐盐突变体诱导率的变异,是以遗传变异为主,受环境影响甚微;狭义遗传力为65.87％,表明加性遗传方差(遗传变异的可固定部分)占表现型方差比例中的比重较大。因此,依品种耐盐特性的表现选配杂交亲本,提高耐盐突变体诱导效率是有明显效果的。     

水仙胚性愈伤的获得及农杆菌介导GUS基因的遗传转化

用正交实验设计对前期影响水仙胚性愈伤诱导和分化关联性大的因素进行综合分析,结果显示,培养基类型、激素及处理方式、不同添加物等对水仙外植体胚性愈伤诱导及分化的影响是基于培养基的多因素协同效应。水仙适宜胚性愈伤诱导培养基是:改良MB+NAA(0.2 mg/L)+6BA(2 mg/L)+ABA (2 mg/L)+AgNO3(5 mg/L);适宜的分化培养基是：改良N6+2,4D(0.5 mg/L)+6BA(2.5 mg/L)+NAA(0.2 mg/L)+ABA(2 mg/L)。实验中观察到水仙体细胞胚的发生,在胚性愈伤诱导和分化体系优化基础上实现农杆菌介导GUS基因转化,稳定表达抗性愈伤GUS染色显示最佳胚性愈伤诱导培养基能促进水仙外植体感受态的形成,有利于外源基因的接受,PCR检测表明实验中获得3株转GUS基因阳性植株。     

重楼愈伤组织的抑菌作用研究

目的:探究重楼根茎诱导获得愈伤组织的抑菌作用,为中药资源的有效开发利用提供一条重要途径.方法:以宋内氏痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌为受试菌,头孢噻肟钠为对照药,采用试管稀释法和琼脂平板扩散法对重楼根茎愈伤组织提取物的抑菌作用进行研究,并比较它们的最小抑菌浓度.结果:重楼根茎愈伤组织提取物对宋内氏痢疾杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度分别为15.63 mg/m L、31.25 mg/m L、31.25 mg/m L.结论:重楼根茎愈伤组织提取物具有一定的抑菌作用,为其临床应用提供了实验依据.     

农杆菌介导的八氢番茄红素合酶基因转入人参愈伤组织影响因素

以PSY为目的基因,应用根癌农杆菌介导法对人参愈伤组织进行遗传转化,从菌液浓度、侵染胞龄、侵染时间、共培养时间四方面优化了遗传转化体系。经PCR分析鉴定初步证明,外源基因PSY已整合到人参的基因组中。     

羧苄西林钠对棉花愈伤组织诱导和生长的影响

在一定范围内,羧苄西林钠对棉花愈伤组织的诱导和生长有促进作用,影响效果呈曲线分布,对珂字２０１的愈伤诱导表明,羧苄西林钠对棉花下胚轴的适宜浓度为２５０－１０００ｍｇ／Ｌ,对子叶的适宜浓度为２５０－７５０ｍｇ／Ｌ,对珂字２０１的愈伤组织增殖来说,羧苄西林钠初期抑制了棉花愈伤组织的生长,后期则促进生长,且随着羧苄西林钠浓度的增加,抑制时间也逐渐延长,在５００ｍｇ／Ｌ的羧变西林钠浓度下添加７０ｍｇ／Ｌ的卡那霉素对棉花愈伤组织的诱导和生长有明显的致死作用。     

山丹丹愈伤组织分化培养研究

研究分化培养30 d内适合山丹丹愈伤组织分化成芽的外源激素组合.以继代培养的山丹丹愈伤组织为材料,以6-BA、IBA、TDZ为外源激素,采用正交实验设计.结果表明,在分化培养的第19 d陆续有小叶片从愈伤组织上分化出来,28 d时愈伤组织分化达到最大值,同时有部分愈伤组织开始死亡.外源激素对山丹丹愈伤组织分化的影响依次...     

茶愈伤组织诱导的研究

以茶树苗的叶片和幼茎为外植体诱导愈伤组织,比较了不同激素组合对叶片和幼茎诱导愈伤组织的影响.结果表明,叶片和幼茎均能诱导愈伤组织,但幼茎的愈伤组织诱导率较高,叶片的愈伤组织诱导率较低.叶片、幼茎愈伤组织培养的较适培养基是MS 6-BA(0.4 mg/L) 2,4-D(2 mg/L).     

芹菜愈伤组织转化的初步研究

用根癌农杆菌C58C1（pBZ611）感染芹菜胚性愈伤组织，在筛选到的氯毒素抗性愈伤组织中检测到胭脂碱合成酶活性，表明外源基因基因已整合到芹菜细胞基因组中并得到表达，转化愈伤组织可在无激素培养基上增殖并分化畸形苗。     

甜荞愈伤组织分化研究

研究了龙山荞、浦江荞、美国荞和牡丹荞四种甜荞子叶和下胚轴的愈伤组织形成与分化的影响因子.结果表明：17.8μmol/L～26.6μmol/L（4.0 mg/L～6.0 mg/L）的BA与0.9μmol/L（0.2 mg/L）的2,4-D配合使用可有效促进甜荞愈伤组织中芽的分化和芽的生长;高浓度的蔗糖（4.5%～6.0%）促进甜荞愈伤组织根的分化和愈伤组织的生长;在培养基中附加活性炭抑制甜荞愈伤组织分化根.     

绿豆愈伤组织的诱导及其保持的研究

本文以绿豆无菌苗的下胚轴、子叶为外植体,研究植物激素的使用与绿豆愈伤组织诱导及其保持的试验结果,供从事有关研究者参考。     

东北红豆杉愈伤组织诱导及组织培养研究

东北红豆杉扦插苗幼茎愈伤组织的诱导频率B5－B组（86．7％）＞MS－A组（60．2％）＞MS－B组（37．0％）。MS培养基中2，4－D和NAA同时存在时，愈伤组织诱导效果比不含NAA的要好1．5－2倍。MS培养基是 愈伤组织生长的适宜培养基。经过几代的继代培养，愈伤组织的生长周期由35－40d缩短为15－18d。红豆杉树与扦插苗间、树的不同个体间，甚至同一树不同部位的幼茎在愈伤组织诱导及生长方面都存在较大差异。     

珙桐花药诱导愈伤组织的初步研究

采用濒危植物珙桐花药为外植体,研究了花序外形与小孢子发育时期的关系以及低温预处理、激素种类与浓度、蔗糖浓度等对诱导花药愈伤组织的影响并初步探讨了其诱导分化的可能性.结果表明:低温预处理对愈伤组织的形成影响不显著,随着低温时间的延长,愈伤组织诱导率逐渐降低;高浓度的蔗糖不利于愈伤组织的形成;愈伤继代后褐化严重未产生分化.在本实验中,诱导珙桐花药愈伤组织的最佳条件为:选用长度为1.7～2.2 cm的花序,4℃预处理2d,培养基为MS+2,4-D 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L+GA31 mg/L+5％蔗糖,最高诱导率为91.3％.     

太白米愈伤组织的诱导

把太白米小鳞茎基部０．１－０．５ｍｍ处切口，接种于ＭＳ＋ＮＡＡ １ｍｇ／Ｌ＋２．４－Ｄ１ｍｌ／Ｌ＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ和ＭＳ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＺＴ０．１ｍｇ／Ｌ培养基上，置黑暗中培养，小鳞茎能脱分化产生大量愈伤组织，诱导率在９５％以上，且生长迅速。     

李胚乳愈伤组织的诱导

笔者通过二年的试验研究,在李胚乳愈伤组织的诱导方面对培养基筛选、带胚接种与否以及取样时间等问题进行了探索并得出了初步结论。