植酸酶固体发酵高产菌的筛选

经大量菌种初筛和复筛，得到一株在固体发酵产植酸酶较高力株Ｇ２，酶活达２．６千单位Ｇ２菌株特别适合于固体发酵，并对植酸酶固体发酵酶活测定方法进行了探讨。     

植酸酶高活性菌株的选育及酶性质的初步研究

以本实验室筛选的一株米曲霉为出发菌株，通过紫外线诱变，并经过初筛、复筛等步骤而得到一株植酸酶高产菌株，酶活约提高１５６％，最高酶活达２４０Ｕ／ｍｌ粗酶液，７２ｈ左右达到产酶高峰期．植酸酶的最适温度为５６℃，最适ｐＨ为５．５；Ｆｅ２＋、Ｚｎ２＋、Ａｌ３＋对其酶活有强烈的抑制作用，而Ｍｇ２＋和ＥＤＴＡ在浓度为１ｍｍｏｌ／Ｌ时有激活作用     

产碱性纤维素酶浅黄金色单胞菌Chrysemonas luteola的诱变选育

以筛选到的一株产碱性纤维素酶浅黄金色单胞菌为出发菌株，经紫外线、紫外线和甲基磺酸乙酯(EMS)复合诱变等处理后，筛选到一株产CMC酶活较高的变株．经5代诱变后，变株产CMC酶活从原来的(发酵液)156．61U／mL提高到325．45U／mL，同时，结果表明变株FQ2产酶特性已趋于稳定．     

高活力苯丙氨酸解氨酶菌株的筛选

本以４０株含苯丙氨酸解氨酶的酵母为出发菌株，用Ｌ－苯丙氨酸和肉桂酸为底物对苯丙氨酸解氨酶活进行双向测量筛选，得到了一株高活力苯丙氨酸解氨酶菌株１００１－２０－６Ｒ。在１％肉桂酸，７．４ｍｏｌ／Ｌ氨，ｐＨ１０．０，３０℃条件下反应４小时，肉桂酸转化率达５８．３％，其酶活为４９２ｕ／ｇ细胞干重。     

核酸P1酶产生菌选育及其生理生态学研究

采用改良的菌选育方法选育到一株高活性磷酸二酯酶产生菌。通过生理生态双向选择方法，确定了适合于该菌株产酶的优化条件．在营养因子筛选中发现一种廉价的产酶促进因子，添加该物质可使酶活提高２～４倍。在最佳工艺条件下，摇瓶酶活可达５００ｕ／ｍｌ，对该菌株进行了３０Ｌ发酵罐发酵试验，酶活达６４０ｕ／ｍｌ。     

枯草杆菌BF7658高产菌株HIB22的选育

我们以枯草杆菌(Bacillus subtilis)BF—7658为出发菌株,通过自然分离,从1200株菌株中获得一株高产菌株HIB22,摇瓶酶活为440u/ml,经6次传代后仍保持原有性状。用7500立升和10000立升发酵罐进行21批扩大试验,平均酶活355u/ml,其中8批稳产试验平均酶活397u/ml。单罐最高酶活520u/ml。     

高温α-淀粉酶产生菌株的选育

从西藏当雄温泉附近的土壤中，分离到一株能在55℃生长并分泌高温α－淀粉酶的菌株，经初步鉴定为凝结芽孢杆菌，命名为Bacillus coagulans LS-1。该菌株用紫外线和亚硝基胍诱变，在55℃摇瓶培养条件下，筛选到一个发酵液酶活达到100U／mL的突变株，较出发菌株的酶活提高了约25倍，发酵液经90℃处理60min，酶活性保持在90％以上。     

胞外植酸酶高产酵母菌的选育

从酒糟样品中筛选得到五株胞外植酸酶活性较高的酵母，选择酶活最高的１－１作为出发菌株，经单倍体分离、原生质体制备、紫外诱变，最后得到一株突变株Ｍｓｐ－２１２８，其胞外植酸酶活力为２３．０８Ｕ／ｍＬ，比出发菌株提高了８２％，且产酶稳定     

胞外植酸酶产酵母菌的选育

从酒糟样品中筛选得到五株胞外植酸酶活性较高的酵母，选择酶活最高的１－１作为出发菌株，经单倍体分离，原生质体制备，紫外诱变，最后得到一株突变株Ｍｓｐ－２１２８，其胞外植酸酶活力为２３．０８Ｕ／ｍｌ，比出发菌株提高了８２％，且产酶稳定。     

复合诱变及发酵优化选育染料木素转化菌株的研究

本研究通过对两株β-葡萄糖苷酶高产菌株黄丝曲霉JS-Q和黑曲霉XK-L进行复合诱变,诱变混合菌株直接进行产酶培养,利用"复杂系统定向调控技术",以酶活为指标对培养条件进行连续的定向调控,在产酶培养条件优化过程中富集正突变株并逐步提高酶活,在挑选出正突变株的同时优化出适合高酶活正突变株的培养条件.最终从优化产酶培养基中挑选到菌株F17和F27,产酶能力比出发前菌株XK-L提高了64.9%和49.4%.用这两株菌分别发酵槐角苷,经测定其转化率分别为76%和78%,比出发菌株XK-L提高31.0%和34.5%.     

一株产纤维素酶的暹罗芽孢杆菌筛选及产酶条件优化

以一株来自海鱼肠道的暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)为出发菌株,进行紫外线诱变,诱变后通过平板初筛和摇瓶复筛,获得了五株纤维素酶高产菌株,其中菌株UV-30酶活最高,为0.082 1 U/g,较出发菌株(酶活为0.052 4 U/g)提高了56.68%.通过采用单因素和正交试验对该菌株产酶条件进行优化,结果表明最优发酵条件为:羧甲基纤维素钠1.25%,蛋白胨6%,产酶温度30℃,起始pH值8.0,装液量30%,接种量2.5%.以此条件发酵,酶活可达到0.168 6 U/g,为出发菌株的3.22倍,酶活显著提高,为该酶的进一步分离纯化及性质研究奠定了基础.     

大麻脱胶高酶活菌株的诱变选育

原始菌株Bacillus sp.No.46经紫外诱变后,挑取76株进行摇瓶初,复筛,复得10株诱变株,果胶酶酶活高于原菌株20％－30％,聚半乳糖醛酸酸酶活提高35％－70%,连续液大麻脱胶试验残胶率低于10％,脱胶后大麻纤维特数可达19－11,脱胶后酶活酶活损失约20％,脱胶酶液至少可用2次以上。     

Aspergillus oryzae 3.951白孢突变株的选育及其特性的研究

为改进酱油风味,作者于1984年选择了Aspergillus oryzae 3.951为出发菌株,经亚硝基胍、紫外线复合诱变处理,选育出白孢突变株,再经谷氨酰胺酶酶活筛选,获得Asp.白孢1号突变株。此菌株形态、生理特性与出发菌株相近,菌丝生长快,粗壮,浓厚,孢子白色,产孢较迟较少。蛋白酶、糖化酶酶活与出发菌株相近。谷氨酰胺酶酶活比出发菌株高34—50％,制曲后,未检出黄曲霉毒素B_1。     

纤维素酶产生菌——根霉的分离选育与鉴定

6月在兰州榆中县兴隆山次生林区采集潮湿的腐质土壤、枯枝落叶、腐烂的植物种子、果实和朽木等样,用羧甲基纤维素钠培养基初筛,根据水解圈与菌落直径之比大小和水解圈清晰度分离筛选出较多的产纤维素酶菌株,其中有真菌、放线菌和细菌等.进一步通过测纤维素酶活力复筛,最终筛选出滤纸酶活力FPA和羧甲基纤维素酶活力同时都较高的菌株10株。经形态学鉴定10株均为霉菌,其中酶活最高的菌株分别是58-3A,42-2A和50-2B,它们的粗酶液崩解滤纸效果快速明显.58-3A的FPA酶活是497.78 U,CMC酶活是1376.2 U.10株之中菌株50-2B和菌株50-2C的菌落形态与其他菌株区别较大,经形态学鉴定菌株50-2B和50-2C都是根霉属.菌株50-2B的FPA酶活是218.88 U,CMC酶活是1571.4 U,菌株50-2C的FPA酶活是273.78U,CMC酶活是1084.62U.     

5′－腺苷酸脱氨酶产生菌选育及发酵生态学研究

从多株青酶及曲酶中筛选到一株新的腺苷酸脱氨酶产生菌，经紫外线及５′－氟尿嘧啶复合诱变处理，使菌株的产酶活性有了很大提高，通过发酵生态学研究确定了产酶的最佳条件，在营养生理研究中发现一种廉价的产酶促进因子，添加该物质可使酶活提高１４．６倍。在所确定的最佳培养条件下平均酶活可达１３ｏｏｕ／ｍｌ。     

产植酸酶菌株的筛选、诱变及酶学性质初探

从富含有机质的环境中采集土样,通过植酸钙平板透明圈法初筛和维生素C-硫酸-钼酸铵-酒石酸锑钾法测定植酸酶酶活复筛,共筛选到5株产植酸酶的霉菌,对这5株菌株进行紫外线和亚硝基胍复合诱变处理,最终获得一株高产植酸酶突变株NTG-506,酶活达到112 U/mL,比原始出发菌株的酶活提高了3.2倍.突变株NTG-506在250mL三角瓶中发酵培养,在装液量60 mL,接种量2%时,培养4 d后酶活达到最高,为124.5 U/mL.植酸酶的最适反应温度35℃,经50℃处理10 min后剩余酶活为原来的57%.     

产α-ALDC的枯草芽孢杆菌原生质体融合条件

通过双亲灭活原生质体融合技术对2株产α-乙酰乳酸脱羧酶的枯草芽孢杆菌3226-5和V-20进行原生质体融合.初步探讨了2菌株较适宜的融()条件.对获得的几百株融合子进行酶活比较,从中得到20株酶活比双亲高的菌株.     

亚油酸异构酶高产菌株的选育及产酶条件的优化

共轭亚油酸是一种具有多种生理活性的天然脂肪酸.以嗜酸乳杆菌为出发菌株,经紫外诱变选育,获得1株共轭亚油酸高产菌株并对其发酵条件进行优化.紫外照射选择30 s为适宜的照射处理时间,诱变菌株酶活比原始菌株提高了1.51倍.对培养基的产酶条件进行优化,结果酶活是未优化前的1.1倍.     

生物法转化丙烯腈制取丙烯酰胺的研究：（Ⅰ）菌种的分离,诱变及鉴定

从石油化工厂污水中，分离到一株腈水合酶活力较高的菌株Ｓ１１５。对Ｓ１１５进行紫外诱变后，从１００只变异株中得一株酶活提高幅度较大的菌ＡＳ１１５，其腈水合酶活力可达７９７００ｕ／ｍＬ，对丙烯腈的转化率达９３．５４％，Ｓ１１５经鉴定为微球菌Ｍｉｏｃｒｏｃｏｃｃｕｓｓｐ。     

灰绿曲霉高产纤维素酶突变株的选育

以一株具有较高纤维素酶活性的野生菌株-灰绿曲霉XC9为出发菌株，经过紫外线、氯化锂、甲基磺酸乙酯（EMS）等物理化学诱变剂多重诱变处理，获得了抗葡萄糖阻遏的突变株E2-26、E5-65、U6-31和EU7-22，其CMC酶活与出发菌株相比分别提高至1．7、1．4、1．3、2．0倍．突变株经PDA斜面接种传代5次后产酶性能仍然保持稳定．变株的菌丝、孢子颜色也发生了较大的改变．对突变株EU7-22的形态结构进行了观察，并与出发菌株XC9作了发酵性状的比较，发现其产酶性能有了明显提高．