芦荟超氧化物歧化酶同工酶Ⅱ的分离纯化及部分性质

从芦荟叶中提取的SOD溶液，通过丙酮沉淀、热变性、DEAE-琼脂糖柱层析、Sephacryl S-9200凝胶过滤，获得芦荟超氧化物歧化酶同工酶Ⅱ电泳纯产品．该同工酶经凝胶过滤测定全分子量为35kD及SDS-PAGA测得亚基分子量为17kD，由2个亚基组成．经等电点聚焦电泳测得该SOD的等电点为pH7．6．     

3种芦荟多糖体外抗肿瘤作用的比较研究

比较研究了3种芦荟多糖的体外抗肿瘤药效.采用体外培养法培养细胞,MTT比色法观察3种芦荟多糖在7个质量浓度下对Hela、K562和A973细胞株的体外直接作用.结果,随着芦荟多糖质量浓度的增加,对3种肿瘤细胞的抑制作用不断增强.经计算,对于Hela、K562和A9733种人体肿瘤细胞,库拉索芦荟多糖的IC50分别为183 40、170 26和151 12Qg/mL;木立芦荟多糖的IC50分别为191 18、125 44和49 01欤?mL;中国芦荟多糖的IC50分别为78 79、138 02和114 48欤?mL,均高于10嚕?mL.倒置显微镜下观察发现,除200、400嚕?mL两剂量外,给药后各孔细胞形态良好,与空白对照组比较无明显变化.以上结果提示3种芦荟多糖对上述3种瘤细胞直接作用较弱.     

香菇多糖的提取及结构分析

目的:找到一种操作简单、结果准确的香菇多糖提取及分子量测定的方法。方法:用水煮醇沉法提取香菇多糖,用蒽酮-硫酸法在621nm波长下,测定吸光度值计算糖含量,通过Sephadex-LH20柱,分离得到分子量范围不同的三段组分,GPC测定分子量范围。结果:蒽酮-硫酸法测定得到香菇多糖的糖含量为52.3%,经GPC测定三段组分分子量范围分别为27w、1w、300D。结论:结果表明,水煮醇沉法提取香菇多糖操作简单,柱分离纯化后,GPC测定分子量结果准确。     

香菇多糖的提取及结构分析

目的：找到一种操作简单、结果准确的香菇多糖提取及分子量测定的方法。方法：用水煮醇沉法提取香菇多糖,用蒽酮-硫酸法在621nm波长下,测定吸光度值计算糖含量,通过Sephadex-LH20柱,分离得到分子量范围不同的三段组分,GPC测定分子量范围。结果：蒽酮-硫酸法测定得到香菇多糖的糖含量为52.3%,经GPC测定三段组分分子量范围分别为27w、1w、300D。结论：结果表明,水煮醇沉法提取香菇多糖操作简单,柱分离纯化后,GPC测定分子量结果准确。     

春砂仁多糖的提取及组分分析

报道春砂仁多糖的分离纯化及结构分析的研究.以凝胶过滤色谱法测定春砂仁多糖的数量及分子量,结果显示:春砂仁主要含两种多糖,其数均分子量分别为56 421及1 743;多糖经酸解成为单糖并衍生为乙酰化的糖肟,对照标样采用气相色谱法测定其单糖组分为阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖,4种单糖含量的相对比例:1.00∶0.68∶0.97∶0.86.     

虫草菌多糖的部分理化性质研究

固体发酵虫草菌拟青霉(Paecilomycesmilitaris),分离提纯得糖含量为56%的虫草菌多糖,经薄层层析、气相色谱分析组成单糖分别为:阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,物质的量的比为1∶2∶1∶3∶3,与有关文献报道的均有不同.经SephadexG-75凝胶柱分离纯化得糖含量为72%的主峰和一小峰2组分;用Sepharose4B凝胶柱测定分子量分别为57000和40000.     

化妆品植物物质含量比较研究

采用不同的方法对不同类型的仙人掌和芦荟进行7种成分的测定、分析、比较、研究,结果认为：仙人掌变态茎的表皮中,物质含量丰富,茎肉是低蛋白食材;芦荟叶肉中活性物质含量多,而且部位专一;仙人掌和芦荟均为嫩茎、叶器官中各物质含量高;可食仙人掌SOD活性、蛋白质、叶绿素、可溶性糖、总糖含量高,多存在于表皮中;可食芦荟VC、还原糖...     

芦荟对运动训练小鼠脑组织自由基代谢的影响

研究了芦荟对运动训练小鼠脑组织产生的自由基清除效果和保护作用。通过测定小鼠游泳至力竭时间和在安静状态、运动后即刻组和24h恢复组内脑组织中SOD活性、MDA含量和总抗氧化能力，评估了芦荟的抗氧化效果和对脑组织损伤的保护作用．结果表明，在三种不同状态下，芦荟组和对照组比较，SOD活性和总抗氧化能力均有不同程度的升高，MDA含量有所下降，且大部分差异显著。表明芦荟具有较强的清除自由基、抗氧化的效果，可作为一种运动保健食品开发利用．     

人超氧化物歧化酶-过氧化氢酶融合基因的构建、表达及其产物的初步纯化和性质研究

尝试应用基因工程技术制备一种兼具人超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性的双功能融合蛋白CAT-PTD-SOD,其中的PTD是序列为RKKRRQRRR的短肽.首先通过重叠PCR构筑CAT-PTD-SOD融合基因,然后把该基因转化进入大肠杆菌表达菌株Rosetta 2(DE3)菌株.通过SDS-PAGE、CAT和SOD活性分析以及分离纯化组分的分析确认该重组菌株能够表达CAT-PTD-SOD,其表达量可达总蛋白的8.9%,SDS-PAGE显示其分子量约为85 kD.可溶性实验发现该融合蛋白大部分以兼具SOD和CAT活性的可溶形式存在.抗H2O2能力实验表明CAT-PTD-SOD具有很好的抗H2O2能力,在0.033 mol.L-1、甚至0.067 mol.L-1的H2O2溶液中,其SOD活性20 min内无明显下降.     

芦荟冷冻粉中多糖和甙和纯化、分离和鉴定

以费拉芦荟生产的 10 0∶1全叶芦荟冷冻干燥粉为材料 ,用高速逆流色谱和制备色谱从中分离出 3种芦荟多糖和 1种芦荟甙 ,并用色谱、光谱定性 .多糖纯度达到定量和鉴别用芦荟多糖对照品的要求 ,芦荟甙的纯度达w =97.93% .     

用正交设计法筛选中华芦荟丛生芽诱导的最优培养基

用正交设计法考察了不同浓度的６－苄基腺嘌呤（６－ＢＡ）、萘乙酸（ＮＡＡ）和蔗糖对中华芦荟丛生芽诱导的影响,方差分析结果显示：糖对中华芦荟丛生芽诱导的影响最大,其次是６－ＢＡ,而ＮＡＡ影响最小。筛选出中华芦荟丛生芽诱导的最佳培养为ＭＳ＋２．０ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ＋０．３ｍｇ／ＬＮＡＡ＋３０ｇ／Ｌ蔗糖。     

模拟酸雨对小黑杨幼苗生长和光合特性的影响

目的 研究小黑杨(Populus simonii × P. nigra)幼苗生长、生理特性和叶片光系统Ⅱ(PSⅡ)活性对酸雨胁迫的响应情况,为其在酸雨沉降日趋频发的北方地区栽植提供参考。方法 以小黑杨为研究材料,对其连续喷施不同酸度[pH为2.5、4.5和7.0(CK)]的模拟酸雨,待小黑杨叶片出现明显病症时,测定其生长、叶片超微结构、抗氧化酶和光系统Ⅱ活性指标。结果 与对照相比,pH 4.5的模拟酸雨处理下小黑杨株高、茎粗、叶片数和叶面积显著增加;叶片颜色变浅绿色,但叶绿体结构紧凑,类囊体排列规则,未见淀粉粒,嗜锇滴数量略增多。而pH 2.5模拟酸雨处理的小黑杨幼苗茎粗和叶面积显著降低;叶片颜色变黄、叶尖和叶脉出现明显斑点,且细胞膜局部破损,叶绿体体积增大,类囊体间隙增大,可见少量淀粉粒,嗜锇滴数量和体积明显增加。模拟酸雨处理的小黑杨叶片中超氧阴离子 {\mathrm{O}}_2^{\stackrel{-}{\underset{·}{\mathrm{}}}}产生速率、过氧化氢(H₂O₂)含量和过氧化氢酶活性较CK显著增加,且酸度越大,增幅越大;而过氧化物酶活性和超氧化物歧化酶活性随酸度的增大表现为先升后降。其中,pH 2.5模拟酸雨处理杨树叶片的可变荧光强度(V_L、V_K、V_J、V_I)和诱导曲线初始斜率(M_O)显著高于CK,但叶绿素荧光曲线面积(Fix Area)和质体醌库的大小(S_m)显著低于CK。pH 4.5模拟酸雨处理中,仅V_L和V_K显著高于CK,而其他荧光参数与CK差异不显著。结论 酸雨对小黑杨生长的影响主要取决于其pH,pH 2.5模拟酸雨处理抑制小黑杨生长,并且叶片出现坏死斑点症状时,叶绿体结构异常,类囊体排列不规整,光系统Ⅱ电子传递受到抑制;而pH 4.5模拟酸雨处理促进小黑杨生长、叶片超微结构表现正常,小黑杨幼苗对pH 4.5酸雨沉降具有一定抗性。     

基于SSR标记的丛生竹杂种鉴定、遗传分析和指纹图谱构建

[目的]准确鉴定丛生竹杂交种,分析杂种及其亲本的遗传关系,开发可以利用的指纹图谱.[方法]以孝顺竹(Bambusa multiplex)×麻竹(Dendrocalamus latiflorus)、孝顺竹(B.multiplex)×粉单竹(B.chungii)两个杂交群体为材料,从已公布的竹子SSR引物中随机选取30对引...     

甲醛对芦荟POD酶活性的影响

实验以玻璃箱模拟室内空间环境,应用乙酰丙酮分光光度法和邻苯三酚自氧化法测定在不同甲醛含量下芦荟对甲醛的吸收及其体内过氧化物酶(POD)活性的变化情况.结果表明,有芦荟存在时甲醛气体含量显著下降,芦荟体内的POD酶活性增强;随着通入甲醛气体量的增加,芦荟对甲醛的吸收量显著增加,POD活性的提高也越来越显著.说明芦荟体内POD酶对甲醛气体的胁迫存在着一定程度的生理应激反应.     

芦荟凝集素提取及促免疫活性功能初步研究

分别从3种有经济价值的芦荟品种,即中华芦荟（Aloe vera .ver.chinensis(Haw））,库拉索芦荟（Aloe barbadensis Mill)和木立芦荟（Aloe arborescens Mill)中采用凝胶层析法提取了3种凝集素,Lecl,Lec2和Lec3,经过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析其为单一成分的糖蛋白,比较了3种凝集素的糖和蛋白的含量,得出库拉索芦荟凝集素Lec2糖含量最高,木立芦荟凝集素Lec3蛋白含量最高,免疫学实验证明,库拉索芦荟凝集素的凝集效价最高,其次为木立芦荟,中华芦荟,3种凝集素对淋巴细胞转化功能都有明显的促进作用,其中库拉索芦荟凝集素Lec2的促淋巴细胞转化率最高,因此芦荟凝集素在治疗免疫功能低下方面可能有一定的应用价值。     

人类超氧化物歧化酶在酿酒酵母系统中的高效表达

超氧化物歧化酶(SOD)是一种在生物界广泛存在的抗氧化酶,在抗衰老、抗肿瘤、抗免疫疾病和电磁辐射上都起着重要的作用．对一从人类胎肝cDNA文库中筛到的SOD基因片段进行重组、克隆,并得到带有启动子PADHZ—GAPDH和终止子TADHI的高效稳定的酿酒酵母表达载体pHC11-hSOD．转化酿酒酵母DCO4后获得工程菌DCO4／pHC11-hSOD．表达产物经破壁后SDS-PAGE电泳检测为20ku的条带;酶活性测定结果表明发酵液有40万U／L的hSOD活性．此外,还研究了工程菌的发酵条件和hSOD产物的纯化方法．纯化产物在SDS-PAGE上和Superdex分子筛检测显示,所得产物的纯度已达95％以上．     

PEG 6 000胁迫条件下华北八宝愈伤组织中抗氧化酶活性的变化

以华北八宝Hylotelephium tatarinowii(Maxim.)H. Ohba愈伤组织为材料,采用不同质量分数的聚乙二醇(PEG)6 000进行胁迫处理,分别测定愈伤组织中过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性变化,通过非变性聚丙烯凝胶电泳分析POD、SOD和酯酶(EST)的同工酶表达特征.研究结果表明,在PEG 6 000质量分数为0.5%~5.0%时,随着质量分数的增加和胁迫时间的延长,POD、SOD和CAT的活性逐渐增强,且愈伤组织生长良好;当PEG 6 000质量分数为8.0%时,随着胁迫时间的延长,POD、SOD和CAT酶活性急剧下降.     

Quantitative trait loci （QTLs） for quality traits related to protein and starch in wheat

Quality traits in wheat （Triticum aestirum L.） were studied by quantitative trait locus （QTL） analysis in a recombinant inbred line （RIL） population, a set of 131 lines derived from Chuan 35050 × Shannong 483 cross （ChSh）. Grains from RILs were assayed for 21 quality traits related to protein and starch. A total of 35 putative QTLs for 19 traits with a single QTL explaining 7.99-40.52% of phenotypic variations were detected on 10 chromosomes, 1D, 2A, 2D, 3B, 3D, 5A, 6A, 6B, 6D, and 7B. The additive effects of 30 QTLs were positive, contributed by Chuan 35050, the remaining 5 QTLs were negative with the additive effect contributed by Shannong 483. For protein traits, 15 QTLs were obtained and most of them were located on chromosomes 1 D, 3B and 6D, while 20 QTLs for starch traits were detected and most of them were located on chromosomes 3D, 6B and 7B. Only 7 QTLs for protein and starch traits were co-located in three regions on chromosomes 1D, 2A and 2D. These protein and starch trait QTLs showed a distinct distribution pattern in certain regions and chromosomes. Twenty-two QTLs were clustered in 6 regions of 5 chromosomes. Two QTL clusters for protein traits were located on chromosomes 1D and 3B, respectively, three clusters for starch traits on chromosomes 3D, 6B and 7B, and one cluster including protein and starch traits on chromosome 1D.     

中华芦荟成熟叶组织培养的研究

以中华芦荟成熟叶为外植体,接种于9组不同2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄基腺嘌呤(6-BA)浓度配比的脱分化培养基中,诱导外植体的脱分化形成愈伤组织。研究表明,中华芦荟叶愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+1.0g/L活性炭;诱导不定芽的适宜培养基为MS+1mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.7g/L活性炭;及诱导生根的适宜培养基为1/2MS+0.2mg/Lα-萘乙酸(NAA)+20g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.5g/L活性炭,生根率达100%.     

Identification of sex pheromones of four economically important species in genusDendrolimus

The female-produced sex pheromone of Dendrolimus superans was identified by gas chromatography (GC), coupled GC-mass spectrometry (GC-MS), electroantennographic (EAG) studies and field tests as a blend of (Z,E)-5,7-dodecadienal (Z5,E7-12:Ald) and (Z,E)-5,7-dodeca- dien-1-ol (Z5,E7-12:OH). In D. kikuchii, (Z,E)-5,7-dodeca- dien-1-yl acetate (Z5,E7-12:OAc) and Z5,E7-12:OH were found by GC and GC-MS analyses. However, in EAG studies male antennae were more sensitive to Z5,E7-12:OAc and (Z,E)-5,7-dodecadien-1-yl propionate (Z5,E7-12:OPr) than Z5,E7-12:OH. For D. spectabilis, Z5,E7-12:OH had been previously reported as the sex pheromone. However, in our studies, traps baited with Z5,E7-12:OH, Z5,E7-12:OAc and Z5,E7-12:OPr in a ratio of 1:1:1 caught three times more males than those baited with Z5,E7-12:OH alone. Relatively strong EAG responses were elicited from male antennae by Z5,E7-12:OH, Z5,E7-12:OAc and Z5,E7-12:OPr, but in addition to Z5,E7-12:OH, only very small amounts of Z5,E7- 12:OAc was found in the pheromone gland. These facts suggest that Z5,E7-12:OAc is a pheromone minor components and Z5,E7-12:OPr is a sex attractant in D. spectabilis. For D. tabulaeformis, Z5,E7-12:OH, Z5,E7-12:OAc and Z5,E7-12: OPr were found in extracts of pheromone glands of female moths, and the three compounds elicited strong EAG responses from antennae of male moths. These three compounds have been reported as a sex attractant of D. tabulaeformis, and our data confirm their roles as components of the sex pheromone of this species. The role of blend components in antagonizing cross attraction between congeners is discussed.