文蛤抗癌活性多肽的生理活性研究

以新鲜文蛤为材料,经有机溶剂萃取,分子筛凝胶层析,得到一种具有抗癌生物活性的文蛤多肽,SDS PAGE电泳测得该多肽的分子量约为18kD.用该多肽处理人胃腺癌细胞BGC 823,结果表明,当多肽浓度为10μg/mL,细胞生长的抑制率达到50%.此外,探讨了该活性多肽在体外对几种与肿瘤代谢相关的酶的效应,实验结果显示,该活性多肽能够激活碱性磷酸酶和超氧化物歧化酶,当其浓度为10μg/mL时,可以使这两种酶活力分别提高150%和93%;该活性多肽对酪氨酸酶则是起到了抑制的效应,测定导致酶活力下降50%所需的效应物浓度(IC50)为1.50μg/mL,其抑制类型为混合型抑制,其抑制常数KI和KIS分别为4.37mg/mL和6.09mg/mL.     

文蛤多肽粉对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用及免疫调节作用

将文蛤肉以复合胰蛋白酶酶解,经喷雾干燥工艺得到了文蛤多肽粉,研究文蛤多肽粉对肝癌细胞的抑制作用和对昆明种小鼠的急性毒理作用和免疫调节作用,结果显示文蛤多肽粉对体外培养的肝癌细胞SMMC-7721具有明显的杀伤作用,使细胞变形以至破裂从而抑制癌细胞的生长,抗肿瘤作用明显;文蛤多肽粉给药组的胸腺指数和脾脏指数较空白对照组明显升高,提示文蛤多肽粉能促进小鼠胸腺和脾脏的生长发育,增强免疫力.     

暹罗鳄多肽粉的营养成分分析

以暹罗鳄(Crocodylus siamensis)肉为原料,采用胰蛋白酶酶解,通过喷雾干燥工艺得到暹罗鳄多肽粉.分析该多肽粉对实验小鼠无不良反应,表明暹罗鳄多肽粉是无毒的.暹罗鳄多肽粉的成分分析结果显示,其蛋白质质量分数达74.3%,总糖和脂肪质量分数分别仅为1.24%和1.89%,氨基酸种类齐全,其人体需要量最大的赖氨酸和亮氨酸含量较多.同时其对人体有益元素含量从高到低依次为K、Na、Ca、Mg、Fe、Zn、Cu.应用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱法(MALDI-TOF-MS)分析了暹罗鳄多肽粉分子质量的分布范围,结果显示,暹罗鳄多肽粉分子质量主要集中在1 000~1 300 u.这些结果显示暹罗鳄多肽粉是一种高蛋白、低糖、低脂的功能性保健食品,具有很高的开发潜力.     

文蛤多肽对体外培养人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用

研究了文蛤多肽对体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用,结果表明,经5.0μg/mL文蛤多肽处理的体外培养的人肝癌细胞(SMMC-7721)生长缓慢,倍增时间延长,细胞生长抑制率达89.4%;处理后的癌细胞形态发生明显改变,处于G0/G1期的细胞明显增多,而S期和M期细胞减少,出现明显的凋亡峰,凋亡率为22.3%.实验结果表明,文蛤多肽能有效地抑制体外培养肝癌细胞的增殖活动,可通过改变肝癌细胞的形态及细胞周期而明显抑制细胞的增殖.     

文蛤多肽对体外培养宫颈癌Hela细胞的抑制作用

采用蒸馏水抽提,有机溶剂沉淀大分子蛋白,Sephadex G-25分子筛柱层析等技术从文蛤肉分离纯化,得到一种低分子量的蛋白多肽,命名为Mer2.实验结果表明,Mer2对宫颈癌Hela细胞有明显的抑制效应,Mer2对宫颈癌Hela细胞生长的抑制作用呈量效与时效关系.经40 μg/mL Mer2处理,体外培养宫颈癌Hela细胞生长缓慢,细胞形态发生明显改变,细胞生长抑制率达78.1%,并出现明显的凋亡峰,凋亡率为25.5%.     

文蛤蛋白水解制备抗氧化活性肽的研究

以文蛤蛋白为原料,通过蛋白酶水解制备抗氧化活性肽.利用体外清除DPPH活性评价酶解产物的抗氧化活性,采用超滤、葡聚糖凝胶柱层析和HPLC对相应的活性肽进行分离纯化,通过HPLC-MS进行结构鉴定.结果表明:木瓜蛋白酶水解产物的DPPH清除活性明显高于碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和复合蛋白酶,产物质量浓度为1 mg·mL-1时,DPPH清除率为55.74%;以DPPH清除率为筛选指标,对木瓜蛋白酶酶解产物进行逐级分离,得到4个具有抗氧化活性的目的肽段,氨基酸序列分别为LNFNLEKSR(1120.3 u)、SWLRPR(814.4 u)、RIGNIISQY(1063.3 u)和LNFNLEK(877.2 u).     

鲨鱼皮胶原蛋白肽成分分析

应用植物蛋白酶和动物蛋白酶来处理酶解鲨鱼皮，通过现代生物化学方法分离制备鲨鱼胶原蛋白肽，并对其组成成分进行分析，测定了它们的粗蛋白、粗脂肪、灰分、氨基酸及Cu、Zn、Fe、Ca、Na、K、Pb等金属元素的含量．应用MALDI-TOF分析两种胶原蛋白肽分子量的分布范围．结果表明，植物蛋白酶酶解方法研制的胶原蛋白肽分子量分布范围在2～3ku区间，而用动物蛋白酶酶解方法研制的胶原蛋白肽分子量分布范围在2～7ku区间．     

鲨鱼皮胶原蛋白肽成分分析

应用植物蛋白酶和动物蛋白酶来处理酶解鲨鱼皮,通过现代生物化学方法分离制备鲨鱼胶原蛋白肽,并对其组成成分进行分析,测定了它们的粗蛋白、粗脂肪、灰分、氨基酸及Cu、Zn、Fe、Ca 、Na、K、Pb等金属元素的含量.应用MALDI-TOF分析两种胶原蛋白肽分子量的分布范围.结果表明,植物蛋白酶酶解方法研制的胶原蛋白肽分子量分布范围在2～3 ku区间,而用动物蛋白酶酶解方法研制的胶原蛋白肽分子量分布范围在2～7 ku区间.     

大豆多肽产品的主要成分分析

对一种大豆多肽产品的水的质量分数、氨基酸的主要种类及其质量分数、多肽分子量分布等进行了分析,结果表明：该样品水的质量分数为6．84％,多肽的质量分数为76．33％,人体所需的8种必需氨基酸的总质量分数为24．94％,多肽中以分子量小于1000Da的为主,游离氨基酸的质量分数约为26．33％,表明大豆多肽具有较高的营养价值．与文献报道的结果相比,该产品的大豆蛋白水解度过高．     

酶解牛肉多肽粉的营养评价

牛肉经酶解后喷雾干燥,得到酶解牛肉多肽粉,对其进行营养成分分析结果显示:其蛋白质含量87.5%,总脂肪含4.54%,氨基酸种类齐全,构成比例符合WHO/FAO标准,其人体需要量最大的赖氨酸和亮氨酸含量高,对人体有益元素含量由高到低分别为Mg、Ca、Zn、Fe、Cu.富含维生素E、B1、B2.酶解牛肉多肽粉是一种高蛋白、低脂肪的功能性保健品,具有很高的开发潜力.     

从文蛤分离丝状真菌

分离海洋微生物是开发海洋药物的重要内容.对共附生在双壳贝文蛤的真菌,采用平板直接分离和液体富集后涂布分离两种方法,以及6种不同的分离培养基,分离到23株丝状真菌,其中9株丝状真菌在淡水及海水培养基中均能生长、繁殖.对分离菌(W16)的生长特性研究结果表明,盐浓度、pH值,以及海水和淡水的不同环境,对其生长和代谢有明显的影响.     

文蛤幼体的摄食生态研究

通过文蛤幼体对几种单胞藻的摄食及饥饿实验，研究了几种单胞藻的饵料效果及适宜投饵密度，幼体营养贮存饱和点（ＰＲＳ）和幼体发育变态不可恢复点（ＰＮＲ）．等边金藻和扁藻为文蛤幼体的适宜饵料，混合投喂效果更佳．饵料的适宜密度为：扁藻０．５～１万／ｍＬ，等鞭金藻２．５～５万／ｍＬ，混合投喂（金藻＋扁藻）（１．２５＋０．５）万／ｍＬ．老化金藻藻液对幼体的生长发育有限制作用．文蛤幼体的ＰＮＲ和ＰＲＳ５０各为５ｄ左右     

我国四海区不同群体文蛤形态差异与判别分析

运用多变量形态度量学分析方法,采用9个形态性状对我国4海区7个野生文蛤群体间的形态变异进行了研究.聚类分析和主成分分析结果表明,山东潍坊群体和山东日照群体形态最为接近,广东湛江群体的趋异程度最大.主成分分析构建了3个主成分,其贡献率:主成分1为31.50%,主成分2为20.27%,主成分3为13.35%,累积贡献率为65.12%.判别分析结果表明,7群体间形态差异显著(P＜0.01).建立了7群体文蛤的判别函数,其判别准确率P1为50.00%～96.67%,P2为60.00%～96.43%,综合判别率为77.14%.     

文蛤(Meretrix meretrix)地理种群ISSR分子标记的初步研究

利用ISSR(InterSimpleSequenceRepeate)技术对文蛤(Meretrixmeretrix)江苏和辽宁两个地理种群进行了PCR扩增.从100条ISSR引物中筛选出引物13条,每条引物检测出位点数1到8.平均每条引物可检测到位点数4 6个.实验结果表明:江苏文蛤的位点多态性(80 7%)高于辽宁文蛤的位点多态性(68 4%);种群内平均遗传距离分别为0 3105±0 090和0 2658±0 044,江苏文蛤也高于辽宁文蛤.从筛选得到的引物可以发现,文蛤简单重复序列中A、G碱基含量较高.通过对不同实验条件的对比,对ISSR PCR反应体系进行了优化.     

南通沿海文蛤暴发性疾病的组织病理学研究

采用常规石腊切片法、以正常样品作对照,对2003年5月南通沿海发生暴发性疾病的文蛤不同组织进行了组织病理学观察。结果表明,患病文蛤各组织都发生了不同程度的病理变化,主要表现为:外套膜、鳃、消化管、足等上皮细胞肿胀、变性、破裂或脱落,结缔组织增生、变性或溶解,血淋巴细胞增多,肌纤维结构松散、断裂,组织中嗜碱性细胞增多;鳃组织发生坏死崩解;消化盲囊腺泡广泛受损,导管上皮及结缔组织发生溶解。文蛤的这些组织发生了严重病变,使其功能遭到破坏,是导致文蛤发病死亡的病理学基础。     

文蛤抽提液对锯缘青蟹小触角弹动频率的影响

用行为学方法研究了不同浓度的文蛤抽提液对锯缘青蟹小触角弹动频率变化的影响.结果发现,小触角静息弹动频率为82～85次·min-1,而文蛤抽提液原液可使弹动频率提高到123次·min-1左右(应答性弹动频率).另外,文蛤抽提液的对数浓度变动(从原液稀释至10-10倍)与小触角应答性弹动增量之间存在线性关系,且小触角检测阈值低于10-10倍的稀释液.