原生动物四膜虫(TetrahymenaS1)高迁移率非组蛋白的研究

利用原生动物四膜虫(Tetrahymena shanghaiensis S1)作材料,经高氯酸抽提,丙酮沉淀等方法,制备取得高迁移率的非组蛋白。在高分辨率的乙酸一脲电泳图谱上,具有小牛胸腺所具有的典型的全部蛋白带。此外还含有一些未经检测的蛋白带。作者认为这些多余蛋白带可能是四膜虫所特有的高迁移率的非组蛋白。     

高迁移率蛋白HmgB3和组蛋白Mlh1维持了四膜虫小核稳定性

高迁移率族蛋白(High Mobility Group protein,HMG)和组蛋白H1结合染色质DNA,在维持染色质的高级结构、基因组基因表达调控以及DNA修复等方面发挥重要作用。嗜热四膜虫细胞含有一个体细胞系的大核和一个生殖系的小核,小核特异定位的高迁移率蛋白HmgB3或组蛋白Mlh1的缺失并未引起生长期细胞的异常表型。本研究通过同源重组的方法构建了HMGB3和MLH1的双敲除细胞突变株ΔHMGB3ΔMLH1。突变细胞在营养生长期能够正常增殖,但对甲基磺酸甲酯较为敏感。缺对PCR检测发现突变株中小核染色体有缺失现象,并且不能完成有性生殖。有性生殖过程中,减数分裂后的小核异常降解。结果表明高迁移率蛋白HmgB3和小核组蛋白Mlh1共同维持了四膜虫小核的稳定性,并可能具有功能上的冗余性。     

上海四膜虫酚溶性染色质非组蛋白的研究

收集对数生长期的上海四膜虫，分离细胞核，制备染色质并以酚抽提制得酚溶性染以质非组蛋白，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得四膜虫酚溶性染色非组蛋白有六条明显的蛋白带，其表观量为８８ＫＤ，７９ＫＤ，７０ＫＤ，５２ＫＤ，３８ＫＤ，２４ＫＤ，与鼠肝酚溶性染色质非组蛋白具有明显的５条的分子量有显著的差异。     

四膜虫乳酸、乳酸脱氢酶同工酶及培养液溶解氧的研究

原生动物四膜虫 Tetrahymena shanghaiensis Sl 是一种好氧性生物,但是在少氧甚至缺氧的培养液里能够存活而且存活相当长的时间。在不同的生理状态下生长的四膜虫,经测定其培养液中溶解氧的含量是不同的,在四膜虫生长的前对数期时,其培养液里溶解氧已有很大减少,长期保持和衰老期的四膜虫溶液中的溶解氧接近零或非常少;四膜虫乳酸的含量也有差别,长期保持溶液中的四膜虫细胞乳酸含量要比衰老期、对数期都大;四膜虫乳酸脱氢酶同工酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,表明在不同状态下该酶蛋白带有明显差别,主要反映在对数生长期细胞的蛋白带不同于衰老期、长期保持的细胞所具有的蛋白带。     

四膜虫乳酸、乳酸脱氢酶同工酶及培养液溶解氧的研究

原生动物四膜虫 Tetrahymena shanghaiensis Sl 是一种好氧性生物,但是在少氧甚至缺氧的培养液里能够存活而且存活相当长的时间。在不同的生理状态下生长的四膜虫,经测定其培养液中溶解氧的含量是不同的,在四膜虫生长的前对数期时,其培养液里溶解氧已有很大减少,长期保持和衰老期的四膜虫溶液中的溶解氧接近零或非常少;四膜虫乳酸的含量也有差别,长期保持溶液中的四膜虫细胞乳酸含量要比衰老期、对数期都大;四膜虫乳酸脱氢酶同工酶经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,表明在不同状态下该酶蛋白带有明显差别,主要反映在对数生长期细胞的蛋白带不同于衰老期、长期保持的细胞所具有的蛋白带。     

绿草履虫Paramecium bursaria大核染色质组份和组蛋白的研究

绿草履虫P.bursaria是在接有产气杆菌Aerobacter aerogems的无菌稻草提取液中进行克隆培养后取得的。在非离子去污剂NP-40(含有二价阳离子Ca~(2 ),Mg~(2 ))的溶液中裂解细胞,经蔗糖梯度离心分离、提纯细胞大核,并制备染色质,测定其中组蛋白、非组蛋白、DNA和RNA的相对含量。用稀酸抽提绿草履虫大核和大核染色质,得到的酸溶性蛋白(即组蛋白),经PAGE、SDS-PAGE、PAGIF和氨基酸分析等方法测定。得到的结果是:绿草履虫大核染色质中DNA:RNA:组蛋白:非组蛋白=1:0.02:1.30:0.59;组蛋白占染色质蛋白质的68.8％;大核和大核染色质的酸溶性蛋白是相同的,都具有相当于高等动物的全组蛋白的五条组蛋白带,只在其相对含量及电泳迁移率上,与高等动物的全组蛋白略有差别;由16种氨基酸组成,20％是酸性氨基酸,不存在色氨酸和半胱氨酸;五条蛋白带的分子量为1.1000～21000道尔顿,也类似于哺乳动物细胞组蛋白;这是一类碱性很弱的蛋白质,等电点为pH8.02～9.4;碱性氨基酸和酸性氨基酸的比为1.03:1,这一点却更接近酵母全组蛋白。     

绿草履虫Parameciumbursaria大核染色质组份和组蛋白的研究

绿草履虫P.bursaria是在接有产气杆菌Aerobacter aerogenes的无菌稻草提取液中进行克隆培养后取得的.在非离子去污剂NP-40(含有二价阳离子Ca~(2+),Mg~(2+))的溶液中裂解细胞,经蔗糖梯度离心分离、提纯细胞大核,并制备染色质,测定其中组蛋白、非组蛋白、DNA和RNA的相对含量.用稀酸抽提绿草履虫大核和大核染色质,得到的酸溶性蛋白(即组蛋白),经PAGE、SDS-PAGE、PAGIF和氨基酸分析等方法测定.得到的结果是:绿草履虫大核染色质中DNA:RNA∶组蛋白∶非组蛋白=1∶0.02∶1.30∶0.59;组蛋白占染色质蛋白质的68.8%;大核和大核染色质的酸溶性蛋白是相同的,都具有相当于高等动物的全组蛋白的五条组蛋白带,只在其相对含量及电泳迁移率上,与高等动物的全组蛋白略有差别;由16种氨基酸组成,20%是酸性氨基酸,不存在色氨酸和半胱氨酸;五条蛋白带的分子量为11000～21000道尔顿,也类似于哺乳动物细胞组蛋白;这是一类碱性很弱的蛋白质,等电点为pH 8.02～9.4;碱性氨基酸和酸性氨基酸的比为1.03∶1,这一点却更接近酵母全组蛋白.     

细胞自噬与高迁移率族蛋白B-1(HMGB1)介导肿瘤耐药的研究进展

恶性肿瘤可通过多种细胞机制,产生对抗癌药物和放疗的抗性,即所谓耐药现象.细胞自噬是肿瘤细胞耐药的一个重要原因.高迁移率族蛋白B-1(HMGB1)是高度保守的非组蛋白DNA结合蛋白,在DNA结构、基因转录、基因重组、DNA损伤修复以及细胞存活等方面发挥重要的调控作用;HMGB1在细胞内的功能,与其氧化还原状态和细胞定位息...     

HMGA2的结构、功能及调控机制

前言 核小体是染色质的基本单位, 由DNA和核心组蛋白八聚体 (H2A、H2B、H3和H4各两分子)组成,并由不同的蛋白质〔包括组蛋白H1和高迁移率组(HMG)蛋白〕组成高级结构.     

四膜虫在科研上的应用研究进展

1.四膜虫的介绍1.1四膜虫的形态与结构四膜虫为世界性分布,主要产自淡水,也有的生活于咸水或温泉中,已知有10余种。四膜虫的细胞很大,体长40～60微米,成倒卵形或梨形。口位于腹面前方正中,右缘有1个波动膜,左侧有3个围口小膜。体表被以纵纤毛带,口后纤毛带一般为2条。胞肛和2个伸缩泡孔均位于细胞后端。四膜虫细胞类似于动物细胞,因为除了中间纤维外,它具有一切动物细胞的基本结构而缺乏植物细胞的特征结构（叶绿体、液泡、细胞壁）。四膜虫的细胞代谢类型接近高等哺乳类[1,2]。     

热膨胀对固体能带结构的影响

以体心立方结构为例, 利用紧束缚理论, 讨论了热膨胀对固体能带结构的影响, 具体计算了体心立方晶格的1S能带和2S 能带. 结果表明: 随着温度的上升, 热膨胀将使固体的晶格常数发生变化, 使得1S 和2S 的能带中心和能带动边缘产生移动, 从而对各能带的宽度和两带之间的禁带宽度都产生影响. 所得结论能较好地说明锂金属的部分实验结果.     

烯效唑对水稻苗期过氧化物酶活性及同功酶的影响

用不同浓度的烯效唑乳剂和可湿性粉剂分别对水稻浸种,研究其对苗期过氧化物酶活性及同功酶的影响．结果表明,烯效唑两种剂型均可使过氧化物酶活性增强,且乳剂的作用效果大于可湿性粉剂．其同功酶谱带增强,且增加了F1、F2及A1三条新谱带。     

5种蟋蟀的RAPD研究初报(直翅目:蟋蟀总科)

应用RAPD技术对5种蟋蟀的基因组DNA进行扩增，从10种随机引物中筛选出一种引S8可以对5个种扩增出稳定且相异的DNA图谱，每个种的DNA扩增条带的相对分子质量为：长颚斗蟋V.aspersus S8-1900,1510,1320,830,740,370；小斗蟋V.parvus S8-1900,1150,830,600,350；石首棺头蟋L.equestris S8-1900,960,560，多伊棺头蟋，L.doenitzi S8-1900,800；黄脸油葫芦T.emma S8-1490,1290,1180。结果表明，引物S8可用于5种蟋蟀的分类鉴定。     

不同S180细胞株蛋白质特性的电泳及免疫组化法比较研究

用ＳＤＳ聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）和免疫组化染色方法，比较研究４个不同单位保种的小鼠肉瘤（Ｓ１８０）细胞蛋白质的表达。电泳结果显示，北京市肿瘤研究所仲种的Ｓ１８０蛋白质条带数最多，武汉大学保种中心的Ｓ１８０最小。免疫组化染色法测定四个单位Ｓ１８０细胞的Ｒａｆ－１、Ｔｒｋ、Ｇａｉ、Ｇａｏ和ＮＦＫｂＰ６５蛋白表达，Ｇａｉ、ＴｒｋＡ和Ｒａｆ－１阳性率均低于０．２％；Ｇａｏ阳性率均低于４．２％     

优质红锥种源遗传多样性的RAPD分析

采用从100个随机引物中筛选出的30个有效引物，利用RAPD技术对不同地区的10个不同生态型优质红锥种源进行遗传多样性研究．结果表明：（1）30个有效引物共扩增出290条清晰谱带，平均每个引物扩增出9．67条带．多态性条带为254条，比率为87．59％；（2）10个不同生态型红锥之间的遗传相似系数介于0．5946～0．7148之间，但不同地区红锥也存在着一定的遗传差异（遗传差异在0．2852～0.4054）；（3）用引物S3扩增出的带谱可在一次实验中区别10种不同生态地区的优质红锥，同时S3也可作为10种优质红锥材料的指纹图谱，鉴定优质红锥的种源；（4）聚类分析表明，10种优质红锥种源可聚成3个独立的类群．本文作者对它们的亲缘关系进行了推测．     

16S rRNA基因的PCR-DGGE技术分析茶尺蠖幼虫肠道细菌种群结构及多样性

利用16S rRNA的PCR-DGGE（变性梯度凝胶电泳）技术分析研究了茶尺蠖肠道内细菌的种类与多样性.通过对16S rRNA序列分析,从茶尺蠖野外种群肠适中鉴定了11种细菌,这些细菌分属于沃尔巴克氏菌（Wolbachia）、肠杆菌属（Enterobacter）、沙雷氏菌属（Serratia）、梭菌属（Clostridium）、肠球菌属（Enterococcus）、暂定类群EO1;其中以肠杆菌、沃尔巴克氏菌、沙雷氏菌属最为常见.另外,也鉴定了一种茶树叶绿体上的16SrRNA基因.茶尺蠖幼虫体内的共生菌多样性分析结果,将会为害虫综合治理提供一条全新的探索途径.     

甘蓝型杂交油菜"蜀杂9号"种子纯度的RAPD鉴定

通过50个随机引物对“蜀杂9号”亲本进行RAPD扩增,选出了两个能在父、母本间产生多态性扩增的随机引物S18和S31,在杂种F,代中验证了它们的特异性和稳定性,证明随机引物S18和S31能分别在F1代中稳定扩增出父本和母本的特异标记片段S18750与S31550．对该引物的RAPD-PCR的反应体系优化后,对“蜀杂9号”父、母本和杂种F1代的单株进行了随机检测,结果表明这两个RAPD标记配合使用能稳定可靠地鉴定甘蓝型杂交油菜“蜀杂9号”种子的纯度．     

鲇鱼和黄颡鱼染色体高分辨G-带带型研究

本文用鱼类染色体高分辨G-显带方法首次对鲇鱼和黄颡鱼染色体高分辨G-带核型和带型进行了研究.两种鱼的核型结果在分组式、随体和次缢痕位置等方面均与前人有较大的不同.通过带型分析,发现了异型的性染色体(暂定为XX-XY型)以及具有带纹结构的巨大随体,并对它们进行了讨论.     

缙云山特有植物缙云黄芩的等位酶变异研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳检测了重庆缙云山特有植物缙云黄芩 (ScutellariatsinyunensisC Y WuetS chow) 7个居群 70个个体的过氧化物酶 (POD)、细胞色素氧化酶 (CYT)、超氧化物歧化酶 (SOD)、淀粉酶 (AMY)和酯酶 (ES) 5种等位酶谱带的变异式样 .并将所得酶谱带进行编码 ,然后分别用Jaccard和Sokal Michener结合系数结合不加权组平均法 (UPGMA)进行聚类 .7个居群等位酶谱带分布表明 ,只有 15 5 6 %的等位酶谱带在所有个体中是恒定的 ,其余 84 44 %的等位酶谱带在个体间显示出或多或少的变异 .在居群水平上 ,也只有 2 2 2 2 %的等位酶谱带是恒定的 ,77 78%的等位酶谱带存在有分化 .聚类分析结果表明缙云黄芩同一居群的个体间在等位酶谱带上表现出很大的相似性 ,即居群内个体间表现出较大的遗传同质性 ;而来源于不同居群的个体酶谱则表现出明显的趋异性 ,显示出缙云黄芩不同居群之间发生了较明显的遗传分化