溴化乙锭—TRAP法检测端粒酶活性

端粒酶是一种核蛋白，在真核生物体内，通过将端粒重复顺序转移到染色体末端面维持染色体的稳定。端粒酶活性存在于生殖细胞和永生癌细胞，但在正常细胞中却极低乃至无法检测，我们使用ＥＢ染色简化了端粒酶活性检测的传统的ＴＲＡＰ法。     

克隆蓝藻Calothrix sp.PCC7601 cpcB2A2基因的初步研究

从蓝藻Ｃａｌｏｔｈｒｉｘｓｐ．ＰＣＣ７６０１染色体ＤＮＡ中分离出含藻蓝蛋白基因ｃｐｃＢ２Ａ２的略３．８ＫｂＤＮＡ片段，与质粒ｐＵＣ１８重组，构建成一种重组质粒，ｐＰＣ２１８－ＰＣＺ，转化Ｅ．ｃｏｄｉＪＭ１０９，获得了一系列克隆子，经斑点分子杂交和限制性内切核酸酶分析，筛选出了初步认为含有ｃｐｃＢ２Ａ２基因的克隆子。     

两种无尾两栖类的体细胞银染色研究

本文是用银染色技术对中华大蟾蜍（Ｂｕｆｏｂｕｆｏｇａｒｇａｒｉｚａｎｓ）和黑斑蛙（Ｒａｎａ．ｎｉｇｒｏｍａｃｕｌａｔａ）的骨髓细胞．肠组织细胞染色体的核仁组织者，进行了观察．结果如下：１．两种动物带有银染色阳性核仁组织者染色体的数目均为１—２条．２．银染阳性的核仁组织者（Ａｇ－Ｎｏｒｓ）出现部位是在染色体的次缢痕区．其中中华大蟾蜍的Ａｇ－Ｎｏｒｓ位于Ｎｏ．６染色体长臂之未端，黑斑蛙位于Ｎｏ．１１的长臂近着丝点区．３．有Ａｇ－Ｎｏｒｓ联合现象．     

乙型肝炎病毒(HBV)DNA免疫的初步研究

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增了编码ＨＢＶｓＡｇ的基因序列,将其插入到ｐｃＤＮＡ３载体中,位于人巨细胞病毒（ＣＭＶ）早期启动子下游．重组质粒ｐｃＤＮＡ３－ｓＡｇ转染细胞后检测到ＨＢｓＡｇ表达．用纯化后的重组质粒直接注射到ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠骨骼肌内,诱发实验小鼠产生了抗ＨＢｓＡｇ特异性抗体．ＰＣＲ扩增未检测到注射部位及肝脏细胞染色体中有外源ＨＢＶＤＮＡ整合     

江苏北部岸外辐射沙洲有孔虫分布及其沉积环境分析

据定量分析,发现辐射沙洲海底表层沉积中有孔虫有９９种,５３属组成,这些有孔虫可划分为４个组合：Ａ．Ａｍｍｏｎｉａｂｅｃｃａｒｉｉ－Ｅｌｐｈｉｄｉｕｍｍａｇｅｌｌａｎｉｃｕｍ;Ｂ．Ａｍｍｏｎｉａｂｅｃｃａｒｉｉ－Ｐｒｏｔｅｌｐｈｉｄｉｕｍｇｌａｂｒｕｍ;Ｃ．Ａｍｍｏｎｉａｂｅｃｃａｒｉｉ－Ａ．ｐａｕｃｉｌｏｃｕｌａｔａ;Ｄ．Ａｍｍｏｎｉａｂｅｃｃａｒｉｉ－Ｅｐｉｓｔｏｍｉｎｅｌｌａｎａｒａｅｎｓｉｓ     

玉米（Zea mays L．）盐逆境胁迫蛋白基因nac1的染色体原位杂交物理定位

报道了玉米低拷贝盐逆境胁迫蛋白基因ｎａｃ１生物素标记的染色体原位杂交结果．供试探针为这个基因的ｃＤＮＡ克隆,其长度仅为５５０ｂｐ．采用酶联免疫级联放大和ＤＡＢ检测系统检测,实验结果表明,杂交信号分布在第２染色体短臂和第１０染色体长臂,与着丝粒的百分距离分别为６７．５６±３．２９１和８０．９２±２．４１１,检出率分别为５．８１％和１０．３２％．并对植物单和低拷贝基因的染色体原位杂交技术与基因染色体原位杂交作图进行了讨论     

端粒酶活性检测研究进展

端粒酶是细胞内常见的一种逆转录酶,其功能在于维持细胞内染色体末端端粒的长度。端粒酶活性的异常升高通常与肿瘤细胞的产生以及生长相关。端粒酶的活性已经成为了癌症诊疗领域中非常重要的生物标志物。因此,对于端粒酶活性准确且高效的定量分析检测方案是当今分析科学,临床医学等相关学科领域研究的重点之一。随着分析测试技术的发展,提出了一系列具有超高性能的端粒酶活性检测方案。总结了近5年来端粒酶活性检测方案的发展全貌并且预估了端粒酶活性检测的未来发展方向。     

两种杂交群（BALB／c♂×不同♀系）与BALB／c小鼠繁殖性能及单抗腹水产量的比较

对两种杂交群（ＢＡＬＢ／ｃ♂×ＫＭ，ＢＡＬＢ／ｃ♂×ＬＡＣＡ♀）的繁殖能力及制备单抗腹水的产量同ＢＡＬＢ／ｃ近交系进行比较。实验表明，两杂交群的各项繁殖指标均优于ＢＡＬＢ／ｃ，总离乳鼠数分别为ＢＡＬＢ／ｃ的１．９８、２．０７倍，接种人肺炎支原体Ｆ８瘤细胞，ｋＣＦ１（ＢＡＬＢ／ｃ×ＫＭＦ１小鼠）的腹水产量为ＢＡＬＢ／ｃ的２．５倍，效价相同；制备六种单抗腹水ＬＣＦ１（ＢＡＬＢ／ｃ×ＬＡＣＡＦ１）的产量均优于ＢＡＬＢ／ｃ，分别为ＢＡＬＢ／ｃ的１．１７～２．８８倍，除Ｅ１０抗体滴度低外，其它各抗体效价相同或接近于ＢＡＬＢ／Ｃ。     

935例HBsAg阳性血清检测PHSAR的临床意义

采用ＥＬＩＳＡ法检测９３５例乙肝病毒（ＨＢＶ）患者血清ＰＨＳＡＲ，并对其与有关ＨＢＶ标志物的关系进行了探讨．结果表明，ＰＨＳＡＲ检出率分别与ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ及抗－ＨＢｃ有密切关系，尤以ＨＢｅＡｇ的存在更为相关，是乙肝病毒复制，具有高度传染性的指标之一．     

抗菌肽A—蜂毒素杂合肽基因在大肠杆菌中的克？…

采用Ｅｃｏ ＲⅠ和ＢａｍＨ Ⅰ接头将化学合成的大小为５对碱基的ＣＡ（１－７）Ｍ（５－１２）杂合肽基因克隆到Ｅ．ｃｏｌｉ分泌表达载体ｐＩＮ－Ⅲ．ＯｍｐＡ２上的ＥｃｏＲⅠＢａｍＨⅠ位点之间，并对其在Ｌｐｐ启动子和Ｌａｃ启动子／操纵调控下的分泌表达进行初步研究。     

Study on the Detection of Telomerase Activity by Combining DNA Sequence Analysis with TRAP

Telomeric repeat amplification protocol (TRAP) is now aconventional assay for detecting telomerase activity. However, this method presents problems owing to tedious quantitation, radioisotopic handling. In order to alleviate these inconveniences, a novel telomerase DNA sequencing assay together with TRAP to detect human telomerase activity was developed. It was used to detect telomerase activity in Hela, HLF, MCF, K562, SMMC-7721 cells, Leukocytes and RNase-pretreated or heat-treated cells as control. Telomerase activity assayed by this method was positive when the number of K562 cells examined was 102，103, and 104. The telomerase activity depended on the number of K562 cells used in the assay. Telomerase activity of Rnase-pretreated cells or heat-treated cells, and human normal peripheral blood leukocyte(Leu) were negative. The result of this method was available within a few hours and was handled without radioisotope. Further studies should be taken to detect telomerase activity in quantitation.     

端粒酶催化亚单位hTRT基因在人肝癌组织中的表达

目的：探讨人端粒酶催化亚单位hTRT基因在肝癌组织中的表迭情况．方法：用兔抗人端粒酶催化亚单位多克隆抗体作为一抗，生物素化羊抗兔IgG作为二抗，对肝癌组织石蜡切片采用免疫组织化学方法测定hTRT基因的表达．结果：30例肝癌组织中25例检出hTRT阳性(25／30)，正常肝组织无l例阳性．结论：免疫组织化学法检测hTRT敏感性高、特异性强、重复性好，较其他方法简便、快速、经济且无放射性核素污染等缺点，临床具有推广价值．     

端粒酶核酶抑制肿瘤细胞生长的研究

已证明有84.7%的人类恶性肿瘤组织细胞中端粒酶表达异常增高.端粒酶的作用是合成染色体末端端粒重复序列维持染色体稳定及细胞永生化的关键因素.因此,端粒酶在肿瘤发生发展中起重要作用,是目前最广泛的肿瘤标志物.核酶是一种具有内切酶活性的RNA分子,只要满足一定的空间结构就能定点切割RNA底物.切割端粒酶的核酶(简称为端粒酶核酶)主要针对端粒酶的两个亚单位hTR和hTERT抑制两基因的表达,降低端粒酶的活性,抑制肿瘤细胞的生长.     

全反式维甲酸对HL—60细胞hTERT基因表达和端粒酶活性的影响

目的：探讨全反式维甲酸（ATRA）诱导HL－60细胞分化过程中人类端粒酶逆转录酶（hTERT)蛋白表达和端粒酶活性的改变,方法：应用间接免疫荧光标记法通过流式细胞仪检测hTERT蛋白含量的变化;采用多聚酶链反应－酶联免疫反应（PCR－ELISA）方法检测ATRA处理HL－60细胞前后端粒酶活性的改变,用碘化丙锭染色经流式细胞仪检测细胞周期的变化,结果：ATRA作用于HL－60细胞后,细胞内hTERT蛋白含量逐渐降低,细胞的端粒酶活性相应受到抑制。结论：在IL－60细胞分化过程中,可以通过hTERT基因的表达下调而抑制端粒酶的活性。     

永生细胞系,体细胞和生殖腺细胞中端粒酶活性检测

用TRAP法对来自人肺、乳腺和皮肤的恶性肿瘤永生细胞系．和该三种组织来源的正常体细胞,及正常卵巢和睾丸组织进行了端粒酶活性检测。结果发现,三种永生细胞系和卵巢与睾丸组织中均可测到端粒酶活性,而三种组织来源的体细胞不能测到;提示端粒酶可能对恶性肿瘤细胞永生化、生物种系正常繁衍,和正常体细胞的衰老与寿命起着重要的决定作用。     

端粒酶与肿瘤诊断

端粒酶是一种具有逆转录酶特性的DNA聚合酶,临床检测发现在很多恶性肿瘤中都能检测到端粒酶的活性,端粒酶可以作为诊断这些肿瘤的生物学标志.在某些肿瘤中,端粒酶表达会随着肿瘤的进展而上调,因此又可以作为肿瘤恶性程度评价的一个指标.而化疗后端粒酶的变化与临床疗效密切相关,因此也可作为临床疗效及预后判断的指标.