凝血酶抑制剂抑制动力学研究

由Ｓ－２５４菌株产生的膜血酶抑制剂是一种多组分的肽类化合物，其中Ｒ－Ｔｈｒ－Ｔｈｒ－ａｒｇｉｎｉｎａｌ组分的活力最强。在３７℃、ｐＨ＝７．４的Ｔｒｉｓ缓冲液中，该抑制剂对凝血酶的抑制作用与抑制刑的浓度关系密切。在抑制剂浓度较小的情况下，抑制剂与酶的结合呈直线关系，随着抑制刑浓度的提高，残留活力曲线则出现漂移。根据Ｄｉｘｏｎ图和Ｌｉｎｅｗｅａｖｅｒ－Ｂｕｒｋ图的研究，该抑制剂对凝血酶的结合与底物呈竞争性抑制，抑制常数Ｋｉ＝２．０×１０－７ｍｏｌ／Ｌ。     

2,5—二氯硝基苯对脲酶活性的抑制及其动力学研究

本文应用动力学方法分析了２，５－二氯硝基苯对脲酶的抑制作用。实验结果表明，２，５－二氯硝基苯是尿酶的有效抑制剂，改变抑制剂和底物脲的浓度，测定脲酶活力并应用Ｌｉｎｅｗｅａｖｅｒ－Ｂｕｔｈ双倒数作图，测定该抑制剂对脲酶的抑制作用，结果均呈反竞争性抑制。     

人工合成非肽类Caspase-3抑制剂的研究进展

半胱氨酸蛋白酶（Caspase）家族是代表着一类细胞内的蛋白酶系统,在介导细胞凋亡扮演着重要的角色[1].细胞凋亡的发生是一个复杂Caspase家族引导的蛋白酶级联反应过程,尽管对于不同的细胞或不同信号传导途径诱发的凋亡过程中参与的Caspase有所不同,但Caspase-3是细胞凋亡蛋白酶级联反应的必经之路,也是凋亡的关键酶和执行者.而由Caspase调控的细胞凋亡的不正常激活是引起人体机能紊乱的一些疾病的主要根源,例如肿瘤、自身免疫性疾病、病毒性感染以及各种神经退行性疾病等.所以针对Caspases-3的抑制剂将可能是上述疾病的一种非常有效的治疗药物.由于天然的Caspase抑制剂和人工合成肽类Caspase抑制剂在特异性,透膜性,体内稳定性和活性等方面的不足,人们便开始了对人工合成非肽类抑制剂的研究.本文对近年来人工合成非肽类Caspase-3抑制剂的研究进展情况作一综述.     

假单胞菌DM11的二氯甲烷脱卤素酶研究──Ⅱ．动力学性质和抑制剂

对来自假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｓｐ．）ＤＭ１１菌株的二氯甲烷脱卤素酶（简称ＤＭ１１脱卤素酶）的动力学性质和抑制剂进行了研究。用１／Ｖ对１／［ｓ］作图法，测出ＤＭ１１脱卤素酶以ＣＨ２Ｃｌ２、ＣＨ２Ｂｒ２、ＣＨ２Ｉ２、ＣｌＣＨ２Ｂｒ和ＣｌＣＨ２Ｉ等５种化合物为底物时的Ｋｍ值分别是６７、２０、５５、７和９μｍｏｌ／Ｌ，比活力分别是７７．８、１２３．３、７８．８、５６．１和６０．３ｍｋａｔ／ｋｇ蛋白。测定了１４种抑制剂对ＤＭ１１脱卤素酶的５０％抑制浓度（Ｉ５０）。甲基谷胱甘肽（ＧＳＣＨ３）是ＤＭ１１脱卤素酶的竞争性抑制剂，四硝基甲烷（ＴＮＭ）是非竞争性抑制剂，当甲基谷胱甘肽和四硝基甲烷与ＤＭ１１脱卤素酶一起保温时，甲基谷胱甘肽对酶有保护作用。     

抑制剂存在的酶催化反应类型和动力学参数的确定

基于不同类型抑制剂存在的酶催化反应的特点，利用计算机编程判定抑制剂类型和求定动力学参数。处理时先对实验测定的不同底物Cs分别在不存在和存在抑制时对应的反应速率V0和v，利用线性回归法求出1／V0～1／Cs和1／v～1／Cs的关系模型，然后通过比较两直线方程的斜率和截距以及交点坐标的特点，判定抑制剂类型，最后根据不同类型抑制剂的动力学方向求出动力学参数。中以羧肽酶A催化底物Bz—Gly—Gly—Phc分解反应和富马酸水解成苹果酸的反应实验测定结果为例进行验证，，结果表明．利用所编程序确定的抑制剂类型与常规方法很好的吻合。在酶催化动力学研究中利用这种数据处理方法将使实验过程得到简化．实验结果更准确、更可靠。在数据处理过程中．为高效、快速确定抑制剂类型和求定动力学参数，采用了开放式计算机编程语言Matlab进行程序设计，并在中提供了程序设计流程和实用源程序清单。     

Caspase-3抑制剂的筛选体系构建及药物筛选

Caspase-3是细胞凋亡途径中重要的靶蛋白,研究Caspase-3抑制剂或激活剂,对治疗心脑血管疾病、肿瘤等具有积极意义.利用原核表达系统高效表达Caspase-3,并以表达的粗酶构建基于Caspase-3抑制剂的体外高通量筛选模型,随后对实验室保存的960种放线菌次级代谢产物进行筛选,获得9株具备分泌Caspase-3抑制剂活性的菌株,随后进一步复筛,确认了2株具备分泌高活性的Caspase-3抑制剂的菌株pwh890和pwh891,均可抑制80%的Caspase-3活性.最后对pwh890分泌的次级代谢产物进行初步分离纯化,获得31.3mg纯度较高的抑制剂,为后续的抑制剂的结构解析和改造奠定基础.     

钙蛋白酶(Calpain)抑制剂药理活性的研究进展

钙离子(Ca²⁺)作为细胞的第二信使，是参与人体内各项活动的重要调控因子，钙蛋白酶(Calpain),它是一种中性半胱氨酸蛋白酶，主要受Ca²⁺激活，Calpain在许多生理过程中发挥了很大的作用，例如细胞周期的调控与凋亡，还有细胞信号转导和葡萄糖转运等.近年来，人们对这类酶的兴趣大大增加，因为它与脑缺血和其他神经损伤、神经退行性疾病如阿尔茨海默病、心肌缺血相关的神经细胞死亡有很大关系，因此本文对钙蛋白酶抑制剂在神经细胞损伤、失血性休克、缺血再灌注以及阿尔茨海默病研究等方面进行了综述.     

降低PARP酶活性对培养细胞SCE及微核效应的影响

聚腺苷二磷酸核糖基化作用是细胞内的一种重要的核蛋白转译后加工修饰，它参与细胞内很多重要的生物事件。催化该反应的酶是聚腺苷二磷酸核糖合酶（ＰＡＲＰ），底物为ＮＡＤ。本文使用ＰＡＲＰ酶的抑制剂苯甲酰胺处理培养细胞，研究了降低ＰＡＲＰ酶活性对培养细胞姐妹染色单体交换及微核效应的影响，为全面评价ＰＡＲＰ酶抑制剂在细胞内的功效打下基础。     

胰蛋白酶抑制剂的药用功能

胰蛋白酶抑制剂是具有抑制胰蛋白酶作用的一类物质.该类物质的来源不同,其活性和作用的酶也不同.基于对近几年国内外相关文献的分析,综述了其多种临床应用功能,说明胰蛋白酶抑制剂是人类重要的药物资源.     

神经氨酸苷酶抑制剂研究进展

神经氨酸苷酶（NA）是流感病毒的一种主要表面糖蛋白，在病毒致病过程中起重要作用。本文对经NA为药物靶点，设计的各种NA抑制剂作以综述。     

鞘铁菌(Siderocapsa)固锰的生化分析

从鞍山大赵台天然水滤池中分离出固锰能力很强的二种鞘铁菌,经胰酶处理菌体表面,破碎菌体,以及用胰酶和酶抑制剂处理菌体破碎后的内含物等实验表明,鞘铁菌的固锰能力可能是由于菌体内具有固锰能力的酶系所致。     

新疆蜗牛酶的研制

以野生蜗牛嗉囊为原料提取蜗牛酶产品,检测所含纤维素酶、淀粉酶的活性,对其蜗牛酶产品进一步测试,结果表明新疆蜗牛酶中的纤维素酶活力为450U/g淀粉酶为405U/g。验证了新疆蜗牛酶中纤维素酶的活力很高。     

酶工程研究进展与发展前景

结合笔者等人二十多年来在酶的生物合成及其调节控制，酶的分离纯化，酶，细胞和原生质体固定化，酶分子修饰，酶的非水相催化，植物细胞培养生产药用酶等酶工程领域中所取得的研究成果，简单介绍了二十多年来酶工程研究的进展，对酶工程的发展前景进行了探讨。     

糖尿病大鼠肾、胰基因组DNA甲基化状态的变化

从正常大鼠，糖尿病大鼠，中药糖微康治疗的糖尿病大鼠，西药开搏通治疗的糖尿病大鼠的肾，胰等组织中提取出其基因组DNA，应用对DNA甲基化作用敏感的限制性核酸内切酶HpaⅡ和MspⅠ（为一组同裂酶（进行了限制性酶切图谱分析，结果表明，DNA化作用的主要位点在CpG二核苷酸处，且“糖微康”在关闭患糖尿病后肾组织中被异常活化的基因的同时，还能活化糖尿病动物胰组织中处于静息状态的基因，由此可见糖尿病的发病和治疗都与DNA甲基化作用密切相关。     

基于结构信息的酶解制备ACEIP

在结构信息分析的基础上,选择具有特定作用位点的酶,进行酶解制备血管紧张素转化酶抑制肽(ACEIP)的研究,对以结构信息为基础的定向控制酶解制备模式进行了初步探讨.文中首先通过全略微分重叠计算,对所选择的11种抑制剂的结构信息进行分析,认为当肽链的N端为Asp、Glu,C端为Pro、Trp、Met、Phe、Lys时,对血管紧张素转化酶(ACE)的抑制效果较好;在此基础上,选择具有特定作用位点的酶,以罗非鱼肉为对象进行酶解制备ACEIP的研究,并对酶解产物进行分离和分析,发现其中含有Thr-Cys、Asp-Trp和Glu-Met,所得结果与理论分析结果相符,初步说明了以结构信息为基础的定向控制酶解制备模式的可行性.     

微生物酶资源的开发和利用(上)

概括介绍了微生物酶资源的开发和应用进展,内容包括世界和我国工业酶制剂生产概况,开发酶制剂新品种的重要性和有利条件,快速开发具有应用价值新酶的途径,微生物酶的应用方式和应用领域以及130余种微生物来源的酶在实际中的应用简况。     

酶生物传感器的研究进展

简要介绍了酶生物传感器的工作原理、分类以及酶生物传感器在环境监测、食品分析、生物医学等方面的应用,探讨了影响酶传感器研究进展的瓶颈,并展望了其应用前景.     

偶联酶法检验L-天冬酰胺酶的动力学分析

根据McClure偶联酶反应理论,通过实验对偶联酶法检验L-天冬酰胺酶活力的反应条件进行了动力学分析,确定了合理的附加酶用量,建立了偶联酶法检验此酶活力程序。用该程序测定的底物K_m值和产物的抑制常数K_1值与文献值相符。     

SOD模型化合物(MSOD)对几种蔬菜抗氧化酶活性,叶绿素及脯氨酸含量的影晌

用一定浓度的SOD模型化合物(0.015‰)以喷洒方式处理田间几种蔬菜(茄子、三叶芹、辣椒、甘蓝、花菜、黄瓜等),取其叶片,分别测定了抗氧化酶系统中的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性、叶绿素的含量及细胞内游离脯氨酸的含量.其结果表明,不同的蔬菜品种、同一品种不同生长时期,抗氧化酶系统中的几种酶活性表现不一致.同时也发现MSOD对叶绿素的合成、脯氨酸在细胞内的含量均有一定的影响.     

酶的分形反应动力学

应用分形理论推导了酶催化的基元反应动力学方程，针对方程的物理意义做了简单的讨论。