水杨酸法测定蔬菜水果中过氧化氢酶活性

建立一种测定蔬菜水果中过氧化氢酶活性的新方法.在过氧化氢中加入过氧化氢酶分解部分过氧化氢,剩余的过氧化氢在酸性条件下与二价铁离子反应,产生的羟自由基与水杨酸反应生成紫色物质,该紫色物质最大吸收波长为510 nm,通过测定该物质含量来计算过氧化氢酶活性.结果表明:最佳反应条件为1m L p H=1的硫酸、4 m L硫酸亚铁溶液(1×10-3mol/L)、1m L过氧化氢溶液(0.003%)、2 m L水杨酸溶液(1×10-2mol/L),在40℃下反应10 min为最佳反应条件.测定的五种蔬菜水果中过氧化氢酶活性:土豆的过氧化氢酶的活性为4.96(μg/min);黄瓜的过氧化氢酶的活性为1.05(μg/min).     

黑曲霉胞外β-葡萄糖苷酶的纯化及酶学性质的研究

利用硫酸铵盐析、Superdex 200凝胶柱层析等步骤,从黑曲霉发酵液中纯化得到两种β–葡萄糖苷酶蛋白,其相对分子质量分别为1.15×105和7.0×104左右,比活力分别为62.1,U/mg(相对分子质量约为1.15×105)和53.0,U/mg(相对分子质量约为7.0×104),纯化倍数分别为1.54和1.31,回收率分别为19.6%,和19.1%,β–葡萄糖苷酶最适水解p H为4.6,最适反应温度为50~55,℃.在p H 4.2~4.8、温度40~60,℃下均能保持稳定.Mn2+、Mg2+和K+对β–葡萄糖苷酶有不同程度的激活作用,而Ca2+、Fe3+、Zn2+、Cu2+和Fe2+会抑制β–葡萄糖苷酶的酶活,Na+和Ba2+对β–葡萄糖苷酶活力影响不明显.以p NPG为底物时,该酶的Km和vmax分别为2.33,mmol/L与3.14,mmol/(L·min).     

产碱杆菌DN25纯化降氰酶稳定剂的选择

向产碱杆菌（Alcaligenes sp.）DN25的纯化降氰酶中分别添加不同浓度的多元醇类、金属离子类、糖类、防腐剂类等添加剂,研究不同种类、不同浓度的添加剂对降氰酶稳定性的影响,优选可以提高降氰酶稳定性的添加剂.结果表明：外加添加剂甘油浓度为1.5％（m/V）时,酶活保留率为5.4％;[NH4]2SO4浓度为4％（m/V）时,酶活保留率为5％;淀粉浓度为6％（m/V）时,酶活保留率为14.3％;甘氨酸浓度为3％（m/V）时,活力酶活保留率为19.6％.甘氨酸对产碱杆菌DN25降氰酶具有最强的保护作用.     

超声波萃取-高效液相色谱-串联质谱快速检测叶菜中残留农药

使用超声强化萃取-液相色谱-串联质谱(LC-MS-MS)方法对叶菜中常用28种农药建立了快速检测方法.5 g样品在40 mL混合液(V乙酸乙酯:V石油醚=2:1)中超声强化萃取35 min,0.22 μm膜过滤后直接进行LC-MS-MS检测.在0.1×10-3～0.2 mg/kg范围内线性良好,线性相关系数r＞0.997 0,精密度为92.8 %～100.3 %,加标水平在3.5×10-3～2.0×10-2 mg/kg时,回收率为83.6%～98.7%,RSD＜4.4%,加标水平在7.6×10-3～4.0×10-2 mg/kg时,回收率为83.8%～99.6%,RSD＜4.7%;定量限为0.1～5.0 μg/kg.本方法快速、简便、灵敏度高,可用于华东地区叶菜中多类多残留的快速检测.     

花生“汕油523”在盐胁迫下应激反应的初步研究

分别模拟盐胁迫的离子胁迫、渗透胁迫处理花生 (Arachishypogaea L.cv.Shanyou52 3) ,研究了离子胁迫、渗透胁迫对花生抗氧化酶的影响 .结果表明 :等渗的 Na Cl、 KCl(50　mmol/ L、 1 0 0　mmol/ L )和聚乙二醇 (PEG　6　0 0 0 ,1 6%、 2 6% )诱导花生叶片超氧化物歧化酶 (SOD)活力显著升高 ;低浓度 (50　mmol/ L) Na Cl胁迫可以诱导花生叶片过氧化物酶 (POD)活力升高 ;花生叶片过氧化氢酶 (CAT)活力在 PEG胁迫处理下呈显著下降趋势 ,而在 Na Cl和 KCl处理下变化不大 ,表明盐胁迫时引起花生叶片 CAT活力的下降的原因可能是渗透胁迫 .     

褐藻酸钙—过氧化物酶为固定相化学发光光导纤维探头测定过氧化氢

本文报道以褐藻酸钙－过氧化物酶为固定相测定过氧化氢化学发光光导纤维探头．在pH10．2，10-3mol/l鲁米诺溶液中，过氧化氢在5×10-7- 1×10-3mol/l之间成线性关系．方法检出限为 3.2× 10-7mol／l H2O2.     

金属离子对青霉葡萄糖氧化酶的效应研究

研究了几种金属离子对青霉(Penicillium amagasakiense)葡萄糖氧化酶(简称GOD,EC.1.1.3.4)活力的影响.金属离子对酶活力的影响表明:Na+、K+、Ca2+、Pb2+、Mn2+等对酶活力基本没有影响;Al3+、Zn2+对酶有一定的激活作用;Ag+、Hg2+、Mg2+、Cd2+、Cu2+、Co2+等对该酶活力有不同程度的抑制作用.其中Ag+、Cu2+、Hg2+对酶的抑制作用较强,随着抑制剂浓度增大,酶活力呈指数下降,导致酶活力下降50%的抑制浓度为0.08、10.0 和31.25 μmol/L.进一步研究了Ag+的抑制动力学,结果显示:Ag+对酶的抑制作用为竞争性可逆抑制,抑制常数(KI)为0.065 μmol/L.该研究对青霉葡萄糖氧化酶的应用具有一定的参考价值.     

过氧化氢改善柴油机燃烧研究

提出采用过氧化氢组液参与柴油机的燃烧,对柴油机燃烧过程进行改善,同时降低油耗与排放的新方法.对过氧化氢的化学及物理特性进行了分析,建立了过氧化氢组液影响内燃机燃烧过程的机理模型,并且通过放热规律进行了试验验证.135单缸机的试验结果表明,过氧化氢组液的效果相当显著,可以同时降低油耗以及碳烟和NOx的排放.在过氧化氢雾化风量为2.5×10-4m3.s-1时,油耗从原机的347.19g.kW-1.h-1降到314.26g.kW-1.h-1;烟度从原机的3.0Rb降到2.4Rb;排气中NOx含量从原机的663×10-6降到639×10-6;排气中O2含量从原机的9.92%增至10.96%.     

改性离子交换树脂固定化漆酶及其动力学性质研究

环氧基改性的丙烯酸系树脂含环氧基,环氧基可在温和条件下与蛋白质上的亲核基团氨基反应而实现其固定化.研究了环氧基改性的离子交换树脂固定化漆酶的最优条件和固定化漆酶的酶学性质,结果表明,固定化漆酶时,在硫酸铵浓度为1.5mol·L-1、加酶量0.2U·g-1、pH 6.5、温度35℃条件下固定3h,测得固定化酶活性最好,比活力为0.026U·g-1,活力回收率为3.67%;该固定化酶催化反应的的最适温度为45℃,最适pH 4.5,米氏常数(Km)为1.233×10-3 mmol·L-1.锰离子、铁离子和钙离子在4×10-3~4×10-4 mol·L-1浓度之间时对固定化漆酶活性有抑制作用,在4×10-5~4×10-6 mol·L-1浓度之间时有激活作用.     

马血凝血酶原纯化方法的比较研究

文章利用等电点法提取马凝血酶原并经过超滤膜和大孔阴离子交换树脂纯化,比较两种纯化方法的效果。方法:等电点法提取马凝血酶原液后,用最终浓度为0.1mol/L的Ca Cl2于30℃水浴中激活2.5h测酶活力。超滤膜纯化参数:30k Da再生纤维素膜,料液5℃,流速35.67m/s,浓缩2倍激活后测凝血酶活力。大孔树脂纯化法参数:上样流速0.5m L/min,以1%-100%的洗脱剂梯度洗脱,最佳比例为60%Na Cl,激活后测酶活力。结果:粗酶活力为119U/m L;超滤后为249U/m L;大孔树脂纯化后酶活力为301U/m L。结果表明大孔树脂的纯化效果优于超滤膜的纯化效果。