茴香原生质体培养研究

以茴香（ＦｏｅｎｉｃｕｌｕｍｖｕｌｇａｒｅＬ．）幼苗茎切段在ＭＳ附近２，４－Ｄ１ｍｇ／Ｌ、６－ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ的培养基上诱导产生愈伤组织，经４～５次继代后形成胚性愈伤组织。将胚性愈伤组织转至ＭＳ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ＋２，４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ＋６－ＢＡ０．２５ｍｇ／Ｌ的液体培养基中培养，形成胚性细胞悬浮系。悬浮细胞在含有１．５％纤维素酶、１％果胶酶、０．５％蜗牛酶的混合酶液中酶解得到大量的原生质体，原生质体用修改的ＫＭ８Ｐ培养基中做液体浅层培养。２天后细胞发生一裂，两个月后形成０．５～１ｍｍ大小的小愈伤组织，转入含琼脂糖的固体培养基中３周后形成２～３ｍｍ的愈伤组织     

红三叶和白三叶愈伤组织的诱导和胚性细胞悬浮系的建立

以红三叶（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍｐｒａｔｅｎｓｅ）野生品种巴东红三叶的叶片为外植体,在ＭＢ－１至ＭＢ－９的固体培养基上诱导愈伤组织,筛选出最佳培养基是ＭＢ－９培养基．以白三叶（Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍｒｅｐｅｎｓｅ）裁培品种“路易斯安娜”和“Ｈｕｃａ”的叶片为外植体,接种在ＭＢ－９固体培养基上诱导愈伤组织．愈伤组织形成以后,均在ＭＢ－９固体培养上继代培养３～４次后,获得胚性愈伤组织,然后转至ＭＢ＋３ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ＋０７ｍｇ／ＬＢＡ＋０２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋２ｍｇ／Ｌ甘氨酸＋５００ｍｇ／ＬＣＨ＋３％蔗糖的液体培养基中,经强化培养,２个月后,获得胚性细胞悬浮系．实验结果表明,缩短换液时间,即每隔３～４ｄ换一次,可加快胚性细胞悬浮系的建立．     

红豆杉愈伤组织的诱导和培养

研究了不同的基本培养基、不同的激素种类和不同的种植体对红豆杉愈伤组织诱导的影响。实验结果表明,在愈伤组织诱导中,２ｍｇ／Ｌ ２,４－Ｄ的诱导效果优于２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ,枝段的诱导率高于叶片。Ｂ５和ＨＥ培养基利于愈伤组织的诱导,Ｂ５和６,７－Ｖ培养基利于愈伤组织的生长,其平均生长速率分别为０．９９ｇ／（Ｌ·ｄ）和０．６０ｇ／（Ｌ·ｄ）。     

枸杞花药愈伤组织细胞悬浮培养与植株再生

采用枸杞花药进行离体培养,建立细胞系,诱导植株再生,结果在含不同激素的４种培养基上都诱导出愈伤组织,诱导率在１．７％￣１６．９％,愈伤组织在ＭＳ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ的固体培养基上获得大量单细胞,在液体培养基中获得含有大量胚状体的愈伤组织块,收集悬浮培养物转移到ＭＳ＋６ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ的固体培养基上,胚状体能够萌发形成大量绿色小芽,转入生根培养基（ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ）中,２０ｄ后得到     

五针松针叶愈伤组织的诱导和培养基优化

以五针松针叶切段为外植体，接种在ＧＤ和ＭＢ二种基本培养基上进行比较实验。结果表明，ＧＤ培养基诱导五针松针叶愈伤组织效果较好。在此基础上，对２，４－Ｄ，ＢＡ，肌醇，ＣＨ和蔗糖五个因子，四种水平进行了正交设计试验，试验结果表明，五针松针叶愈伤组织生长的最佳培养基配方和为ＧＤ＋５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ＋１ｍｇ／ＬＢＡ＋５００ｍｇ／Ｌ肌醇＋６００ｍｇ／ＬＣＨ＋３％蔗糖＋０．７％琼脂。     

高蛋白籼稻品系H28胚培养力的初步研究

以籼稻Ｈ２８优良品系为材料，通过胚培养诱发愈伤组织并继代培养，最适的诱导培养基为ＭＳ＋２ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ，在此培养基上产生的愈伤组织具有较强的分化能力，将愈伤组织转移到分化培养基，光照培养１７ｄ后，在ＭＳ＋０．２５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋１ｍｇ／Ｌ ＢＡ的分化培养基上，愈伤组织的芽分化率可达４０％。在分化培养基上培养１０ｄ后，将愈伤组织转移到无激素或低浓度激素的培养基上，其分化出苗率有明显的提高。     

番木瓜体细胞胚发生及发育的影响因素

研究了影响番木瓜（Ｃａｒｉｃａｐａｐａｙａ）体细胞胚发生、发育的一些因素．结果表明：①番木瓜无菌小苗幼根在附加ＮＡＡ１．０ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＧＡ３０．５ｍｇ／Ｌ的改良ＭＳ培养基上可诱导出大量具良好胚性潜能的愈伤组织；②愈伤组织在附加ＮＡＡ０．２５ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ０．２５ｍｇ／Ｌ的改良ＭＳ培养基上可连续继代并得到胚性化；③在所试验的激素种类中，ＫＴ是适于体细胞胚的发育，最适浓度为０．５ｍｇ／Ｌ；④０．１％～０．３％的活性炭有利于体胚的发生、发育；⑤体细胞胚在固体培养基上完成球形胚期前的发育，在液体培养液中完成球形胚期后的发育可提高成熟体胚的产量和质量     

甘蓝型油菜萝卜质不育系恢复材料Ad-6(F4)测交二代恢复株TCF2的快繁及生根

油菜萝卜胞质不育系恢复材料Ａｄ－６（Ｆ４）测交二代恢复株ＴＣＦ２,在ＭＳ附加５ｍ ｇ／Ｌ６－ＢＡ＋ ０．５ｍ ｇ／Ｌ ＮＡＡ,３ｍ ｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋ ０．２ｍ ｇ／Ｌ ＮＡＡ,３ｍ ｇ／Ｌ ６－ＢＡ＋ ０．３ｍ ｇ／Ｌ ＮＡＡ＋６００ｍ ｇ／Ｌ水解乳蛋白以及５ｍ ｇ／Ｌ６－ＢＡ＋ ０．３ｍ ｇ／ＬＮＡＡ＋ ５ｍ ｇ／ＬＡｇＮＯ３ 的不同培养基上诱导丛生芽,结果表明５ｍ ｇ／Ｌ６－ＢＡ＋ ０．３ｍ ｇ／ＬＮＡＡ＋ ５ｍ ｇ／ＬＡｇＮＯ３ 对ＴＣＦ２ 诱导丛生芽有较好的效果．小芽生根培养基为１／２ＭＳ效果最好．     

苜蓿组织培养体细胞胚发生的细胞学观察

苜蓿无菌苗下胚轴在含２ｍｇ／Ｌ２．４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ的ＭＳ培养其中诱导出愈伤组织，愈伤组织在含有３ｍｇ／ＬＮＡＡ和１．５ｍｇ／ＬＫＴ的ＳＨ培养基中形胚性愈伤组织，并伴随有体细胞胚的发生。     

杜仲细胞的悬浮培养

杜仲外植体在ＭＳ＋２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ的培养基上可诱导出生长速度快、离散性好、适合于悬浮培养的愈伤组织；愈伤组织在ＭＳ＋２，４－Ｄ２．０ｍｇ／Ｌ＋ＣＨ３００ｍｇ／Ｌ的液体培养基上进行振荡培养，经３～４次继代，即可建立起悬浮细胞系；悬浮细胞的形状为长形、椭圆形、圆形和“月牙”形。     

小冠花高效体细胞胚胎发生与植株再生的研究

目的建立小冠花稳定高效体细胞胚胎植株再生体系。方法采用植物离体组织培养技术,通过优化外植体,基本培养基及其激素组合,提高体细胞胚发生和植株再生频率。结果子叶外植体在附加1.0mg/L 2,4-D,1.0mg/L NAA,0.5mg/L KT和100mg/L脯氨酸的MSB培养基上35d100%形成体细胞胚,产生体细胞胚数量达625个/g,在MS KT 1.0mg/L IBA 0.1mg/L 脯氨酸300 mg/L培养基上转换成完整植株的平均数为21棵/g。再生植株移栽成活率为80%,其形态特征和生长习性未见变异。外源激素是体细胞胚胎诱导所必需的,2,4-D是其中最关键的一种。结论建立了小冠花高频稳定高效体细胞胚胎发生和植株再生体系。     

龙牙楤木组织培养与不定芽再生植株

以龙牙楤木Aralia elate(Miq.)Seem的幼嫩茎、叶为外植体，在含有0．5mg／LNAA 0．5mg／LBA培养基上分别添加0．5mg／12，4-D、2mg／12,4-D时，茎、叶外植体出愈率最高,愈伤组织转入MA (1-3)mg／LBA (0-0．5)mg／LN从后，形成了密布白色霜块状、绿色瘤状和黄褐色颗粒状三种类型的愈伤组织,其中，白色霜状愈伤组织在适宜的条件下可产生不定芽,生根培养基为1／2MA无激素培养基。     

多变小冠花的组织培养和植株再生

本试验利用未完全展开的多变小冠花(Coronilla varia L.)子叶诱导成愈伤组织,通过体细胞胚胎发生和器官发生两条途径获得了再生植株。愈伤组织在含6-BA 0.5mg/L,KT 0.5mg/L,2,4-D2.0mg/L,CH400mg/L和Gln 225mg/L的MS培养基上培养2—3周后,转移到含6-BA 1.5mg/L,NAA 0.7mg/L,CH 400mg/L,Gln225mg/L的MS培养基上培养4周,再转到6-BA 0.5mg/L,KT 0.5mg/L,椰乳20ml/L,CH 400mg/L和Gln 150mg/L的MS培养基上,5周内形成胚状体。在1/2MS培养基上,胚状体萌发长成植株。愈伤组织在附加6-BA 1.0mg/L,NAA 0.5mg/L,KT 0.5mg/L,CH 400mg/L和Gln 225mg/L的MS培养基上,形成绿色瘤状组织。后者在含6-BA0.7mg/L,NAA 0.2mg/L,椰乳20ml/L,CH 400mg/L和Gln150mg/L的MS培养基上,诱导产生丛状不定芽,不定芽在生根培养基上诱导成完整植株。     

普通油茶体胚再生体系研究

为构建农杆菌介导的油茶遗传转化受体系统,选择普通油茶‘长林'4号、53号和166号的幼胚为外植体材料,进行多因素多水平的组织培养试验。结果表明:培养基的pH对愈伤组织诱导率影响不显著,愈伤组织的诱导率受油茶品种影响极显著; ‘长林'53号的幼胚极易实现胚性愈伤组织诱导和完整植株再生,MS培养基是最佳培养基,2,4-D和TDZ为幼胚较敏感的植物激素,对愈伤组织诱导影响最大; 当MS+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ处理时,‘长林'53号体胚诱导率为98%; MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+500 mg/L CH处理时,‘长林'53号体胚诱导率为89.6%。在不同2,4-D、KT、TDZ和添加物水平的L₉(3⁴)正交试验中,除3个处理外,其他处理组合的‘长林'53号体胚诱导率都达到100%。已分化的胚性愈伤组织在不含任何激素的MS培养基上,可以实现胚状体的萌发、生长及完整植株再生。     

湘西辣椒花药离体培养及其再生植株染色体数目的变异

利用辣椒花药诱导单倍体研究表明：NTH,MS培养基均能诱导产生愈伤组织和胚状体,但NTH培养基比MS培养基培养效果好,以NTH+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.5mg/L+KT 1.2mg/L+AgNO₃ 5.0 mg/L为愈伤组织和胚状体诱导的适宜培养基。通过花药培养获得的辣椒植株中,具有丰富的倍性变异,经染色体计数鉴定,单倍体( n=12 )约14%,二倍体(2n=24 )约46%,四倍体(4n=48 ) 约4%,各种混倍体约36%.     

前胡组织培养和细胞悬浮培养中胚状体发生及植株再生

前胡的种子幼苗切段在含有1mg/l2,4-D的(1/2)MS 固体培养基(大量元素减半)上,诱导产生愈伤组织。诱导两个半月的愈伤组织,在含有1mg/l6-BA+0.5mg/lIBA 或无激素的(1/2)MS 固体培养基上,分化出胚状体,再生成完整植株。愈伤组织在液体培养基中振荡分散及过滤制备成悬浮培养物,在含1mg/l2,4-D的液体培养基中,胚性细胞不断增殖。转移至含有0.05mg/l 2,4-D+0.05mg/l 6-BA 的(1/2)MS 液体培养基中,分化出胚状体,发育成完整植株。     

科间离体嫁接细胞相互作用的电镜观察

番茄愈伤组织和胡萝卜愈伤组织经混合共培养后生长旺盛。仔细挑选嵌合组织转移至含１．０ｍｇ／Ｌ ＢＡ和０．５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ的ＭＳ培养基上继代培养,将嵌合组织转移至含１．０ｍｇ／Ｌ ２,４－Ｄ 和０．５ｍｇ／Ｌ ＢＡ的ＭＳ培养基上培养３、８、２８ｄ时进行电子显微镜观察,结果表明：异质科间细胞相互作用在早期表现为隔离层形成和逐渐变薄解体,随后形成次生胞间连丝和胞间通道,在晚期还观察到相互接触的两种异质细     

四季樱草叶肉原生质体植株再生

以四季樱草为材料，用国产纤维素酶一步法分离叶肉原生质体。用液体浅层静置培养的方法培养原生质体。培养基为Ｂ５基本培养基附加ＺＴ０．５ｍｇ／Ｌ、２，４－Ｄ２ｍｇ／Ｌ和甘露醇０．６５ｍｏｌ／Ｌ。细胞分裂旺盛，培养２天后观察到第一次细胞分裂，１０天后形成小细胞团，１５天左右添加一次新鲜的不含甘露醇的培养液，使渗透压减半。将形成直径为１－２毫米的小愈僵组织转到分化培养基上，再生成完整植株，而后将苗移栽到花盆     

高羊茅高频再生体系的建立

目的建立高频再生体系,为相关基因的转化提供良好的受体系统。方法以高羊茅(Fes-tuca.arundinacea)成熟种子为外植体,以MS为基本培养基,进行高羊茅胚性愈伤组织诱导、继代、分化及生根培养。结果初生愈伤组织在MS 2,4-D5 mg/L CH400 mg/L 蔗糖60 g/L 琼脂12 g/L的继代培养基诱导出体细胞胚后,在含6-BA2.0 mg/L NAA0.5 mg/L的MS培养基上分化形成丛生苗,分化率达78.9%;再生苗在1/2 MS NAA0.5 mg/L生根培养基上生根,生根率达100%。结论MS 2,4-D 9 mg/L为最佳愈伤组织诱导培养基,MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 0.5mg/L为最佳分化培养基,1/2 MS NAA0.5 mg/L为最佳生根培养基。