一种新沼泽红假单胞菌鉴定及其类胡萝卜素含量分析

 通过观察实验室保藏的光合细菌X1的表观形态、生理特性以及采用16S rDNA序列对比的方法进行鉴定,采用超声波破碎法、酸-热破壁法和研磨法对X1中类胡萝卜素进行提取,并比较各种方法效果.用丙酮作为提取剂,进一步利用紫外分光光度法、薄层层析法和高效液相色谱(HPLC)法对类胡萝卜素提取液进行了分析.确定光合细菌X1属于紫色非硫细菌中的红罗菌科、红假单胞菌属,沼泽红假单胞菌(Rhodopsedomonas palustris);发现超声波浸提法提取类胡萝卜素效果最好,其次是酸-热破碎法和研磨法;X1中主要积累虾青素和一种未知色素,其中,虾青素含量为0.28mg/L.采用分光光度法在495nm下,总类胡萝卜素含量为2.125mg/g(干重).     

利用沼泽红假单胞菌降低地下岩溶水中硫酸盐含量的研究

地下岩溶水中含有大量Ca2+、Mg2+、Na+、K+、SO42-离子,具有高矿化度、高硬度、高硫酸盐含量的特质,不能直接使用;利用微生物降解处理岩溶水有益于保护环境.实验选用沼泽红假单胞菌(Rhodopseudanonas palustris),分别采用单独使用沼泽红假单胞菌处理、加入沼泽红假单胞菌生长所需营养成分处理、用聚合氯化铝絮凝沼泽红假单胞菌处理等三种方法,对小店区地下岩溶水中的硫酸盐进行处理,旨在降低硫酸盐含量,达到饮用水标准,有效利用山西省太原市小店区的水资源.结果显示,沼泽红假单胞菌可以降解岩溶水的硫酸盐,且用聚合氯化铝絮凝沼泽红假单胞菌后在厌氧光照条件下处理效果更好,可以使硫酸盐含量由原来的1 996.91 mg/L降为720.24mg/L.单独使用沼泽红假单胞菌处理时,当菌液体积比岩溶水体积为1:3,处理4d时,岩溶水中硫酸盐含量降到最低,且菌密度呈下降趋势;加入沼泽红假单胞菌生长所需的营养成分后,其菌密度随处理时间的延长而增大,水中硫酸盐含量呈降低趋势;用浓度为0.01 mol/L的聚合氯化铝絮凝沼泽红假单胞菌,60 min菌体絮凝效果最佳,同时用其处理岩溶水中的硫酸盐效果更好.     

沼泽红假单胞菌固氮酶活性的调节

本文研究了沼泽红假单胞菌谷氨酰胺合成（简称ＧＳ）对其固氮酶活性的调节。外源氨的加入迅速抑制固氮酶活性，同时ＧＳ被高度腺苷酰化，随着氨的消耗，固氮酶活性逐渐恢复，ＧＳ腺苷酰化程度也逐渐降低。ＧＳ专一的不可逆抑制剂甲硫氨酸亚砜亚胺（简称ＭＳＸ）可以解除氨和谷氨酰胺对固氮酶的抑制作用。     

沼泽红假单胞菌类胡萝卜素的提取和分析

对沼泽红假单胞菌B.9菌株（RhodopseudomonasPal-ustrisstrainB．9）类胡萝卜素的提取进行了研究。用超声波破碎菌体,类胡萝卜素得量较高;菌体中类胡萝卜素用丙酮提取,提取效果因菌体量、丙酿用量而变;提取波经革取、皂化。洗涤得类胡萝卡素粗制品,对其分析表明B．9菌株含有螺菌黄素系列的类胡萝卜素,     

沼泽红假单胞菌类胡萝卜素的提取和分析

对沼泽红假单胞菌B．9菌株（Rhodopseudomonas Palustris strain B.9)类胡萝卜素的提取进行了研究。用超声波破碎菌体,类胡萝卜素得量较高;菌体中类胡萝卜素用丙酮提取,提取效果因菌体量,丙酮用量而变,提取液经萃取,皂化,洗涤得类胡萝卜素粗制品,对其分析表明B．9菌株含有螺菌黄素系列的类胡萝卜素。     

沼泽红假单胞菌发酵新工艺及开发应用研究

<正>沼泽红假单胞菌,是地球上最古老的具有原始光能合成体系的原核生物,沼泽红假单胞菌是广泛存在于自然界的微生物,是一类以光为能源,利用自然界中的有机物、硫化物等为营养体,并能进行光合作用的生物.在生物学分类中,属于真细菌纲、红螺菌目、红螺菌科、红假单胞菌属.当前广泛应用于以下几个方面:①高浓度工农业有机废水的处理及资源化.②水质净化剂,水产养殖的水质调控及促进健康生长.③高营养饲料添加剂.④农业生产中的高效活性菌肥.     

沼泽红假单胞菌对硫化亮绿的脱色研究

研究了各种环境因子对沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)降解硫化亮绿的影响，结果表明脱色最适温度和pH分别为40℃和7.0，在通N2、厌氧的条件下菌株的脱色效果最好．此外，还讨论了硫化亮绿初始浓度对硫化亮绿降解速率的影响，当初始浓度低于100mg／L时的降解速率随浓度增加而加快，高于100mg／L时则表现出抑制作用；在可降解浓度范围内，硫化亮绿降解率为55％～92％．     

沼泽红假单胞菌砷代谢基因多样性及进化分析

对已公布全基因组的沼泽红假单胞菌(Rhodopseudanonas palustris)砷代谢基因进行解析,探求其砷代谢机制及进化关系.已公布全基因组的7个菌株中均含有砷抗性(ars)基因簇,主要包括arsR,arsC,arsM,arsB,acr3p,arsH,但不同菌株间的arsR同源性可以有较大差异,有6个菌株同时含有Ⅰ和Ⅱ两类arsC,5个菌株含有arsM,arsM同源性也有较大差异.结果表明:R.palustris砷代谢机制的主体为细胞质As(Ⅴ)还原和As(Ⅲ)甲基化,菌株不同,砷代谢基因呈现明显差异和多样性.     

沼泽红假单胞菌高产辅酶Q10菌株的诱变选育研究

以沼泽红假单胞菌为出发菌株,通过紫外诱变和罗红霉素抗性筛选,以期获得辅酶Q10高产菌株.试验结果表明,紫外照射时间60-70s时可能达到最大正向突变概率.通过紫外诱变、罗红霉素初筛和发酵复筛,获得一株沼泽红假单胞菌突变株R-1,辅酶Q10产量达到0.021g/L,较出发菌株产量（0.018g/L）提高16％.经过6次传代培养,突变菌株产辅酶Q10产量稳定,可用于进一步研究.     

利用反向 PCR 鉴定沼泽红假单胞菌中野生质粒

为准确研究沼泽红假单胞菌的野生质粒及其携带的基因信息,在常规碱裂解法基础上,对沼泽红假单胞菌Rhodopseudomonas palustris AS1.2352中野生质粒提取方法进行了优化,优化方法具有易操作、耗时少、纯度高等特点,所得质粒DNA纯度和质量均满足进一步分子操作的需要.同时,利用反向PCR技术鉴定该野生质粒,并结合生物信息学方法对其进行分析,比传统的质粒丢失法验证和考察质粒更为省时、可靠和直观.证明菌株携带4个野生质粒,其中2.3 kb的质粒序列与Escherichia coli pEC157 Rom-like protein gene有97.8%的同源性,推测1885~1887碱基为复制起点.     

氢化物原子荧光光谱法测定人发中微量硒

利用氢化物原子荧光光谱法对人发中的硒进行测定,并选用标准参考物质GHS-1(人发标样)及多个人发样品的加标回收率对方法的准确度和精密度进行验证,所测值与标准值相符,样品的平均加标回收率为96.31%。表明此方法测定的结果可靠。     

沼泽红假单胞菌GroE基因高保守区DNA片段的克隆,测序和特性分析

利用原核微生物GroE基因特定区域高保守性设计了简并引物，以Rhodopseudomonas palustris Y6的染色体为模板进行PCR扩增，得到片段594bp的产物，将该DNA片段连接到pUC-T载体多克隆位点上，转化大肠杆菌DH5α菌株，得到阳性重组子。经Southem 杂交验证，已克隆的594bpDNA片段来自Rhodopseudomonas palustris测序结果分析表明该片段是细菌groE基因高保守区。     

同位素稀释质谱法测定人血清中痕量硒

对巯基棉分离硒的方法进行了改进,建立了一种IMEP-17人血清样品中痕量硒的同位素稀释电感耦合等离子体质谱测量方法。采用微波消解-巯基棉分离对人血清样品进行前处理,通过对巯基棉分离血清中硒的条件优化,结果表明,柱条件为5mol/LHCl、解脱Se条件为1mL重蒸HNO₃、巯基棉最佳用量为0.14g时,能够有效分离出人血清样品中的Na、Mg、K、Ca等碱金属和碱土金属,同时硒的回收率最高,达到92%以上。将该前处理方法应用到同位素稀释电感耦合等离体质谱法中,平行取样6次,测量结果的平均值为(0.07747±0.00046)μg/g,在标准值（0.07896±0.0027）μg/g的不确定度范围内。     

微波消解-ICP-AES法测定ABS塑料中的铅

建立微波消解-电感耦合等离子体原子发射光谱法测定ABS塑料中铅的含量为297.5 mg/kg.实验中消解体系为7.0 m L浓硝酸和1.5 m L30%过氧化氢,实验方法的检出限为7.35 mg/kg,精密度RSD5%,加标回收率为88.0%~107.0%.该方法样品用量少,溶样周期短,测试速度快,适用于ABS塑料中铅含量的快速测定.     

微波消解-电感耦合等离子体质谱测定沉积物中的金属元素

采用不同的微波消解程序和不同混合酸消解近海沉积物标准参考物(GBW0 7314 ) ,用ICP -MS测定16种金属元素(Al,Ba ,Cd ,Co ,Cr,Cu ,Fe ,K ,Mn ,Mo ,Ni,Pb ,V ,Zn ,Ca和Mg)的含量.依据回收率,比较了消解程序、混合酸组成、用量对GBW0 7314的消解效果.结果表明,由6mLHNO3 - 2mLHF/2mLH2 O2 组成的混合酸对沉积物具有很好的消解能力,微波加热2 0min能迅速有效消解沉积物;除Al外,GBW 0 7314中各元素的测定值与推荐值相符     

微波消解-ICP-AES法测定白玉菇中的金属元素

采用微波消解,电感耦合等离子体发射光谱法测定白玉菇中的金属元素。实验结果表明白玉菇中富含多种对人体有益的金属元素。对比发现,白玉菇中K,Na、Ca、Mg、Al、Fe、Zn、Cu、Pb的含量远远高于其他几种蘑菇。方法回收率在93.2%～108.9%之间,相对标准偏差小于5.0%。方法操作简单,分析速度快,准确度高,灵敏度好。     

紫外光催化氧化消解-氢化物发生-原子荧光光谱法测定人发中Se

采用紫外光催化氧化消解试样,氢化物发生-原子荧光光谱法测定人发中Se含量的方法.探讨了消解条件、原子荧光光度计工作条件及氢化物发生反应条件,对比沸水浴加热和紫外光加热2种将Se (Ⅵ)还原为Se (Ⅳ)的方法,研究氨基磺酸消除氮氧化物干扰的最佳条件.在最佳实验条件下测定人发标准参考物质和人发试样中Se的含量,方法的检出限为0.08 μg/L (相对标准偏差为2.1%),荧光强度与Se (Ⅳ)的质量浓度在0～10 μg/L范围内呈线性关系.研究结果表明,人发标准参考物质中Se的测定值与标示值相吻合.人发试样中Se的质量分数与文献值(0.4～0.9 μg/g)一致.     

紫外光度法测定腊肠中的亚硝酸根

指示剂中性红与亚硝酸根在盐酸介质中发生亚硝化反应,亚硝化反应产物在紫外区351nm处有一灵敏吸收峰,据此建立了一个简单、快速、选择性好的测定亚硝酸根的紫外光度法,回收率在92.78%左右,平均相对标准偏差为0.67%,并用此法测定了腊肠中亚硝酸根的含量。