Preparation of a gene-engineering mutant of bacteriorhodopsin BR-D96V and corresponding poly(vinyl alcohol)-based functional composite films

Bacteriorhodopsin (BR) exhibits, as a membrane protein in Halobacterium salinarum, unique photoresponsive behaviors, and shows promise as a functional information material. A new mutant of BR with the 96th aspartic acid replaced by valine (BR-D96V) was obtained and then a composite film of BR-D96V in a synthetic polymer matrix was prepared in this research. The mutant BR-D96V was expressed in a bacterio-opsin deficient halobacterial strain (L33) by gene engineering. Although valine is very hydrophobic, this point mutant keeps the basic biological activities, namely, photoelectric and photochromic responses. Nevertheless, the lifetime of M intermediate in the BR mutant is nearly two orders of magnitude longer than that of wild-type BR in neutral aqueous solution, which benefits its potential application as an information material. The M lifetime is further significantly prolonged after embedding BR-D96V into poly(vinyl alcohol) (PVA). It was also found that BR-D96V is very sensitive to water content in comparison with wild-type BR and another BR mutant.     

人胰岛素原类似物（B-Arg-Arg-A）基因的构建和表达

用聚合酶链反应（PCR）法将C肽为6个氨基酸残基的胰岛素原类似物基因删除突变成C肽仅为2个精氨酸残基的胰岛素原类似物（BArg-Arg-A）基因,即把pUC18BC'A改建为pUC18BR₂A。再将pUC18BR₂A与pJG105重组为表达质粒pJG107,使B-Arg-Arg-A与pJG105编码的一种多肽构成融合蛋白在大肠杆菌体系中表达。融合蛋白占细菌蛋白总量的58%。表达产物具有人胰岛素放射免疫活性。     

基于偶次幂因子分解的RSA快速算法

提出了一种基于偶次幂因子分解的RSA快速实现算法的设想,这种算法是针对传统BR算法的缺点实现的,在计算高次幂幂剩余和乘同余时结合采用数据库、偶次幂指数分解的方法进行,通过将指数幂凑成满足2的整数幂来降低汉时重量,减少循环步骤,同时利用偶次幂的对称性提高运算速度．理论分析与实验结果表明该算法与BR算法相比,缩小了近33％的循环步骤,乘法步数平均减少25％,求模的步数平均减少37．4％．     

内蒙古盐碱湖一株编码细菌视紫红质的嗜盐古菌bop基因全序列克隆及表达

细菌视紫红质(Bacteriorhodopsin,BR)是由bop基因编码的唯一膜蛋白,具有光推动质子泵的作用,为生命活动提供所需要的能量。为了研究高表达且具有生物活性的BR蛋白,应用PCR扩增技术,从内蒙古额吉淖尔盐碱湖分离得到的一株嗜盐古菌中扩增得到bop基因全序列;并构建了具有His6标签的原核表达载体p ET28a-IM-1,转化到大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达BR;并对表达产物进行SDS-PAGE鉴定分析。结果显示获得的bop基因全序列开放阅读框为672 bp,编码223个氨基酸,含有重组质粒p ET28a-IM-1的阳性菌株在IPTG诱导下高效表达了分子量约为25 k Da的BR蛋白。同源性分析表明该BR蛋白结构在古菌与细菌中具有相对较高的保守性,这与其质子泵功能密切相关。该BR蛋白为新发现的细菌视紫红质,其基因序列已递交Gen Bank,其登录号为KT873301。     

沉淀法白炭黑的制备及其填充SSBR/BR的研究

以水玻璃为原料,采用柠檬酸和硫酸,在沉淀反应前和陈化阶段前添加乙醇制备白炭黑并应用于绿色轮胎橡胶中。通过透射电子显微镜（TEM）、比表面积分析法（BET）和动态光散射（DLS）等手段对白炭黑样品进行表征,结果显示：白炭黑的DBP吸油值为2.1 mL/g,BET比表面积达239 m²/g,平均孔径为34.7 nm;白炭黑初始颗粒直径分布范围较窄,在10~19 nm之间呈正态分布,平均粒径15 nm,初级聚集体峰值150 nm左右,没有出现更大的聚集体尺寸。与商业化白炭黑Zeosil^®1165MP对比,制备的白炭黑填充SSBR/BR复合材料（silica-SSBR/BR）的正硫化时间t₉₀明显缩短,硫化速率变快;silica-SSBR/BR的拉伸强度和增强比均高于Zeosil^®1165MP-SSBR/BR;silica-SSBR/BR抗湿滑性能更优异,滚动阻力更低;silica-SSBR/BR和Zeosil^®1165MP-SSBR/BR的压缩生热相差不大。     

表油菜素内酯对稀脉浮萍6746生长的生理效应及作用机理探讨

10~(-3)ppm的表油菜素内酯(epiBR)强烈地促进稀脉浮萍的生长,并对蛋白质和叶绿素的合成有促进作用。epiBR分别同IAA、ABA、CTK和GA_3混合作用,ABA、CTK和GA_3有屏蔽epiBR促进稀脉浮萍生长的作用;epiBR与IAA对稀脉浮萍的生长有协同作用。在epiBR与IAA混合作用期间,稀脉浮萍内源IAA的含量增加,表明epiBR促进了稀脉浮萍的合成或吸收。     

关于BR0-代数弱完备性的证明

目的对BR0-代数自身的完备性问题进行研究。方法研究了王国俊教授建立的模糊命题演算的形式演绎系统L*和与之在语义上相匹配的R0-代数,并结合吴洪博教授所定义的BR0-代数,从伴随的角度切入。结果在BR0-代数中定义了BR0-等式和BR0-方程,通过全序BR0-代数证明了BR0-代数自身的弱完备性。结论得到了BR0-代数的完备性定理,为相应形式逻辑系统与模糊推理的研究提供了理论框架。     

油菜素内酯促进绿豆下胚轴不定根发生研究

用10-2mol/L油菜素内酯浸泡绿豆种子,其幼苗下胚轴插条培养2d后,不定根长度、根数和生根范围均增加,分别比对照增加12.5%,27.4%和37.6%,插条基部细胞的吲哚丙酮酸脱羧酶、吲哚乙醛氧化酶和色氨酸转氨酶的比活性分别比对照提高120.6%,82.1%和54.7%,吲哚乙酸含量增加22.3%,插条基部细胞进入细胞周期S期的数目增加23%。结果表明,BR可能通过增加IAA含量,促进DNA合成和细胞分裂,从而促进不定根的发生。     

靶向沉默人HER2/neu基因的RNA干扰

针对人HER2/neu基因的mRNA序列, 设计并构建shRNA干扰载体, 经聚合酶链式反应(PCR)及测序鉴定后转染SK-BR-3细胞, 并检测HER2/neu mRNA和蛋白抑制情况及SK-BR-3细胞迁移能力的变化. 实验结果表明： 构建了3个HER2/neu shRNA真核表达质粒; 3个重组质粒均可不同程度下调HER2/neu mRNA和蛋白表达水平, 并抑制SK BR 3细胞的迁移; 其中1号重组质粒效应最强, 对mRNA和蛋白的抑制率分别为84.65%和7498%.