金色链霉菌原生质体的制备

对金色链霉菌原生质体制备的具体条件进行了优化研究 .发酵培养基中采用蔗糖浓度 12 %、甘氨酸浓度 0 .5 %、酶解条件采用菌龄为 48h的菌丝、溶菌酶浓度 6mg/mL、酶解时间为 1h制备原生质体 ,原生质体制备率可高达 6 0 %以上 .     

金色链霉菌培养条件优化研究

金色链霉菌摇瓶培养适宜的接种量为3．2％、接种时间为25h、温度在28℃左右。4g／L的硫酸铵和0．043g／L无机磷有利于产物金霉素(CTC)合成。酵母膏的加入对CTC的合成有一定促进作用,以3g／L的效果较好。在50L发酵罐中,较低浓度的无机磷对CTC发酵有利;酵母膏的加入量以4．2g／L最佳,产物效价比酵母膏加入量为2．8g／L和5．6g／L时高3．1％和9．79／5,优化发酵过程的CTC产率提高了18％。     

黑暗链霉菌与卡那链霉菌原生质体融合研究

进行了黑暗链霉菌与卡那链霉菌原生质体融合实验 .结果表明 ,将孢子悬浮液接种于种子培养基 ,然后转移到含 0 .5 %Gly的菌丝体培养基收获的菌丝体对形成原生质体最有利 .分别采用 10mg mL、6 0min及 5mg mL、75min的溶菌酶浓度与酶解时间制备黑暗链霉菌与卡那链霉菌原生质体能达到较高的形成率和再生率 .采用单亲灭活卡那链霉菌原生质体的种间融合法 ,得到与亲株形态明显不同的杂合体菌落 ,并筛选到44株妥布霉素产率提高的菌株 ,幅度最高达到 39% .     

链霉菌TD-1代谢产物对饲料中污染霉菌的 抑制作用及稳定性

采用对峙培养法,检测分离于土壤中的链霉菌TD-1代谢产物对饲料中污染霉菌构巢曲霉(Aspergillus nidulans)、纯绿青霉(Penicillium verrucosum)、赭曲霉(Aspergillus ochraceus)、黄曲霉(Aspergillus flavus)、黑曲霉(Aspergillus niger)、米曲霉(Aspergillus oryzae)、茄腐镰刀菌(Fusarium solani)、桔青霉(Penicillum citrinum)、串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme)的抑菌活性,结果表明:TD-1菌株代谢产物对以上霉菌具有较强的抑制作用,抑菌带宽度为10 mm左右.通过TD-1菌株的代谢过程曲线发现,该菌株发酵至第6 d抑菌率达90%左右.稳定性试验结果显示:该菌株所产生的活性物质具有较好的耐热性、耐酸碱性、抗紫外辐射能力.     

刺孢吸水链霉菌与淡紫灰链霉菌原生质体制备条件研究

通过对甘氨酸浓度、酶解温度、酶浓度、酶解时间等影响因素考察,及正交试验优化,确定了刺孢吸水链霉菌和淡紫灰链霉菌原生质体制备的最佳条件.实验结果表明,刺孢吸水链霉菌最佳原生质体制备条件是：甘氨酸浓度为0.5%,酶解温度28 ℃,溶菌酶浓度为3×10-3 g/mL,酶作用时间60 min;淡紫灰链霉菌：甘氨酸浓度为1.0%,酶解温度32 ℃,溶菌酶浓度4×10-3 g/mL,酶作用时间60min.有效的原生质体保存条件是：-20 ℃,在5 d内,原生质体再生率在15%以上.     

链霉菌种间原生质体融合的研究

金霉素链霉菌和龟裂链霉菌分别在含０．７５％，甘氨酸１．５０％的液体培养基中培养，对数生长中后期的菌丝体易于制备原生质体，当聚乙二醇（ＰＥＧ６０００）浓度为４０％，在５０℃下保温５ｍｉｎ，有效地诱导了两种原生质体的融合。用表型标记和间接选择的方法检出融合子，种间融合率为３．０５％。融合重组体与亲本在菌落形态，孢子形态，抗生素产量和抗噬菌体特性有显著的差异，不同重组体之间也表现了这些差异．     

海洋链霉菌生物活性物质的研究

海洋微生物的种类繁多、数量巨大、代谢产物结构奇特、复杂多样、很多具有很好活性的特点吸引着人们的目光.由于海洋环境的特殊性和微生物在生态系统的功能,海洋微生物已发展出独特的代谢方式,也提供了在陆地微生物中未遇到过的新代谢产物.链霉菌是一类革兰氏阳性细菌,具有很强的再生、防御和识别能力,海洋环境下的进化过程造就其独特的代谢方式,其结构类型及生物活性等方面都呈现出与陆生链霉菌多样性.按化合物结构类型介绍了近年来在海洋中分离得到的链霉菌及其生物活性物质的研究概况.     

产色链霉菌SY20-2与龟裂链霉菌SY20-4的种间原生质体融合

利用卡那霉素(250μg/mL)、链霉素(1 000μg/mL)和罗红霉素(150μg/mL)标记亲本菌株SY20-2、SY20-4,进行种间原生质体融合.试验结果表明,培养基中加入0.5%~1%甘氨酸可以提高菌丝体对溶菌酶的敏感度,有利于原生质体的释放.溶菌酶不仅影响原生质体的形成,而且影响原生质体的再生率,因此在35℃水浴条件下,SY20-2选择酶浓度2 mg/mL,作用时间30 min;SY20-4选择酶浓度4 mg/mL,作用时间40 min,最适于原生质体的再生.以45%PEG(分子量1 000)作助融剂,融合频率为0.124%,选出153个融合子,其中3株重组子的稳定性及抑菌活性较好,重组子C对烟草野火病菌的抑菌活性比对照要好.     

激光对金霉素链霉菌孢子的诱变效应

研究了 He- Ne激光对金霉素 (S.aureofaciens,简称 Sa)孢子的诱变效应 ,结果表明 :小剂量He- Ne激光对 Sa孢子的萌发具有促进作用 ,大剂量 He- Ne激光的照射对 Sa的孢子具有致死作用 ;激光诱变 Sa孢子的正变率最高达到 6.6%。并且 ,通过酯酶及过氧化物酶同工酶谱技术对诱变株进行了初步分析     

一株林肯链霉菌变种生理特性的研究

林肯链霉菌突变株ZL-1在斜面生长时问为4 d,母瓶培养时间为48 h,摇瓶发酵时间为5 d,摇瓶效价为2 867 μg/m L.与出发菌种SL98-2-8的3 024μg/mL相比,虽然其摇瓶效价降低了5.2%,但其斜面生长缩短了2 d.母瓶培养缩短了6h,摇瓶缩短了2d,总发酵周期缩短了4d,而且传代10代后性能稳定.     

链霉菌基因组提取方法的比较与改进

将链霉菌菌株Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ．纯化后,测得其葡萄糖异构酶的比活力为０．４１４ｕ／ｍＬ,使用苯酚氯仿法提取提的基因组ＤＮＡ浓度较低,ＲＮＡ和蛋白较多,但用大量法时仍可得到大量的ＤＮＡ,使用试剂盒法得到的基因组ＤＮＡ浓度较大,但仍有大量ＲＮＡ存在,由亚精胺法得到的基因组ＤＮＡ浓度较好,ＲＮＡ很少,自行设计的改进法得到的基因组ＤＮＡ,量特别大,纯度很高,ＤＮＡ大小集中在３０ｋｂ左右,ＲＮＡ很少,非竽相应的基因工程操作。     

一株链霉菌菌株选育及其抑菌活性物质研究

对链霉菌YH-2进行紫外、微波与硫酸二乙酯诱变,筛选出一株高产突变菌株YH-UV-2,并对其发酵条件进行了优化,结果表明菌株YH-UV-2最适发酵条件为:2%葡萄糖,1%酵母膏,0.05%K2HPO4.3H2O,0.05%NaCl,0.05%MgSO4.7H2O,0.001%FeSO4.7H2O,32℃,pH 7.6,接种量8%,菌株YH-UV-2的抑菌活性较原始菌株提高了30.41%。对菌株YH-UV-2所产抑菌物质的研究结果表明,该抗生素为多酚类化合物,热稳定性良好,pH≤8时稳定;经氯仿-甲醇提取得红褐色粗提物;MIC为68.3μg/mL。     

碳、氮源对猪苓菌丝生长与胞外多糖含量的影响

研究10余种氮、碳源对液体培养过程中猪苓菌丝生长及胞外多糖含量的影响。结果表明,酵母浸膏是既适合猪苓菌丝生长又利于其胞外多糖积累的良好氮源。牛肉膏、蛋白胨、水解酪蛋白次之。氮源浓度实验表明,较低浓度氮利于菌丝体生长,而较高浓度的氮利于胞外多糖的分泌。在所试各种碳源中,以葡萄糖最佳,其浓度为1％－5％之间,对于菌丝生长及胞外多糖的产生均适宜。     

雷电电磁脉冲场对多芯线的耦合效应研究

为研究多芯线短线缆在雷电电磁脉冲场辐照下终端负载的感应电压,利用WU-800型MARX源和有界波模拟器来模拟雷电电磁脉冲场,对多芯线进行辐照耦合试验。试验中通过改变试验条件,得到了不同雷电电磁脉冲波形、多芯线长度、辐射场与线缆夹角、线缆终端负载条件下多芯线终端负载的感应电压的变化规律。试验发现:雷电电磁脉冲的上升沿对线缆耦合电压幅值影响较大,脉宽对耦合电压影响较小;线缆长度对感应电压的幅值及响应频点有重要影响;电场极化方向对线缆终端响应幅值有较大影响,但并不改变响应波形;随着受测端负载阻值的增加,线缆感应电压也逐步增大,非受测端负载对线缆感应电压无影响。     

蜜环菌胞外多糖的分离纯化及其性质研究

从蜜环菌发酵液提取粗多糖,经分离纯化得到多糖-A和多糖-B两个组分,快速纯化系统(FPLC)和电泳法鉴定各自为均一的组分。FPLC法测定A组分的分子量分别为2.0×105,苯酚-硫酸法测得其总糖含量为86.6%,考马斯亮蓝法测其蛋白含量为12.92%,硫酸-咔唑法测其酸性多糖含量为28%,红外光谱呈现多糖吸收特征峰,含有吡喃糖苷键。β-消去反应初步证明所提取的多糖-A存在O-糖肽键。     

胞外聚合物对生物脱氮效果的影响研究

考察了PAC-MF系统启动阶段在不同水力停留时间(HRT)下的生物除氮的效果;同时,以硝化速率法表征硝化活性,研究了胞外聚合物(EPS)对硝化菌活性的影响.结果表明,HRT较短的1#系统启动完成所需的时间、NO2-—N积累持续的时间均大于2#系统,NH4+—N的去除效果远远差于2#系统;EPS对硝化活性的抑制作用存在一个临界质量浓度,由硝化速率法得到的临界质量浓度为10 mg/L.     

短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)X93胞外产物对病原弧菌抑制效果的研究

采用平板扩散法对从健康大黄鱼肠道中分离筛选到的对病原弧菌有抑制作用的短小芽孢杆菌(Bacillus pumi-lus)X93胞外产物(Extracellular products,ECP)作用的环境影响因子进行了研究。结果显示,菌株X93胞外产物的抑菌活性强弱随着培养时间的不同而不同,胞外产物对pH条件有一定的耐受性,对热敏感,不耐高温,过高的NaCl能使其抑菌活性降低,蛋白酶K和不同浓度的FeCl3均对其抑菌活性产生影响,其胞外产物发挥最大抑菌作用的最适培养时间、温度、pH、盐度分别为48 h、28℃、pH 7和0.5%。     

海洋微藻裂壶藻发酵液胞外多糖的制备及活性研究

使用乙醇沉淀法从海洋微藻裂壶藻Schizochytrium sp.TIO1101的发酵液中提取胞外多糖,再经732阳离子交换树脂分离得到酸性多糖、弱碱性多糖和碱性多糖三种主要的多糖组分,并分别测定其还原力活性、DPPH自由基清除活性和羟基自由基清除活性等抗氧化活性和抗菌活性.结果表明,弱碱性多糖具有最高的抗氧化活性.抑...     

Effects of extracellular calmodulin on pollen germination and tube growth

The effects of calmoddin (CaM) antagonist W7-agarose, anti-CaM serum and exogenous purified CaM on pollen germination and tube growth ofForsythia suspensu were studied. The pollen germination and tube growth were inhibited or completely stopped by CaM antagonist W7-agarose. The addition of exogenous purified CaM stimulated pollen germination and tube growth, whereas the same amount of bovine serum albumin (BSA) had no effect. The inhibitory effects caused by W7-agarose and anti-CaM serum could be reversed completely by the addition of exogenous purified CaM. The tube growth of germinated pollen was also inhibited or completely stopped by W7-agarose. The results suggest that endogenous extracellular CaM initiates pollen germination and tube growth, whereas exogenous CaM enhances the above processes.