一株高产聚β－羟基丁酸的细菌

从处理印染废水的活性污泥中分离出一株细胞内积累聚β－羟基丁酸（ＰＨＢ）的革兰氏阴性，氧化型，可运动的短杆菌（Ｚ＿５）。经鉴定为动胶菌（ｚｏｏｇｌｏｅａ，ｓ·ｐ）。该菌在简单的葡萄糖蛋白胨培养基中，培养３４ｈ，积累的ＰＨＢ可达细胞干重的５２％（Ｗ／Ｗ）。由Ｚ＿５所得的抽提物经红外先谱，核磁共振分析确证为ＰＨＢ；提取物ＰＨＢ纯度可达９９．８７％。这是一株有工业化生产应用前景的优良菌株。     

积累聚β－羟基丁酸的菌种选育及发酵条件

苜蓿根瘤菌ＡＳ１．１５９经亚硝基胍和Ｃｏ￣（６０）γ射线诱变，获得一株高积累聚β－羟基丁酸（ＰＨ８）突变株Ｊ５１７７，积累的ＰＨＢ可达细胞干重的３０％，约为原出发菌株的１０倍。采用分批补料发酵法，积累的ＰＨＢ可达细胞干重的７１％。菌体生长最适Ｃ／Ｎ比值为２．５，菌体积累ＰＨＢ最适Ｃ／Ｎ比值为１５；ＣａＳＯ＿４，Ｎａ＿２ＭｏＯ＿４对菌体积累ＰＨＢ有促进作用。     

高产聚β—羟基丁酸菌的分离与检测

用野外采回的土样进行菌种分离，得一株编号为Ｂ８的菌株，经初步鉴定该菌株是因氮菌属的一株固氮菌。Ｂ８菌株可利用淀粉在细胞内积累大量的聚β羟基丁酸，从Ｂ８菌株细胞中提取出的ＰＨＢ，经元素分析，核磁共振及红外光谱检测，结果与Ｓｉｇｍａ产品的性质和其纯度完全一致。经小型发酵试验测定，Ｂ８菌株产ＰＨＢ的量达细胞干重的４１．５％。     

高产聚β－羟基丁酸菌的分离与检测

用野外采回的土样进行菌种分离，得一株编号为Ｂ８的菌株，经初步鉴定该菌株是固氮菌属（ＡｚｏｔｏｂａｃｔｅｒＢｅｉｊｅｒｉｎｃｋ）的一株固氮菌。Ｂ８菌株可利用淀粉在细胞内积累大量的聚β－羟基丁酸（ＰＨＢ），从Ｂ８菌株细胞中提取出的ＰＨＢ，经元素分析、核磁共振及红外光谱检测，结果与Ｓｉｇｍａ产品的性质和其纯度完全一致。经小型发酵试验测定，Ｂ８菌株产ＰＨＢ的量达细胞干重的４１．５％。     

微生物发酵法生产聚β-羟基丁酸

真养产碱菌（Ａｌｉｃａｌｉｇｅｎｅｓｅｕｔｒｏｐｈｕｓ）Ｍ４０５可以利用葡萄糖生产聚β－羟基丁酸（ＰＨＢ）。对真养产碱菌Ｍ４０５的营养性能以及ＰＨＢ的定性、定量检测进行了研究，并对培养基进行了优化。结果表明，ＰＨＢ经苏丹黑Ｂ梁色呈蓝黑色，它可以用氯仿抽提法提纯，在２３５ｎｍ分光光度计检测。真养产碱菌Ｍ４０５在氮源（（ＮＨ４）２ＳＯ４）达２ｇ·Ｌ－１时，经补料式一步培养后，葡萄糖转化率达到２６９％，此时ＰＨＢ含量最高。     

细菌降解氰的研究

通过驯化富集培养，从煤气厂曝气池活性污泥中分离出一株能降解氰的菌株，经鉴定为芽孢杆菌属。该菌对氰有较高忍受能力，降解氰的最适条件为：充分曝气供氧；温度为３５℃，ＰＨ＝９．０；在条件下，培养液中氰的浓度为１０．８９ｍｇ／Ｌ时，摇床振荡培养３５小时，氰的降争率可达６１．９％。     

真养产碱杆菌H16突变株利用葡萄糖为碳源高产聚-β-羟基丁酸的研究

利用常规紫外诱变技术〔１〕，处理真养产碱杆菌（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｅｕｔｒｏｐｈｕｓ）Ｈ１６，采用葡萄糖为碳源的选择培养基进行筛选，获得了能高效利用葡萄糖为碳源高产聚－β－羟基丁酸（ＰＨＢ）的突变菌株。摇瓶试验表明，该突变株能利用多种碳源积累ＰＨＢ，ＰＨＢ积累量达６．７ｇ／Ｌ。     

产 PHB 重组大肠杆菌质粒稳定性的研究

从工程应用的角度研究了重组Ｅ．ｃｏｌｉＨＭＳ１７４（ｐＴＺ１８Ｕ－ＰＨＢ）的质粒稳定性，结果表明，质粒ｐＴＺ１８Ｕ－ＰＨＢ具有结构稳定性和分裂不稳定性，ＰＨＢ在胞内的大量积累和重组菌较低的生长速率增加了质粒的分裂不稳定性。为了保证细胞的正常生长及表达，在种子培养基中必须添加氨苄青霉素（Ａｐ）；由于接种时种子带入的１０ｍｇ／ＬＡｐ足以杀死丢失了质粒的细胞，因而在摇瓶发酵阶段不必再添加Ａｐ。在ＬＢ和ＬＢＧ培养基中传代１８次后，带质粒的菌分别为７．４％和３．５％；细胞每分裂一次，质粒的平均丢失率分别为０．９６％和０．９３％。并建立了野生菌的Ａｐ敏感动力学方程和质粒丢失的动力学方程     

蜡质芽孢杆菌（Bacillus cereus）芽孢的形成及与PHB的关系

芽孢并非细菌生活史不可缺少的部分．它的形成受环境因素的影响．ＰＨＢ（聚β－羟基丁酸）是在营养丰富（尤其Ｃ／Ｎ比值高）时，在细胞内积累的一种贮藏物质．当营养缺乏，细菌细胞可以利用这些贮藏物质作为碳源和能源．Ｂａｃ．ｃｅｒｅｕｓ在以３％葡萄糖为碳源，０．６％蛋白胨为氮源的培养基中，菌体生长旺盛，ＰＨＢ积累多，芽孢形成晚．一定浓度磷酸盐和镁离子利于菌体生长和ＰＨＢ积累．离心洗涤的细胞悬浮在蒸馏水中，在５ｈ内补入葡萄糖，会使芽孢形成过程逆转，芽孢数减少．连续传代，可以降低芽孢形成能力．     

固氮菌B8—G菌株产聚—β—羟基丁酸发酵条件研究

通过利用碳源、氮源实验，发现固氮菌Ｂ８－Ｇ菌株，在以ＮＨ４ＮＯ３为氮源、蔗糖或甘露醇为碳源的发酵培养基中生长良好。在３０℃，２２０ｒｐｍ摇床培养４８ｈ，Ｂ８－Ｇ菌株的生物量可达９．５１ｇ·Ｌ－１以上，ＰＨＢ含量可达细胞干重的７４％以上。同时对Ｂ８－Ｇ菌株的培养条件也作了研究，采用补料分批培养方法，获得Ｂ８－Ｇ菌株的生物量达到１７．２ｇ·Ｌ－１；ＰＨＢ的含量达到７６．１４％。     

黑曲霉AJ1958菊粉酶的产生和性质

从菊芋根际土壤中分离出一株菊粉酶（ＩｎｕｌｉｎａｓｅＥ．Ｃ．３．２．１．７）产生菌，经物理和化学诱变得高酶活黑曲霉突变株ＡＪ１９５８．该菌株在培养基（０．０７ｇ／ｍＬ菊芋提取液１０００ｍＬ，豆饼粉５ｇ，麸皮５ｇ，ＫＣＩ０．７ｇ，ＦｅＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．０１ｇ，ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．５ｇ，ＰＨ５．０）中，于３０℃振荡培养３ｄ，酶活力可达６４μｍｏｌ·ｍｉｎ－１．酶水解反应的最适ＰＨ为３．０～４．０，最适温度为６０℃，在ＰＨ２．５～５．５的范围内和７５℃以下较稳定．适宜条件下，１０ｈ内０．０５ｇ／ｍＬ的菊粉溶液中之底物几乎１００％被酶水解．产物糖中果糖质量分数为９３％，葡萄糖质量分数为５．６％．该突变株产生的菊粉酶具有较满意的水解性和热稳定性．     

真养产碱杆菌H16突变株利用葡萄糖为碳源高产聚—β—羟基丁酸 …

利用常规紫外诱变技术,处理真养产碱杆菌Ｈ１６,采用葡萄糖为碳源的选择培养基进行筛选,获得了能高效利用葡萄糖为原高产聚－β－羟基丁酸的突变菌株。摇瓶试验表明,该突变株能利用多种碳源积累ＰＨＢ,ＰＨＢ积累量达６．７ｇ／Ｌ。     

生物法转化丙烯腈制取丙烯酰胺的研究：（Ⅰ）菌种的分离,诱变及鉴定

从石油化工厂污水中，分离到一株腈水合酶活力较高的菌株Ｓ１１５。对Ｓ１１５进行紫外诱变后，从１００只变异株中得一株酶活提高幅度较大的菌ＡＳ１１５，其腈水合酶活力可达７９７００ｕ／ｍＬ，对丙烯腈的转化率达９３．５４％，Ｓ１１５经鉴定为微球菌Ｍｉｏｃｒｏｃｏｃｃｕｓｓｐ。     

双歧杆菌活化及其选择性计数培养基研究

本实验结果表明，对于双歧杆菌，采用适当方法在－１８℃下一般冰箱中保藏半年后，利用添加适当的增菌物质经二次活化，双歧杆菌的凝乳时间小于４ｈ，ＰＨ＝４．６８，总菌数达１０９个／ｍｌ。另实验筛选出一种选择性的培养基即ＭＭＲＳａｇａｒ。对于由Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ和Ｓ．ｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｓ混菌发酵的发酵乳，该培养基能专一性的选择Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ，可用于Ｂ．ｌｏｎｇｕｍ的活菌计数及分离。     

蜂房芽孢杆菌B－91几丁质酶的合成条件

从厦门地区牡养殖场分离筛选到一株产几丁质酶活力较高的蜂房芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌ－ｌｕｓａｌｖｅｉ）Ｂ－９１，研究了该菌几丁质酶的合成条件。结果表明：该菌在以几丁质为碳氮源的培养基中生长，能合成多量的几丁质酶。酶的合成受各种几丁质诱导。在产酶培养基中添加不同的有机或无机氮源，均能促进酶的合成，而葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和乳糖对酶合成有阻遏作用。该菌几丁质酶合成的最适培养基初始ｐＨ为６．８，最适温度为２８℃。在２５０ｍｌ三角瓶装５０ｍｌ培养基，接种量为２％，振荡培养６０ｈ时，培养液中几丁质酶活力可达２２１２ｕ／ｍＬ．     

苝醌类化合物产生菌固态发酵工艺研究

从云南省西北部山区采集到一株能产生Ｂａ醌类化合物的寄生菌属真菌,以ｍ（米）：ｍ（玉米粉）：ｍ（麦麸）＝２：１：１为基础培养基,研究了温度,ＰＨ,碳源,氮源,水对该菌产生北醌类化合物的影响。并用正交实验选择了固态发酵的最佳培养条件：在每千克基础培养其中添加２０ｇ蛋白胨和０．８ｋｇ水,温度２６℃,ＰＨ自然,北醌类化合物的质量分数约为０．２％。     

CAR－baeillus亚单位rRNA基因分子克隆及斑点杂交方法的建立

用真细菌类亚单位ｒＲＮＡ中的保守片段序列合成引物，从小鼠来源的ＣＡＲ－ｂａｃｉｌｌｕｓＣＢＭ株的基因组中用ＰＣＲ方法扩增出其１．５Ｋｂ大小的基因片段，两端加尾ｄｃ和已加尾ｄＧ的ＰＢＲ３２２质粒连接，转化入ＪＭ１０９菌中，在含有四环素的培养基中挑选克隆经氨苄青霉素筛选后，在ＬＢ基液中大量增殖，经溶菌酶裂解，提取重组质粒，经ＰＳＴＩ消化，得到１．５ｋｂ大小的插入菌段，经ＨｉｎｄⅢ、ＨｉｎｆⅠ、ＥＣＯＲＩ（ＨａｅⅢ）和ｘｈｏⅠ测定忠实性后，以此为模板，用非放射地高辛标记试剂盒合成探针，其灵敏性可达１．２ｐｇ，且特异性较强。     

猪源双歧杆菌筛选及生物特性参数测定

采用双歧杆菌选择性培养基，从健康猪肠道和粪便中共分离到９０株细菌，根据微生态学关键指标，筛选出１０株双歧杆菌，这些菌株能够耐受０．８％－１．０％的胆盐，在ＰＨ３．５ＢＳ肉汤中３７℃下保浊ｈ存活率在４０％以上，代谢产物对４种常见致病菌均有不同程度的抑制作用，双歧杆菌与上述４种致病菌在ＢＳ液体培养基中混合培养到３６ｈ，能够彻底清除病菌，３株双歧杆菌对小猪肠道上细胞有良好的粘附作用。     

L－乳酸发酵的研究──（Ⅱ）－L－乳酸生产菌的选育

利用淀粉－酸性培养基富集培养法和ＫＭｎＯ４－ＫＢｒ平板检出法从土壤中分离得到根霉菌株Ｒ－２，以其为出发菌经紫外诱变，在琥珀酸平板上筛得了变异株Ｒ－２－９１，其乳酸产率为１０．３％，对糖的转化率为６８．９％。     

广西食蟹猴群中志贺氏菌的检出、分型以及对抗菌药物的敏感性试验

采用国际（ＧＢ４７８９．２８－８４）的检验方法，对４４５０份猴粪便检测，检出志贺氏菌１７２株，阳性检出率３．９％，取其中５０株做血清学分型，皆属于Ｂ群志贺氏菌，主要血清型为３ｃ型３２株（占６４％），Ｙ变种１２株（占２４％）其次４ｂ型３株，Ｘ变种２株２ａ型１株（分别占６％，４％，２％），以此５０株福氏志贺氏菌对１０种抗菌素作了敏感度及抑菌效果评价，结果丁胺卡那霉素及先锋霉素Ｖ敏感度为１００％（高度敏