AiiA融合蛋白包涵体变性和复性的研究

通过IPTG诱导含有pGEXaiiA-B15质粒的工程菌使其大量表达AiiA融合蛋白.由于所表达的融合蛋白多为不可溶的包涵体,须经分离、变性溶解,再经过一个合适的复性过程才能实现变性蛋白的正确折叠,得到具有生物活性的蛋白.通过含N-十二烷基肌氨酸钠的缓冲液A溶液及尿素等变性剂使包涵体溶解,磷酸盐缓冲液透析复性.SDS-PAGE电泳表明包涵体已由不可溶转化成可溶的蛋白.抑菌试验证明复性后的AiiA蛋白对胡萝卜欧文氏软腐病菌引起的马铃薯软腐病有较明显的抑制作用.     

Pyrococcus sp.DNA聚合酶内蛋白子突变体的剪切性质

将含麦芽糖结合蛋白－嗜热菌ＤＮＡ聚合酶内蛋白子基因的ｐＭＩ８４、ｐＭＩ９４、ｐＭＩ９５三个重组突变体质粒转入Ｅ．ｃｏｌｉ２４２６经发酵及ＩＰＴＧ低温诱导表达,直链淀粉糖亲和纯化获得ＭＩ８４（ｓｅｒ１／Ｓｅｒ５３８Ｓｔｏｐ）、ＭＩ９４（Ｓｅｒ１→ＣｙｓＨ１／Ｓｅｒ５３８Ｓｔｏｐ）、ＭＩ９５（Ｓｅｒ１→Ａｌａ１／Ｓｅｒ５３８Ｓｔｏｐ）三种蛋白质前体。研究了ＰＨ温度、巯基试剂对内蛋白子Ｎ末端的剪切影响。     

蜂毒肽前体蛋白cDNA的克隆及序列分析

从蜜蜂（Ａｐｉｓｍｅｌｌｉｆｅｒａ）毒腺中提取总ＲＮＡ,通过ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增得到了蜂毒肽前体蛋白的ｃＤＮＡ。扩增产物克隆到ｐＴ７Ｂｌｕ－Ｔ载体,再进一步将插入片段酶切连接到ＰＵＣ１１８载体上,构建了与β－半乳糖苷酶部分序列相融合的蜂毒肽前体蛋白表达体并转化大肠杆菌ＪＭ１０９。     

血栓前体蛋白临床应用的研究进展

血栓前体蛋白(TpP)是血栓中不溶性纤维蛋白的直接前体,对TpP指标的监测可以为临床早期发现血栓形成,实施临床早期抗凝治疗提供重要的理论依据。TpP不仅在急性心肌梗死、急性脑梗死、弥漫性血管内凝血等常见血栓形成性疾病的诊断上显示出其特异性强、灵敏度高、半衰期长的优点,在其他一些相关疾病领域,也开始得到重视。随着TpP在临床诊断领域意义的逐步显现,将会有更多相关的研究开展起来,为血栓性疾病的诊断提供更为科学的依据。     

颗粒蛋白前体缺失型腹膜巨噬细胞的体外炎症应答

探讨颗粒蛋白前体缺失型巨噬细胞的体外炎症反应。选取野生型C57BL/6雄性小鼠6-8周(WT)和PGRN基因敲除雄性小鼠6-8周(KO)为实验动物。向小鼠腹腔内注射1m L6%的淀粉,脱颈法处死小鼠后提取腹膜细胞。用瑞士染色后油镜下观察细胞,用流式细胞仪进行细胞检测,显微镜下观察腹膜巨噬细胞吞噬功能,ELISA法检测腹膜巨噬细胞培养上清中TNF-a和IL-12因子。WT小鼠和PGRN基因敲除KO小鼠腹膜细胞的数目、形态和种类及巨细胞表面标志物和巨噬细胞吞噬功能均无显著性差异(p0.05)。PGRN基因敲除KO小鼠来源腹膜巨噬细胞培养上清中前炎性因子TNF-a和IL-12的含量较WT小鼠明显增高。PGRN对腹膜细胞的数目、形态、种类和巨噬细胞表面标志物没有显著影响,但会使巨噬细胞炎症反应增强。     

前体和诱导子对紫杉醇合成影响的优化研究

用响应面方法对红豆杉细胞培养生产紫杉醇的几种前体及诱导子进行了优化，首先，用部分因素实验对苯丙氨酸，脱落酸，硝酸银，苯甲酸钠，醋酸钠，壳聚糖，甘氨酸对紫杉醇含量的影响进行评价，并找出其中主要影响因子壳聚糖，硝酸银和脱落酸；其次，用最速上升法逼近最大响应区，最后用中心组合设计和响应面分析确定主要影响因子的最适浓度，经优化后的紫杉醇体积质量达到60．5mg/L，较优化前提高1倍，利用以上结果进行5L反应器放大培养，紫杉醇体积质量达54．6mg/L。     

水貂朊蛋白前体基因的原核表达

 构建了水貂朊蛋白前体基因的表达载体,所筛选出的阳性克隆质粒经转化表达菌BL21(DE3)后,收获表达菌,纯化鉴定表明获得了目的产物.     

基因表达调控子类似物前体的合成

邻苯二甲酸酐与甘氨酸或β-丙氨酸在冰醋酸中缩合、减压除去醋酸后的产物经SOCl2酰氯化后除去氯化亚砜,所得产物在氧化镁存在的碱性条件下,以水-二氧六环为溶剂与氨基酸低温反应得到一系列化合物,它们作为基因表达调控子类似物前体。产物结构经^1HNMR,ESI-MS表征。     

颗粒蛋白前体小干扰RNA提高小鼠皮肤创面修复的质量

为探讨颗粒蛋白前体(progranulin, PGRN)小干扰RNA对提高小鼠切创损伤创面愈合质量的作用,通过选取33只健康雄性BALB/c小鼠,制做小鼠背部皮肤孔状切除模型,按照处理因素不同随机分为3组：健康小鼠对照组(Control组)、溶剂+皮肤孔状切除组(Vehicle组)和Si-m-PGRN+皮肤孔状切除组(Si-m-PGRN组)。分别于造模后0、4、8、12和16天背部皮下注射30 ul的生理盐水或Si-m-PGRN。各组小鼠分别于4、8、12、16和20天麻醉处死取材,采用大体观察、常规组织学检查和免疫组织化学染色等方法研究了创面愈合情况。结果表明： Si-m-PGRN组与Vehicle组相比,创面面积缩小明显,愈合率较快,新生表皮的细胞层数较多,表皮较厚,分层明显。可见PGRN小干扰RNA在一定程度上可以显著提高创面愈合的质量,这些初步结果为皮肤损伤由解剖修复到功能修复的完美愈合提供了新的治疗思路。     

前体物质和化学诱导子对云南红豆杉细胞生长和产生紫杉醇的影响

研究了几种前体物质和化学诱导子对云南红豆杉细胞生长产生紫杉醇的影响,结果表明,在培养第１２ｄ培养其中添加１ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１或２ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１苯丙氨酸、５ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１丙酮酸钠和１ｇ．Ｌ＾－１牛儿醇可显提高细胞中紫杉醇的含量,同对照相比,紫杉醇产量分别增加了４０．０％、９５．７％和１２１．３％;使用高盐渗透胁迫剂（３００ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１）高糖渗透胁迫剂（２５ｇ．Ｌ＾－１蔗糖和２５ｇ．Ｌ＾－１甘露醇）、桂皮酸（３ｍｍｏｌ．Ｌ＾－１）和硫酸钒酰（１０ｍｇ．Ｌ＾－１）可显促进细胞中紫杉醇的合成,同时对照相比,紫杉醇产量分别增加了２３．０％、８８．０％、４２．８％和１０３．０％。     

聚乙烯基吡咯烷酮的加入对制备聚丙烯腈原纤维的影响

研究了聚乙烯基吡咯烷酮(K30)的二甲基亚砜(DMSO)溶液的质量分数、聚乙烯基吡咯烷酮与聚丙烯腈(PAN)的质量比对浆料的纺丝性能以及浆料的流变性能的影响,同时对加入K30后的聚丙烯腈原纤维的力学性能和热性能进行了研究.结果表明,聚乙烯基吡咯烷酮与聚丙烯腈具有较好的相容性,当K30的质量分数为5%和m(PAN)∶m(K30)=7∶3时最适合纺丝,且原纤维具有较好的形貌和力学性质.     

预制层结构对CZTS薄膜微观组织和光学性能的影响

研究了叠层顺序对磁控溅射沉积铜锌锡硫（CZTS）吸收层的微观结构、表面形貌和光学性能的影响.试验结果表明：当预制层结构为Cu/ZnS/SnS₂时,制备的CZTS薄膜在（112）晶面具有择优生长取向,并具有较好的结晶一致性,在288,335和368 cm^-1处呈现出特征拉曼（Raman）峰,薄膜表面晶粒较大、形状规则、薄膜空隙较少、比较致密,可见光范围内的吸收系数较高,光学带隙1.5 eV,适合作为CZTS薄膜太阳能电池的吸收层;当预制层结构为SnS₂/Cu/ZnS和ZnS/SnS₂/Cu时,由于在预制层硫化过程中造成一定的Zn和Sn流失,使CZTS薄膜中含有CuS杂相,导致薄膜表面质量下降,禁带宽度增加,不适合做CZTS薄膜太阳能电池的吸收层.     

基于TCP粘合技术的协议分析模块研究

业务选择网关(SSG)中的协议分析模块要求在用户与服务器建立连接之前即可将用户请求数据包解析成URL,并且根据用户权限进行访问控制,路由选择等。文中在对SSG的协议分析模块的需求进行分析之后,讨论了已有的TCP粘合技术,并提出了一种改进方案和讨论了序列号空间的影射问题。最后将该方案运用在应用层协议分析模块上,实践证明此方案可行、高效。     

前驱体溶液浓度对LaNiO3薄膜结构及导电性能的影响

采用溶胶-凝胶(sol-gel)法,使用浓度分别为0.1 M、0.2 M和0.3 M的前驱体溶液,在单晶Si(100)衬底上制备了LaNiO3(LNO)导电薄膜,研究了前驱体溶液浓度对LNO薄膜结构和导电性能的影响.X射线衍射测试表明,三种样品均为纯的钙钛矿相,具有较好的(110)择优取向.扫描电子显微镜截面分析显示,用0.2 M前驱体溶液制备的LNO薄膜样品厚度均匀,与Si衬底间没有明显扩散.采用标准四探针法测试了三种样品的电阻率,当前驱体溶液浓度为0.2 M时,样品电阻率最小,仅为2.08×10-3Ω.cm,具有良好的导电性.     

一种光纤固定接头接续损耗特性的研究

根据OTDR实验测试曲线和光场局域模式耦合理论，对自行研制的毛细管固定连接器的接续性能进行了分析研究，研究表明，毛细管壁与光纤包层间的缝隙必须控制在一定的范围内，才能保证较低的接续损耗。     

关于地图图像的半自动拼接技术研究＊

研究了将由扫描仪分块扫描输入的地图图像拼接成整幅地图的问题，给出了半自动拼接地图图像的方法和步骤，这些方法经在ＩＢＭ４８６微机上实践表明，拼接后的地图分割存储便于进行图像信息管理，并且可实现全图平移     

间断基因的剪接

介绍了间断基因的剪接实例、剪接方法和影响剪接的因素。     

基于小区域融合的实时视频拼接技术

针对视频拼接实时性的需求, 提出一种利用小区域融合和查表映射实现实时视频拼接的方法. 该方法首先利用颜色校正算法对待拼接摄像头视频进行颜色校正; 然后在初始化阶段估算出图像变换参数和小区域融合权值, 并以索引表的方式保存; 最后在视频拼接阶段利用查表法对视频进行实时拼接. 实验结果表明, 该方法在较好消除残影和拼接缝隙的同时, 能将每帧的平均拼接时间降低至约0.03 s, 并在拼接速度和拼接效果上都较好.