中国4个两性生殖卤虫品系的ISSR指纹分析

根据微卫星DNA序列设计了10种ISSR引物，对中国4个两性生殖卤虫品系的亲缘关系进行了分析．用10种ISSR引物对卤虫基因组DNA进行扩增，共获得188条清晰稳定的条带，75个基因座位，其中有99条多态性片段，53个多态性座位，片段长度在2000-150bp之间．聚类分析结果表明：3个内蒙品系卤虫亲缘关系较近，当遗传相似系数为0．5333时，明显把来自内蒙古和西藏的卤虫分为2个类群．     

不同品系卤虫卵的生物学测定值和营养组成分析

以美国旧金山湾、大盐湖和越南人工养殖的A.franciscana卤虫品系为参照,研究中国内陆盐湖和渤海湾盐田不同品系卤虫卵的生物学测定值和营养组成.结果表明:各品系卤虫水合卵径为224.9~292.6,μm,脱壳卵径为207.3~270.7,μm,卵壳厚度为2.2~12.2,μm,初孵无节幼体体长为399.7~490.4,μm,脱壳卵径与初孵无节幼体体长在一定程度上呈正相关(R2=0.694).卤虫卵和无节幼体大小与卤虫种和地理分布密切相关,两性生殖卤虫品系卵径显著小于孤雌生殖卤虫品系,且沿海盐场卤虫卵卵径小于内陆盐湖的卤虫卵卵径.各品系卤虫卵蛋白质含量占干质量的40.9%~49.1%,粗脂肪含量占干质量的11.8%~21.3%,能量值为20,193~22,192,J/g.不同品系卤虫总脂肪酸含量和EPA含量差别较大,分别为80.68~187.33,mg/g和0.53~9.06,mg/g.与生物学测定值相比,卤虫卵的营养组成与卤虫种和地理分布关系不大.     

不同地理品系卤虫的同工酶变异初步研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，国内外不同生态地区的孤雌生殖和两性列殖卤虫进行了酯酶（ＥＳＴ）、四唑氧化酶（ＴＯ）和碱性磷酸酶（ＡＬＰ）同工酶变异分析。指出不同地理品系卤虫有其独特的ＥＳＴ和ＴＯ标志酶带；孤雌生殖卤虫具有与两性生殖卤虫显不同的ＴＯ基本带型和ＡＬＰ标志带区。这些结果为卤虫地理品系数的纯度鉴定，以及两种生殖方式卤虫的分类和鉴别提供了生化指标。     

西北地区3个卤虫品系生物特性比较研究

对采自新疆鲸鱼湖卤虫(Artemia sp．)、新疆艾比湖和青海尕海卤虫(Artemia parthenogenetica)的3个品系的生物学进行了测定。研究了温度与孵化率之间的关系，以及盐度对鲸鱼湖卤虫孵化率的影响。观察了鲸鱼湖卤虫的染色体倍性组成。除壳厚外，鲸鱼湖卤虫卵的生物学测定值均大于另外2品系卤虫；最佳孵化温度范围：鲸鱼湖、艾比湖卤虫为20℃，尕海卤虫为25℃。鲸鱼湖卤虫卵的最佳孵化盐度范围是28。鲸鱼湖卤虫为两性生殖，与孤雌生殖的艾比湖和尕海卤虫一样，染色体倍性组成为2，染色体数为2n=42。     

尕海孤雌生殖卤虫罕见雄体的培养及其与中华卤虫的杂交

从中国青海尕海盐湖孤雌生殖卤虫种群中筛选出一个罕见雄体发生率较高的克隆,罕见雄体的发生率为3.1%.实验室批量保存了本克隆的休眠卵.利用该罕见雄体与中华卤虫的雌体进行了杂交实验,产生可育的F1代和可成活的F2代,但杂交后代(特别是F2代)出现杂种破落现象.认为孤雌生殖卤虫与亚洲的两性生殖卤虫(A.urmiana和A.sinica)具有较近的亲缘关系.     

中国两性生殖卤虫11个品系卤虫卵孵化特性的评价

对中国两性生殖卤虫１１个卤虫品系的卤虫卵的孵化特性进行了研究和评价。实验结果显示：１．各品系的孵化率的排序为ＭＤ〉ＣＤ〉ＧＮ〉ＹＣ〉ＳＱ〉ＣＨ〉ＮＨ〉ＢＨ〉ＨＪＱ〉ＳＢ〉ＢＮ,孵化率达７０％以上的品系占全部品系的３６．４％,超过６０％的孵化率的品系占全部品系的６３．６％;２．各品系的孵化效率的排序为ＭＤ〉ＧＮ〉ＣＤ〉ＹＣ〉ＳＯ〉ＣＨ〉ＢＹ〉ＨＪＱ〉ＮＨ〉ＳＢ〉ＮＨ,其中ＭＤ,ＧＮ,ＣＤ的卵径较小。     

天津塘沽盐场卤虫种群生态调查

本研究对2016年塘沽盐场盐田卤水理化性质和卤虫种群状况进行了调查分析.采用定点取样方式,以盐度30为梯度,选择9个不同盐度的盐池,于2016年5—11月每月进行取样调查.现场测得卤水盐度、温度和溶氧(DO),在实验室测定卤水pH,卤水经过0.22μm微孔滤膜过滤后,测定其溶解有机碳(DOC)、总氮(TN)和总磷(TP)含量,分析卤虫种群密度和组成、成虫雌雄比和雌性成虫卵胎生比等.结果表明,盐田卤水pH和DO随盐度的升高而略有下降,分别在7.6～8.9和1.9～4.5 mg/L范围.卤水DOC、TN和TP含量随盐度升高而增加,分别在11.45～90.10 mg/L、2.74～14.29 mg/L和0.07～0.63 mg/L之间.根据卤虫成虫的高雌雄比值1.5～9.0,初步判断塘沽盐场卤虫为孤雌生殖卤虫和两性生殖卤虫的混合种群.卤虫种群密度、组成和生殖方式等受温度和盐度的影响较为明显.春季(5月)卤虫种群密度小,孤雌生殖卤虫种群占优势,卤虫以胎生为主;夏季(6—8月)卤虫种群密度高、孤雌生殖卤虫种群占优势,卤虫以胎生为主;秋季(9—11月)卤虫种群密度逐渐降低,孤雌生殖卤虫种群优势降低,卤虫以卵生为主.在盐度80～180范围内,卤虫密度高,孤雌生殖卤虫占优势,以胎生为主;在盐度190～250范围内,卤虫密度低,两性生殖卤虫占优势,以卵生为主.本调查为研究渤海湾盐田卤水及卤虫种群状况、进行盐田生态调控提供了理论依据.     

中国孤雌生殖卤虫多倍体α—AMY同工酶基因的表达特征

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳法,对中国孤雌生殖卤虫10个品系的26个多倍体单个体克隆的α－AMY同工酶的基因表达情况进行了研究,所研究的α－AMY为多态酶重复基因表达,各多倍体克隆间的多态程度较高,说明群体存在较高的遗传变异。     

四个意大利蜜蜂品系苹果酸脱氢酶Ⅱ基因的遗传差异分析

研究了意大利蜜蜂(A.m.ligustica)4个王浆、蜂蜜生产性能不同品系-美意(Em)、澳意(Eo)、苏意(Es)和平湖浆蜂(Ep)的MDHⅡ同工酶基因型频率、基因频率及杂合纯合度.试验发现,MDHⅡ的a、b、c三个等位基因在4个品系中出现的频率不同.c在Em、Eo、Es和Ep中的基因频率分别为0.507、0.483、0.680和0.820,为优势等位基因.该结果表明在产浆性能高的品系中c基因频率较高,意味着可将c基因频率作为意蜂王浆产量性能的一个遗传标记.等位基因a在Em、Eo、Es和Ep中频率分别为0.323、0.263、0.193和0.087;在Em中出现的频率最高.而等位基因b在Eo中频率(0.253)高于其他3个品系(Em,0.170;Es,0.127;Ep,0.093).Ep的纯合度最高,达0.753,高于Em(0.533)、Eo(0.633)和Es(0.540).经独立性检验,4个意蜂品系MDHⅡ同工酶的基因型频率、基因频率、纯合度均达到极显著差异水平.     

添加碳源提高卤虫生物量和改善水质

在零换水养殖系统中,研究不同碳源及碳氮比(C/N)对高盐水体中卤虫生物量产出、营养质量和水质的影响.实验一在正常(NF,100%)、较低(LF,60%)和极低(VLF,30%)3个杜氏盐藻(Dunaliella salina)投喂水平下,分别添加蔗糖和淀粉两种碳源,C/N为20.实验二杜氏盐藻投喂水平为LF,分别添加蔗糖和淀粉两种碳源,C/N分别为20和40.单位养殖水体积1,000,m L,初始卤虫密度1.5,m L~(-1),养殖盐度50,温度24~25,℃,养殖周期14,d.结果表明,在相同单胞藻投喂水平下,添加碳源显著提高卤虫生物量(P0.05);水体中总氨氮(TAN)、NO_2~-、NO_3~-和总氮(TN)水平大幅度减少,pH有所降低,黏度保持稳定;脂肪酸C16:1n7含量有所增加,而C20﹕5n3含量有所降低.碳源对卤虫生物量的促进作用与卤水中生物絮团的形成密切相关,这一点可由相同单胞藻投喂水平下,添加碳源显著提高卤虫生物量和降低水中氮浓度等得到证明.比较蔗糖与淀粉两种碳源,分子结构简单的蔗糖作用效果较好.提高C/N对卤虫生物量的影响不显著.     

运城盐湖卤虫Artemia sinica饵料分析

Artemia Sinica为山西运城盐湖特有种．我们于1991年5月在运城盐化局一工段涝取成虫，立即用4％的福尔马林溶液浸制．将成虫50条取其消化遭，挤出内容物，客于100毫升蒸馏水并搅匀，取其中的水溶液做成50目装片，全部在显微镜下镜检．镜检结果如下：1．50目装片中所包括的种类：原生动物3种，藻类4种和有机质碎屑．2.50目装片中有机质碎屑最多，其次为绿色杜氏藻和盐生杜氏藻．隐杆藻属和原生动物则较少.在实验室人工饲养以盐生杜氏藻作为饵料效果最佳．     

濒危植物膝柄木生存现状及其恢复对策

膝柄木(Bhesa sinica)是卫矛科膝柄木属植物中分布最北的一个种,目前仅在广西海岸发现3株成年树和7株幼树,是我国几乎绝迹的特有种.膝柄木花期7～9月,次年3～4月果实成熟,很难有性繁殖.在群落演替中无更新层,将会被红鳞蒲桃(Syzigium hancei)和潺稿树(Litsea glutinosa)取代.膝柄木插条扦插处理20d后插条可以形成明显的愈伤组织圈,扦插60d的成活率最高为15%.建议通过人工快速繁殖或者组织培养措施实现膝柄木种群的恢复.     

我国西北地区黑腹果蝇P-M杂种劣育的研究

应用两类标准诊断杂交,对我国西北地区9个地方黑腹果蝇群体的P因子活性和细胞型调控能力进行了测定。结果表明:这些群体皆为缺乏P因子活性的M'品系;其细胞型调控能力呈现出中部地区高,东、西两边低的地理分布。对该地区自然群体和实验室保存的品系不同年份的测定发现:P因子活性不变,细胞型调控能力表现出在自然群体中上升,而在实验室品系中下降的相反方向的变化。但未发现类型的转变。本文讨论了这种变化的可能机理和意义。     

中国卤虫早期胚胎发育相关基因的研究——Orthodenticle基因克隆中简并引物的设计和优化

通过使用blastx、Blockmaker、CODEHOP和Primer Premier 5.0等在线网络工具和生物软件,针对中国卤虫Orthodenticle基因高度保守区域设计了简并引物.用所设计的简并引物克隆了中国卤虫Orthodenticle基因片段.在GenBank中以blastx方法进行比对,发现此段基因片段与美国卤虫Orthodenticle基因有高度的相似性.通过实验进一步证明,此种设计简并引物的方法可信性强,特异性高,能够快速得到满意的实验结果.     

HBK - SPF 鸭 MHC I 区域微卫星标记分析

摘要: 禽主要组织相容性复合体是一组紧密连锁高度多态的基因群,与免疫反应或敏感性密切相关,鸭 MHC I 区域全长 36. 8 kb,由 TAP1、TAP2 和 5 个 MHC I 拷贝基因( UAA-UEA) 组成。HBK-SPF 鸭是中国农业科学院哈尔滨兽医研究所培育的无特定病原体种鸭,分为 B 和 Q 2 个品系,已封闭繁育了 7 个世代。本文在鸭 MHC I 区域筛选了 4个微卫星位点,通过单链构象多态性分析和聚合酶链式反应直接测序,发现 A 位点具有多态性,为( GT) n 的重复结构,第 6 代 HBK-B 和 HBK-Q 的31 个个体和第 7 代 的140 个个体进行聚合酶链式反应,结果直接测序,在重复结构之前的 108bp 中,发现了 4 种纯合单倍型和 6 种杂合单倍型; B 位点未得到目的产物; C 位点位于 MHC I 拷贝基因UDA 和 UEA 之间,扩增结果与 UAA 和 UBA 之间序列高度同源,无法判断基因型; D 位点表现为单态,为( ATA) 15的固定重复结构。本研究为进一步研究鸭 MHC I 基因结构和建立家系提供了依据。     

Polymorphism of human cytomegalovirus （HCMV） UL144 gene in low passage clinical isolates

To explore the impact of gene polymorphism of human cytomegalovirus （HCMV） on virus virulence, the full-length UL144 gene and partial sequence of glycoprotein B （UL55） gene were sequenced and analyzed for 23 clinical strains of HCMV isolated from urine samples of pediatric patients with congenital or postnatal HCMV infection. Among the 23 isolates, 13 （57 %） were UL144 genotype 1A, 3（13 %） were UL144 genotypes 2 and 7（30 %） were UL144 genotype 3; geographic differences in geno- type distribution were found for both UL144 and gB gene. No UL144 genotypes 1B and 1C were found in this study while these two genotypes were common in HCMV strains isolated in the US. Our results also demonstrated that for all clinical strains of gB genotypes I, III and UL144 genotypes 1A, 2, and 3 found in this study, mother-to-fetus vertical transmission was possible.     

Cloning and characterization of <Emphasis Type="Italic">UL</Emphasis>34 gene of pseudorabies virus HB isolate

In this study, China isolate HB of pseudorabies virus (PRV) was confirmed and genotypically characterized by amplifying and sequencing of partial UL34, a conservative gene involved in the egress of nucleocapsids from the nucleus, for phylogenetic analysis. The open reading frame (orf) of UL34 of PRV HB isolate is composed of 786 nucleotides, which encoded 262 amino acids. In addition, a potential transmembrane domain (241-260 aa) and 11 potential phosphorylation sites were also found in the UL34 of PRV HB isolate. Multiple amino acids alignment indicated that UL34 proteins of PRV strains derived from different geographic origins were highly conservative, but some mutations were also found. Phylogenetic analysis based on UL34 protein indicated that PRV HB strain was evolutionarily distinct from other recent China strains sequenced so far, forming a single clade within the phylogeny. Moreover, PRV HB isolate had close evolutionary relationship with BoHV-1 and BoHV-5 within the Alphaherpesvirinae. Taken together, these results indicated that PRV strains were in the progress of evolution. This study has expanded the knowledge of genetic profiles of PRV strains.     

Cloning and Characterization of UL34 Gene of Pseudorabies Virus HB Isolate

In this study, China isolate HB of pseudorabies virus(PRV) was confirmed and genotypically characterized by amplifying and sequencing of partial UL34, a conservative gene involved in the egress of nucleocapsids from the nucleus, for phylogenetic analysis. The open reading frame(orf) of UL34 of PRV HB isolate is composed of 786 nucleotides, which encoded 262 amino acids. In addition, a potential transmembrane domain(241-260 aa) and 11 potential phosphorylation sites were also found in the UL34 of PRV HB isolate. Multiple amino acids alignment indicated that UL34 proteins of PRV strains derived from different geographic origins were highly conservative, but some mutations were also found. Phylogenetic analysis based on UL34 protein indicated that PRV HB strain was evolutionarily distinct from other recent China strains sequenced so far, forming a single clade within the phylogeny. Moreover, PRV HB isolate had close evolutionary relationship with Bo HV-1 and Bo HV-5 within the Alphaherpesvirinae. Taken together, these results indicated that PRV strains were in the progress of evolution. This study has expanded the knowledge of genetic profiles of PRV strains.