重组肠激酶催化亚基在毕氏酵母中的高密度发酵、纯化及活性鉴定

应用RT-PCR和搭桥PCR技术,扩增肠激酶催化亚基的cDNA,测序正确后克隆至酵母分泌型表达质粒p9K中.将重组质粒p9K/EKLC转化至表达宿主pichia pastoris GS115,筛选得到高效表达重组牛肠激酶催化亚基工程菌.经甲醇诱导,目标蛋白肠激酶催化亚基(EKLC)表达并分泌至酵母培养基中.高密度发酵后,经超滤浓缩,采用SP Sepharose F.F一步纯化得到纯度达98%以上的重组目的蛋白,活性达到2.3 U/uL.上述结果表明,本实验成功获得了肠激酶催化亚基,它是一种能将融合蛋白中目标蛋白与载体蛋白裂解释放的有效工具酶.     

酵母SOD高产菌的选育及发酵条件

从数株酵母菌中选出了一株细胞生物量(Biomass)和超氧化物歧化酶(SOD)含量都较高的菌株,研究了该菌株产SOD较适宜的培养基组成、pH值和时间等发酵条件。     

酵母菌的分离及鉴定

从新疆吐鲁番所采的土样中分离出的３株编号为Ｓｙ９５－００１、Ｓｙ９４－００２、Ｓｙ９４－００３的酵母菌株，通过形态和生理生化试验，初步鉴定为：克洛克酵母属（Ｋｌｏｅｃｋｅａｓｐ．）、假丝酵母属（Ｃａｎｄｉｄａ）的热带假丝酵母（Ｔｒｏｐｉｃａｅｉｓ）、类酵母属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｏｄｅｓ）的中国类酵母（ｓｉｎｅｎｓｉｓ）     

四川麸醋曲药中酵母菌的分离鉴定及发酵特性

通过平皿生化反应从四川麸醋曲药中分离出产酯能力较强的酵母菌,利用18S rDNA同源序列分析对其进行鉴定,研究其最适生长pH值、酒精耐受性、碳源和氮源同化能力,并利用顶空固相微萃取-气质联用技术对其代谢产物进行研究。结果表明:产酯透明圈实验分离出的产酯能力较强的酵母菌为异常威克汉姆酵母菌亚种(Wicherhamomyces sp. Lzcq 2014)。该株酵母菌的最适合生长pH值为5.0~5.5,在酒精度为10%的情况下几乎不生长;对不同碳源同化能力强弱顺序依次是葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、淀粉;对不同氮源同化能力强弱顺序依次是酵母膏、蛋白胨、硫酸铵、尿素。该酵母菌代谢产物主要成分为乙酸乙酯,其质量浓度为0.64079mg/L,且乙酸乙酯浓度远高于其他代谢产物。其他代谢产物分别为甲酸异戊酯、丙酸苯乙酯、苯乙醇,质量浓度分别为0.04136、0.03943、0.02300mg/L。     

耐高渗酵母的选育及其在北冰红葡萄酒中的应用

耐高渗酵母菌在浓醪发酵中起着重要的作用.从不同产地的酒曲中筛选耐高渗酵母,选育出具有良好发酵性能的冰酒专用酿酒酵母.结果表明,分离得到的3 株酵母菌,编号为J-1,J-2,J-3,均有较好的糖、乙醇、酸和SO2耐受性,能在高糖、高酸的北冰红葡萄汁中发酵良好,对后续冰酒的研究提供参考.     

耐高渗酵母的选育及其在北冰红葡萄酒中的应用

耐高渗酵母菌在浓醪发酵中起着重要的作用。从不同产地的酒曲中筛选耐高渗酵母,选育出具有良好发酵性能的冰酒专用酿酒酵母。结果表明,分离得到的3株酵母菌,编号为J-1,J-2,J-3,均有较好的糖、乙醇、酸和SO_2耐受性,能在高糖、高酸的北冰红葡萄汁中发酵良好,对后续冰酒的研究提供参考。     

自吸式反应器的数值模拟及在酵母发酵中的应用

采用计算流体力学(CFD)模拟和酵母发酵实验相结合的方法,研究自吸式反应器内的气液两相流动及传质。基于对自吸式反应器内流体流动、气液相际传质的研究,采用加置气体分布器的方法强化自吸式反应器内流体力学传递性能,并将数值模拟结果应用于酵母发酵。结果表明:在相同的培养条件下,加装气体分布器的自吸式反应器培养酵母比无气体分布器的自吸式反应器产率平均提高23.64%。     

土壤中产油酵母的分离及鉴定

从土壤中分离到一株产油脂的酵母菌株,通过形态特征和生理生化特性对分离出的酵母菌株进行鉴定,初步鉴定该菌株为红酵母(Rhodotorula glutinis).对其进行产油脂实验表明,分离所得到的红酵母菌株可以产生占菌体干重20.5%的油脂,且其主要组成为油酸(71.67%),棕榈酸(19.03%),硬脂酸(2.80%),可作为生物柴油的重要原料.     

毕赤酵母表达Neuritin蛋白的纯化及鉴定

为研究重组Neuritin的毕赤酵母表达蛋白的纯化方法及鉴定。应用甲醇诱导GSll5/pPIC9K-Neuritin毕赤酵母工程菌株表达Neuritin蛋白,采用硫酸铵盐析、His-Trap Crud亲和层析等方法,对该表达产物进行纯化。纯化后的蛋白进行SDS-PAGE、western-blot和生物质谱鉴定。结果显示,SDS-PAGE分析显示经甲醇诱导后表达的蛋白获得了与Neuritin分子量理论值相符的条带,western-blot分析它能够与抗表位抗体特异反应,进一步生物质谱分析证实该纯化重组蛋白为Neuritin重组蛋白。由此可知,本研究建立了一种有效的纯化方法,获得高纯度的Neuritin重组蛋白,为大量制备Neuritin纯化蛋白,开展其功能和机制研究奠定基础。     

有罪判决的证明标准

有罪判决证明标准是我国刑事证据理论研究中争议最大的问题之一.本文介绍了几种主要的有罪判决证明标准,并且考察了西方两大法系的有罪判决证明标准.在借鉴了西方两大法系的精华和总结我国有罪判决证明标准的不足的基础上,提出了建构我国有罪判决证明标准的具体构想.     

餐厨垃圾乳酸发酵残渣生产蛋白饲料的研究

以餐厨垃圾乳酸发酵残渣为研究对象,探讨其酵母发酵制取饲料蛋白的可行性.采用Plack-ett-Burman试验设计从9个因素中筛选出影响酵母发酵的正向显著性因素（尿素、不灭菌）和负向显著性因素（磷酸氢二钾、硫酸镁）.实验结果表明,残渣中残留的乳酸菌和乳酸盐对酵母发酵无影响,影响残渣酵母发酵的因素是酸性环境,酵母发酵前发酵底物无须灭菌.尿素最佳添加量为2.5%,最佳条件下发酵饲料中的真蛋白含量可高达31.1%,与餐厨垃圾乳酸发酵残渣中真蛋白含量（14.7%）相比,提高了1倍.     

Euler常数的证明及应用

给出了用级数与定积分不等关系的方法证明Euler常数，此种方法较一般教科书介绍的方法容易，并通过例子介绍了Euler常数在求级数的和、级数的收敛域、极限和定积分方面的应用．     

函数单调性在函数不等式证明中的应用探讨

利用函数的单调性给出了一类特殊函数不等式的证明方法,使复杂问题简单化了。     

含砷废酸制备亚砷酸铜及其在铜电解液净化中的应用

利用含砷废酸制备亚砷酸铜,并将所得亚砷酸铜应用到铜电解液的净化。研究结果表明:使用NaOH溶液调节废酸pH值为6.0时,废酸中Pb,Cu,Fe和Mg杂质的去除率达到90%以上,砷保留率为89.0%;除杂后,加入CuSO4和NaOH溶液,当pH=8,n(Cu):n(As)=2:1,反应温度为20℃,反应时间为1h时,亚砷酸铜的产率达到98.2%;所得亚砷酸铜为非晶体,其中Cu与As的物质的量比为2.15;当铜电解液中加入20g/L亚砷酸铜时,铜电解液中Sb和Bi分别从0.65g/L和0.15g/L降到0.30g/L和0.07g/L,Sb和Bi去除率分别达到53.85%和53.33%。     

酵母渣泥流变特性及粘弹性的测试

用RheometricsRFSⅡ型流变仪对酵母渣泥的流变曲线(r-γ)和粘弹性进行测试；结果显示酵母废渣具有一定的粘弹性，其τ-γ流变曲线有复杂的弯曲形状.在25～35℃范围，当温度处于28～35℃区间时，表观粘度及弹性均随温度的升高而升高.     

对皖北地区白酒曲粉中酵母菌的分离筛选

本研究针对皖北地区某酿酒企业提供的中温大曲进行了分离、纯化,采用涂布法、划线法对微生物菌群进行恒温培养并对其中的酵母菌进行形态学和生理学的测定后,得到两株酵母菌F1与F2。将得到的菌株F1、F2转接至液体发酵瓶中摇床培养,在此发酵周期中提取发酵液进行各项生化指标的测定,数据分析后得知F1酵母菌的适宜生长p H范围为4.0~6.0,F2酵母菌在发酵过程中p H值呈现上升趋势;在发酵第3d时,两种酵母菌发酵液中残糖含量开始迅速减少,在实际生产过程中则需要及时填补料液以保证发酵过程的顺利进行,该研究为企业生产提供了有效的数据支撑,具有一定的现实指导意义。     

高盐稀态酱油挥发性风味物质的分离、鉴定－修改

本文分别采用固相微萃取(SPME)、同时蒸馏萃取(VSDE)和直接溶剂萃取(DSE)法对高盐稀态酱油挥发性风味物质进行了分离、浓缩,并利用气质联用(GC-MS)对其挥发性风味物质进行了鉴定。共鉴定出147种风味化合物,其中酸类17种、醇类12种、醛类16种、酯类36种、呋喃（酮）12种、酮类13种、杂环化合物14种、酚类8种、吡喃（酮）6种、吡嗪类4种、吡咯（酮）3种、含硫化合物6种。研究结果表明高盐稀态酱油主要挥发性风味化合物为酯、酸、醛、杂环化合物和醇类;其中酯类化合物的数量和相对含量最多。此外,与日式和韩式酱油中的关键风味化合物相比,16种关键风味化合物在国产高盐稀态酱油中被检出。     

富铬酵母蛋白质的制备及红外光谱特征

目的研究金属铬与酵母细胞的结合方式。方法利用红外光谱法对啤酒酵母生物富集金属铬前、后蛋白质的变化进行分析。结果得到生物富集金属铬前、后的IR谱图。发现酰胺Ⅰ带的吸收峰发生位移,从1 657.78 cm移动至1 646.02 cm,且峰形发生变化。结论蛋白质肽链上的羰基氧与铬形成配位键。     

乳酸菌的细菌素及乳链菌肽在食品工业中的发酵与应用

乳酸菌的细菌素是具有抗菌活性的多肽、蛋白质或蛋白质复合物，其中 乳链菌肽是一种广泛应用的高效，无毒的天然食品防腐剂，评述了乳酸菌素的分类剂乳链菌肽在食品工业中的发酵和应用前景。