刺孢吸水链霉菌与淡紫灰链霉菌原生质体制备条件研究

通过对甘氨酸浓度、酶解温度、酶浓度、酶解时间等影响因素考察,及正交试验优化,确定了刺孢吸水链霉菌和淡紫灰链霉菌原生质体制备的最佳条件.实验结果表明,刺孢吸水链霉菌最佳原生质体制备条件是：甘氨酸浓度为0.5%,酶解温度28 ℃,溶菌酶浓度为3×10-3 g/mL,酶作用时间60 min;淡紫灰链霉菌：甘氨酸浓度为1.0%,酶解温度32 ℃,溶菌酶浓度4×10-3 g/mL,酶作用时间60min.有效的原生质体保存条件是：-20 ℃,在5 d内,原生质体再生率在15%以上.     

林肯链霉菌林肯变种谷氨酰胺合成酶的研究

林肯链霉菌林肯变种是林可霉素的产生菌,研究中发现其菌丝体中谷氨酰胺合成酶的比活力与林可霉素的生物合成存在正相关性。在此基础上,报道了ＧＳ的分离纯化,分子特征,酶学性质和活力调节特性,采用硫酸铵分级沉淀,ＤＥ－５２离子交换层析,Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ６Ｂ凝胶过滤等方法,从林肯链霉菌林肯变种中分离纯化了ＧＳ,用聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一组分。     

神农架林区和自然保护区链霉菌属中的一个新种

从神农架林区和自然保护区土壤样品中分离到菌株Ｉ６４３，对其形态特征，培养特征，生理生化特性进行了研究，经与已知的种比较，定为新种，命名为疣孢链霉菌。     

弗氏链霉菌变种S-221产弹性蛋白酶发酵培养基的优化研究

通过对弗氏链霉菌（Streptomyces fiadiae）变种S-221产弹性蛋白酶发酵培养基的优化,以提高该菌株所产的弹性蛋白酶酶活。试验采用单因素与正交试验对发酵培养基的成分进行优化研究。优化后发酵培养基的成分为：果糖6％,干酪素1.5％,碳酸铵0.3％,K2HPO4·3H2O 0.05％。MnSO4·H2O 0.001％。在此条件下该菌所产弹性蛋白酶酶活达到96.63U／mL,优化后的发酵培养基与优化前相比所产弹性蛋白酶酶活提高了30％。     

一株林肯链霉菌变种生理特性的研究

林肯链霉菌突变株ZL-1在斜面生长时问为4 d,母瓶培养时间为48 h,摇瓶发酵时间为5 d,摇瓶效价为2 867 μg/m L.与出发菌种SL98-2-8的3 024μg/mL相比,虽然其摇瓶效价降低了5.2%,但其斜面生长缩短了2 d.母瓶培养缩短了6h,摇瓶缩短了2d,总发酵周期缩短了4d,而且传代10代后性能稳定.     

樱桃链格孢菌叶斑病拮抗链霉菌的筛选与鉴定

为筛选用于樱桃链格孢菌叶斑病的生防菌,采用稀释涂布法从患病樱桃树根际土壤中分离生防菌,使用室内平板对峙培养法和生长速率测定法,获得拮抗能力强的放线菌菌株,并依据形态学特征、生理生化特性和16S r DNA序列等进行鉴定。结果表明:筛选到4株对樱桃叶斑病具有较强拮抗作用的放线菌,其菌体和无菌滤液抑菌率分别达64%和73%以上。其中3-22菌株菌体的抑菌率达76.39%,无菌滤液抑菌率达84.44%,离体条件下24 h和48 h的抑菌率分别为79.75%和75.54%,与250 g/L嘧菌酯悬浮剂的抑菌率没有显著差异。通过形态学特征和分子生物学鉴定可知,3-22菌株为链霉菌属(Streptomyces sp.)。由此可见,3-22菌株作为樱桃叶斑病的生物防治材料具有较大的开发和应用潜力。     

马鞍菌属的一个新变种

本文报道了产于我国的马鞍菌属Helvella一新变种——弹性马鞍菌大孢变种H.elastica Bull.:Fr.var.macrospora Du et Cao var.nov,其与原变种的主要区别在于具有大型的孢子(24.6-27(-28.4)×15-17μm)。     

白孢链霉菌(Streptomyces albosporeus)CT—86几丁质酶研究

应用磷酸膨胀几丁质双层平板,从土壤中篩选到48株分解几丁质的链霉菌。经紫外线诱变后,得到一株能强烈分解磷酸膨胀几丁质的突变株CT—86。在1～1.5％的磷酸膨胀几丁质、1％豆饼粉的营养盐培养基中,30℃培养8～10天,酶活达到0.4mg N—乙酰葡萄胺/h。在几丁质浓废为0.5～1％范围内,单位酶活随几丁质浓度的增加而提高。以葡萄糖和N—乙酰葡萄糖胺为碳源时,在上述培养条件下,无酶活捡出。磷酸膨胀几丁质为底物,酶作用的最适温度是48℃,最适pH为6.5;酶液在60℃保温2小时后,酶活力丧失70％左右。     

褐黄孢链霉菌生产纳他霉素工艺条件研究

目前,国内纳他霉素产量低,为提高其产量,实现其工业化生产,主要对褐黄孢链霉菌ATCC 13326发酵生产纳他霉素的培养条件及前体添加策略进行研究.得出最佳培养条件为:培养温度28℃,种龄40～44 h,接种量10%,装液量10%,初始pH 7.3,发酵24 h时加入O.6%的前体丙酸钠.在此条件下摇瓶分批发酵生产纳他霉素的产量可达到6.87g/L,比未添加前体的纳他霉素产量(3.72 g/L)提高了84.7%.利用10 L发酵罐进行纳他霉素的发酵研究,在最优培养条件下,发酵罐中的纳他霉素产量可达到8.34 g/L,比摇瓶分批发酵生产纳他霉素产量(6.87 g/L)提高了21.4%.     

糖单孢菌属的一个新变种

作者从福建省福州市土壤中分离出一株能产生活性物质的稀有放线菌,编号3—50并进行了形态、培养特征和生理特性等方面研究。3—50气生菌丝上着生半个孢子,常形成穗状生长体。基内菌丝生长好,有时可见到横隔,产生单孢子。细胞壁含有内消旋二氨基庚二酸(meso—DAP)、半乳糖和阿拉伯糖,属细胞壁TV型,故属于糖单孢菌属。其形态、培养特征和生理特性与绿色糖单孢菌相似,但又有差别,是一个新变种,定名为绿色糖单孢菌福建变种(Saccharomonospora viridis var.Fujianensis Ruan).     

3个链霉菌新种的多相分类

在筛选产生活性物质的过程中，发现4株具有抑菌、杀虫等生物活性的链霉菌．利用形态学、生理生化、化学及分子生物学程序进行了分类鉴定，并与链霉菌属已知相关菌种进行了比较，将YIM32065^T和YIM33176定名为多形链霉菌新种(Streptomyces polyformus sp．nov．)，YIM35551^T定名为抗霉链霉菌新种(Streptomyces antifungus sp．nov．)，YIM30823^T定名为灰白链霉菌新种(Streptomyces griseoalbus sp．nov．)．     

黑暗链霉菌与卡那链霉菌原生质体融合研究

进行了黑暗链霉菌与卡那链霉菌原生质体融合实验 .结果表明 ,将孢子悬浮液接种于种子培养基 ,然后转移到含 0 .5 %Gly的菌丝体培养基收获的菌丝体对形成原生质体最有利 .分别采用 10mg mL、6 0min及 5mg mL、75min的溶菌酶浓度与酶解时间制备黑暗链霉菌与卡那链霉菌原生质体能达到较高的形成率和再生率 .采用单亲灭活卡那链霉菌原生质体的种间融合法 ,得到与亲株形态明显不同的杂合体菌落 ,并筛选到44株妥布霉素产率提高的菌株 ,幅度最高达到 39% .     

激光对金霉素链霉菌孢子的诱变效应

研究了 He- Ne激光对金霉素 (S.aureofaciens,简称 Sa)孢子的诱变效应 ,结果表明 :小剂量He- Ne激光对 Sa孢子的萌发具有促进作用 ,大剂量 He- Ne激光的照射对 Sa的孢子具有致死作用 ;激光诱变 Sa孢子的正变率最高达到 6.6%。并且 ,通过酯酶及过氧化物酶同工酶谱技术对诱变株进行了初步分析     

链霉菌属一新种的多相分类

 从云南西双版纳分离到的1株中温放线菌N-98-1272(以下简称1272).对其形态,生理生化特性,细胞壁化学组分以及16SrDNA序列进行了研究分析,并与链霉菌属的已知种进行了比较,认为这是链霉菌属的1个新种,命名为版纳链霉菌(Streptomyces bananensis sp.nov.).     

链霉菌种间原生质体融合的研究

金霉素链霉菌和龟裂链霉菌分别在含０．７５％，甘氨酸１．５０％的液体培养基中培养，对数生长中后期的菌丝体易于制备原生质体，当聚乙二醇（ＰＥＧ６０００）浓度为４０％，在５０℃下保温５ｍｉｎ，有效地诱导了两种原生质体的融合。用表型标记和间接选择的方法检出融合子，种间融合率为３．０５％。融合重组体与亲本在菌落形态，孢子形态，抗生素产量和抗噬菌体特性有显著的差异，不同重组体之间也表现了这些差异．     

农用拮抗链霉菌9311的分离与鉴定

从我国山东省寿光市蔬菜土壤中分离到一株吸水链霉菌，编号为９３１１，经鉴定，该变吸水链霉菌属中的一个新菌株，室人和田间试验结果表明，该菌株产生的抗生素－－青草霉素对蔬菜灰霉病，早疫病表现出较为理想的拮抗作用，具有潜在的开发应用价值。     

链霉菌中3个新脂肪酰胺类化合物

特殊生境放线菌具有较大的开发前景,因其独特的生存环境可以产生新颖且具有生物活性的次生代谢产物.研究Streptomyces plumbidurans发酵液的次生代谢成分,并寻找具有抗肿瘤及抗菌活性的小分子化合物.利用凝胶Sephadex LH-20柱色谱、D101大孔树脂柱色谱、硅胶柱色谱等分离技术,并采用现代波谱学方法鉴定化合物的结构.采用噻唑蓝比色法测试化合物1～3抗肿瘤细胞毒活性;采用微量稀释法检测体外抑菌活性.从Streptomyces plumbidurans发酵液中确定3个新脂肪酰胺类化合物,并依次命名为：kcacylamide A(1)、kcacylamide B(2)和kcacylamide C(3),生物活性结果显示3个化合物在50μmol/L均无明显抗肿瘤细胞毒活性及抑菌活性.研究首次发现Streptomyces plumbidurans会产生脂肪酰胺类化学物质.     

产色链霉菌SY20-2与龟裂链霉菌SY20-4的种间原生质体融合

利用卡那霉素(250μg/mL)、链霉素(1 000μg/mL)和罗红霉素(150μg/mL)标记亲本菌株SY20-2、SY20-4,进行种间原生质体融合.试验结果表明,培养基中加入0.5%~1%甘氨酸可以提高菌丝体对溶菌酶的敏感度,有利于原生质体的释放.溶菌酶不仅影响原生质体的形成,而且影响原生质体的再生率,因此在35℃水浴条件下,SY20-2选择酶浓度2 mg/mL,作用时间30 min;SY20-4选择酶浓度4 mg/mL,作用时间40 min,最适于原生质体的再生.以45%PEG(分子量1 000)作助融剂,融合频率为0.124%,选出153个融合子,其中3株重组子的稳定性及抑菌活性较好,重组子C对烟草野火病菌的抑菌活性比对照要好.     

链霉菌种间融合及融合产物的分析

采用灭活龟裂链霉菌原生质体与金霉素链霉菌原生质体在聚乙二醇诱导下进行原生质体种间融合,利用金霉素链霉菌对链霉素的敏感性,建立选择培养基,提高了融合子的检出率。并采用同工酶谱分析及抗生素效价测定,对融合子进行了初步鉴定