灭活原生质体融合技术选育苏云金杆菌新菌种——原生质体融合条件的研究

利用双灭活原生质体融合技术获得了苏云金杆菌新菌株。着重对原生质体制备、再生、灭活及融合的实验条件进行了报道。     

灭活原生质体融合技术选育苏云金杆菌新菌种：原生质体融合？…

利用双灭活原生质体融合技术获得了苏云金杆菌新菌株。着重对原生质体制备,再生、恶劣活及融合的实验条件进行了报道。     

光合细菌与嗜热脂肪芽孢杆菌原生质体制备的条件研究

光合细菌能迅速降低水中COD、氨氮和硫化氢的含量,增加溶氧量,已较广泛应用于净化污水和水产养殖等领域.选育耐高温的光合细菌对其粉状制剂的研制及实践应用具有重要意义.在实验室选育有嗜热脂肪芽孢杆菌和耐盐光合细菌基础上,以2种菌为亲本菌株,采用原生质体融合技术选育耐高温光合细菌.本研究主要探讨嗜热脂肪芽孢杆菌和耐盐光合细菌原生质体制备与再生的条件.     

产α-ALDC的枯草芽孢杆菌原生质体融合条件

通过双亲灭活原生质体融合技术对2株产α-乙酰乳酸脱羧酶的枯草芽孢杆菌3226-5和V-20进行原生质体融合.初步探讨了2菌株较适宜的融()条件.对获得的几百株融合子进行酶活比较,从中得到20株酶活比双亲高的菌株.     

酯酶同工酶技术在选育Bt新菌株中的应用

研究了苏云金杆菌亲本菌株及通过原生质体融合而获得的融合子的酯酶同工酶谱，通过比较分析，融合子的酯酶同工酶谱较之亲本菌株有显著变化，表明酯酶同工酶在原生质体融合中可作为鉴定融合子的遗传标记     

棉花增产菌和苏芸金芽孢杆菌原生质体的形成融合条件的探讨

本实验对两种不同属间的细菌棉花增产菌(一种芽孢杆菌Kan~rCan~(?))和苏芸金芽孢杆菌(Kan~(?)Can~r)原生质体的形成、再生及融合进行了研究,初步确定了适应这两种出发菌株的破壁、再生及融合的最佳条件.在此条件下,其破壁率均可达到98%;融合率可达2.15×10~(-5).试验结果证明,两种不同属间的细菌细胞融合是完全可能的.     

苏云金芽孢杆菌aiiA基因在枯草芽孢杆菌中的表达

根据NCBI上已公布的枯草芽孢杆菌BS168菌株的β-1,4-glucanase(eglS)基因以及苏云金芽孢杆菌的aiiA基因序列,设计引物并扩增得到eglS基因的启动子、信号肽序列和aiiA基因.构建重组表达载体Ps4-eaiiA,转化枯草芽孢杆菌BS168,得到枯草芽孢杆菌工程菌BS168/Ps4-eaiiA.该工程菌诱导发酵后经SDS-PAGE和Western blotting分析表明:aiiA基因实现了在枯草芽孢杆菌中的表达.对胡萝卜软腐欧文氏菌进行马铃薯的抗病性实验,结果表明aiiA基因在枯草芽孢杆菌中表达的AiiA蛋白对胡萝卜欧文氏杆菌表现出一定的抗病性.     

苏云金芽孢杆菌aiiA基因在枯草芽孢杆菌中的表达

根据NCBI上已公布的枯草芽孢杆菌BS168菌株的β-1,4-glucanase(eglS)基因以及苏云金芽孢杆菌的aiiA基因序列,设计引物并扩增得到eglS基因的启动子、信号肽序列和aiiA基因.构建重组表达载体Ps4-eaiiA,转化枯草芽孢杆菌BS168,得到枯草芽孢杆菌工程菌BS168/Ps4-eaiiA.该工程菌诱导发酵后经SDS-PAGE和Western blotting分析表明:aiiA基因实现了在枯草芽孢杆菌中的表达.对胡萝卜软腐欧文氏菌进行马铃薯的抗病性实验,结果表明aiiA基因在枯草芽孢杆菌中表达的AiiA蛋白对胡萝卜欧文氏杆菌表现出一定的抗病性.     

壳聚糖的抑菌效果研究

比较了苯甲酸和不同浓度壳聚糖对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、黑曲霉菌、苏云金芽孢杆菌等的抑菌效果.研究结果表明,壳聚糖对以上五种菌均具有一定的抑菌效果,且抑菌效果好于苯甲酸.壳聚糖对金黄色葡萄球菌和苏云金杆菌的最低抑菌浓度为0.125％,对大肠杆菌的最低抑菌浓度为0.25％,对枯草芽孢杆菌的最低抑菌浓度为0.5％,对黑曲霉的最低抑菌浓度为1.0％.说明,金黄色葡萄球菌和苏云金杆菌对壳聚糖较敏感,黑曲霉对壳聚糖不太敏感.     

田基黄提取物抑菌作用的研究

该实验以金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、青黄链霉菌、酿酒酵母菌、苏云金芽孢杆菌和变形杆菌为供试菌种,采用采用滤纸片扩散法对田基黄水提取液进行抑菌实验研究,并测定其最低抑菌浓度（MIC）,其结果表明：田基黄水提取物对供试菌种普遍有抑制作用,黑曲霉除外;MIC也因菌种不同而不同,金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌和青黄链霉菌为0.25g/mL,酿酒酵母菌为0.5g/mL,苏云金芽孢杆菌和变形杆菌均为0.125g/mL.实验还采用不同有机溶剂的提取物对选取的五种供试菌种进行抑菌作用研究,其结果表明：田基黄有机溶剂提取物对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、青黄链霉菌、苏云金芽孢杆菌均有抑制作用,且抑菌效果均比水提取物的抑菌效果明显.     

苏云金杆菌杀虫晶体蛋白的crylC基因

目前,有8种crylC类基因已被克隆,其主要分布在杀虫亚种和鲇泽亚种.本文对杀虫晶体蛋白CrylC的结构与功能、作用方式、抗性问题及基因改造等方面作一综述,还就存在的问题与前景进行探讨.     

一株苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)的分离与鉴定

利用醋酸盐对苏云金芽孢杆菌芽孢萌发的选择性抑制特性，采用选择性培养基从土壤中分离苏云金芽孢杆菌，对分离菌株的个体形态，生理生化特点进行了分类研究，确定该菌株即为苏云金杆菌，采用改进的培养基培养伴胞晶体，证明该培养基可在48h内产生大量的伴胞晶体。     

苏云金杆菌抗噬菌体菌株HD-1-98的选育

本文介绍了苏云金杆菌抗噬菌体菌株ＨＤ－１－９８的选育及其生产性能和对昆虫毒力的试验．     

冬凌草抗菌霜剂的制备和局部抗感染实验

以济源产冬凌草的醇提浸膏为主成分,制备了一种皮肤外用霜剂,对其安全性和局部皮肤抗感染作用进行了实验研究。乙醇回流法获得冬凌草的醇提物浸膏,体外抑菌实验结果显示:该提取物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和苏云金杆菌具有明显的抑制活性。以该提取物浸膏为主成分,制作了一种皮肤外用霜剂。急性皮肤刺激性实验结果表明:该霜剂对正常皮肤及破损皮肤均无刺激性。该霜剂对金黄色葡萄球菌引起的局部皮肤感染有明显的治疗效果,每天给药3次,每次给药0.2 g,7d后皮肤红肿现象完全消失。局部皮肤体外微生物培养实验发现:注射部位皮肤已无病原菌感染。该研究为临床开发冬凌草的外用制剂提供重要的实验依据。     

贯叶连翘总提取物对苏云金杆菌7216的抗菌作用

报道了贯叶连翘总提取物作用于苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis)7216并经光照和未光照处理后对该菌的抗菌作用。检测了提取物作用时，在12h的培养过程中7216的光密度(OD640nm)值、活菌数(CFU)及提取物最低杀菌浓度(MBC)值。结果表明提取物对7216有较强的抑菌和杀菌作用，且这两种作用与其浓度有关，但不需光照。     

提高苏云金芽孢杆菌制剂杀虫效果的策略

苏云金芽孢杆菌制剂是一种主要的生物杀虫剂 ,本文从培育高效菌株、增加昆虫对 Bt的摄入量、化学杀虫剂促进 Bt的杀虫作用、植物次生物质的增效作用、Bt与其杀虫微生物及其代谢产物的协同作用、简单化合物提高 Bt的毒力以及保护 Bt免受紫外光的损伤等方面提高 Bt制剂的杀虫活性进行了论述。     

分子筛在苏云金芽孢杆菌发酵液浓缩中的应用研究

本文观察了不同孔径分子筛对 B.t.发酵液的浓缩效果 ,结果表明 6 0 0 - 5 0万 Da这 9种规格孔径的分子筛膜的滤出液都检测不到晶体和细胞的存在 ,晶体和芽胞的回收率为 10 0 %。但超滤液通量随着膜孔径增大而增大。发酵液固形物含量越低 ,分离时间越短 ,浓缩比越高 ,当固形物含量在 1.5 %时 ,分离时间为2 0 min,浓缩比为 8.6 6 7;而固形物含量为 15 %时 ,分离时间延长到 6 9min,浓缩比降为 1.348。浓缩效果还受待浓缩液通过分子筛速度的影响。