异丙酚对大鼠内毒素脑损伤STAT3表达的影响

目的 研究异丙酚对大鼠内毒素脑损伤中信号转导子与转录激活子-3( STAT3)表达的影响,探讨异丙酚在脑损伤中的保护作用及其机制.方法 健康清洁级SD大鼠72只,雌雄不限,体重220～ 250 g,随机分为3组(n=24):L组(内毒素组)和LP组(内毒素+异丙酚组)经颈内动脉注射内毒素200 μg建立大鼠内毒素脑损伤模型,C组(对照组)经颈内动脉注射等量生理盐水,LP组颈内动脉注射内毒素后即予异丙酚100 mg/kg剂量腹腔注射.3组分别于6、12、24和48h随机处死6只大鼠,取额叶皮质,检测脑组织含水量,免疫组织化学检测P-STAT3、NF-κB和iNOS表达水平的变化,Western blot法检测大鼠内毒素脑损伤后P-STAT3蛋白表达水平的变化.结果 与C组相比,L组、LP组各时间点脑组织含水量、P-STAT3、NF-κB和iNOS表达增加(P ＜0.05,P＜0.01);与L组比较,LP组各时间点脑含水量、P-STAT3、NF-κB和iNOS表达明显减少(P＜0.05,P＜0.01).结论 异丙酚可减轻大鼠内毒素性脑损伤,机制可能与抑制脑组织磷酸化STAT3、NF-κB和iNOS表达水平上调,进而减轻炎性反应有关.     

三叉神经慢性缩窄环术大鼠半月节射频热凝的实验研究

目的观察三叉神经慢性缩窄环术大鼠半月节射频热凝的大体及镜下改变,探讨射频热凝温度和时间与半月神经节损伤的关系。方法36只成年雄性SD大鼠,随机选取33只建立慢性缩窄性损伤三叉神经痛模型。建模成功2周后,随机分为3组：射频热凝组（R组,n=24）,假手术纽（S组,n=6）,热凝对照纽（C组,n=3）。经中颅窝开颅暴露半月神经节,R组行半月节穿刺热凝,根据温度、时间随机分为8个小组,每组3只,分别为：65℃120″、180″组,70℃120″、180″组,75℃120″、180″组,80℃120″、180″组。S组仅行半月节穿刺不热凝,按留针时间分为120″、180″两组;C组不行半月神经节穿刺及热凝。余3只SD大鼠作为正常对照组（N组）。R组及S组热凝或穿刺结束即取出大鼠半月神经节,C组、N组直接取出半月神经节,观察半月神经节大体变化,游标卡尺测量神经节毁损区直径,光镜下观察神经节细胞的变化。结果S组、C组与N组比较,大鼠半月神经节大体及光镜下均无明显变化。R组在65℃时大鼠半月节大体及镜下无明显损伤;70℃时开始在肉眼及镜下出现损伤;75℃、80℃时半月节则出现明显凝固区,毁损区直径测量较70℃组明显增大（P〈0．01）,光镜下神经元细胞核出现不同程度的固缩改变。毁损温度越高、时间越长,损伤范围越大,程度越重。结论75℃、80℃射频热凝可导致神经节细胞明显变性,损伤程度及范围随温度升高、时间延长逐渐加重与增大。     

成年大鼠脊髓损伤后内源性神经前体细胞的增殖与分化规律的研究

目的观察成年大鼠脊髓损伤后内源性神经前体细胞的增殖与分化,探讨内源性神经前体细胞的自然变化规律。方法制作脊髓压迫损伤模型,Brdu腹腔注射标记神经前体细胞,免疫荧光法(Immunofluoreseence)检测大鼠脊髓Brdu、GFAP、MBP阳性细胞数的变化。结果 1)正常组可观察到少量Brdu阳性细胞,脊髓损伤后Brdu阳性细胞显著增加(p0.05),并在第7天达到最大值,21天时仍高水平表达。2)正常组可见少量Brdu/GFAP和Brdu/MBP阳性细胞,脊髓损伤后Brdu/GFAP,Brdu/MBP双标阳性细胞数显著增加(p0.05)。结论脊髓损伤后神经前体细胞的数量在第7天达到最大值,我们认为,一周内可能是神经前体细胞增殖分化调控的关键时期。此外,新生星形胶质细胞和少突胶质细胞大量增殖,并与神经前体细胞的迁移、后肢功能恢复表现出一定的同步性,提示新生胶质细胞可能参与了脊髓损伤后神经功能的修复作用。     

Fe^3＋对脆杆藻增殖的影响

采用AGP实验的方法,研究了Fe3 的不同质量浓度对脆杆藻(Fragilaria sp.)细胞增殖的影响.对光密度值和叶绿素a的测定结果显示:Fe3浓度<50 μg/L,脆杆藻的细胞增殖受到抑制.Fe3浓度在50～500μg/L之间时,脆杆藻的细胞增殖明显.Fe3浓度达到1000μg/L时,实验前6 d,细胞密度基本无增长,在7～14 d脆杆藻已适应该浓度,细胞进行分裂,密度增长.第15 d后细胞分裂又处于停止状态.说明Fe3浓度>1000μg/L对脆杆藻细胞的代谢、分裂产生了一定程度的抑制作用.适宜的铁浓度对水体富营养化有促进作用.     

盐酸戊乙奎醚对大鼠感染性脑水肿AQP4表达的影响

目的：研究盐酸戊乙奎醚对感染性脑水肿保护作用的机制。方法：采用左颈内动脉注射脂多糖复制大鼠感染性脑水肿模型,将84只雄性SD大鼠随机分为对照组（C组）、水肿组（I组）、盐酸戊乙奎醚治疗组（P组）。检测6h、12h、24h、48h时各组大鼠脑组织含水量、病理形态;脑组织SOD活性、MDA含量;免疫组化法及RT—PCR法检测AQP4蛋白分布与AQP4mRNA含量。结果：（1）与C组相比,I组、P组脑含水量、MDA含量均升高,同时SOD活性、AQP4蛋白、AQP4mRNA表达均减少（P〈0．01）。与对应时间点P组相比,I组脑含水量、MDA含量均升高,同时SOD活性、AQP4蛋白、AQP4mRNA表达均减少,于24h达高峰,48h仍在较高水平（P〈0．01）。（2）脑组织光镜检查：I组大鼠脑组织损伤严重,P组损伤明显减轻。结论：盐酸戊乙奎醚能在一定程度上可减轻感染所致的脑组织损伤,上调AQP4表达,对脑水肿有一定治疗作用,其机制可能与抗氧化作用有关。     

依那普利对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖及分泌TGF-1β、LN的影响

目的 观察依那普利（Ena）对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞（GMCs）增殖及分泌转化生长因子-β1（TGF-β1）和层粘连蛋白（LN）的影响.方法 大鼠GMCs分别培养于正常浓度葡萄糖（NG,5.5mmol/L）、高浓度葡萄糖（HG,20mmol/L）及高糖和不同浓度（10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L）的Ena中,同时设空白对照.分别采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法和酶联免疫吸附试验（ELISA）、放射免疫法（RIA）检测不同时间（24 h、48 h、72 h）GMCs增殖情况和细胞培养上清液中TGF-β1、LN的含量.结果 与空白对照组比较,正常糖组和高糖组GMCs增殖增加,TGF-β1、LN分泌增多（P〈0.001）,高糖组更明显（P〈0.001）.与高糖组比较,高、中、低浓度的Ena干预均可逆转上述变化.且在一定浓度范围内,Ena无明显细胞毒性.结论 高糖可致GMCs增殖和TGF-β1、LN分泌增多,Ena可抑制高糖诱导的GMCs增殖与分泌TGF-β1、LN,这可能是其减少细胞外基质（ECM）积聚的机理之一,并有利于延缓糖尿病肾病肾小球硬化（GS）的进展.     

胃转流术对2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激及蛋白激酶C活性的影响

目的观察胃转流术对2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激及蛋白激酶C(PKC)活性的影响。方法40只SD大鼠随机分为正常对照组(8只),糖尿病模型组(32只),模型组注射STZ(35 mg/kg),血糖稳定后确定成模30只,再将其分为糖尿病对照组(8只),假手术组(8只),手术组(14只)。术后8周检测各组大鼠空腹血糖、肾重指数(肾重/体重)、尿素氮(BuN)、血肌酐(Cr),测定各组大鼠肾组织总超氧化物歧化酶(TSOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSHPX)活性,脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)含量及PKC的活性,HE染色观察肾组织病理变化。结果与糖尿病对照组和假手术组相比,手术组能明显降低空腹血糖、改善肾重指数、BUN、Cr等指标(P0.05),同时肾组织抗氧化酶TSOD、GSH-PX活性增强,MDA含量减少,肾脏PKC活性降低(PO.05)。HE染色显示手术组病变也明显轻于糖尿病对照组和假手术组。结论胃转流术可能通过抑制2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激及PKC活性增强发挥肾脏保护作用。     

腹腔置管引流对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的作用及机制研究

目的探讨腹腔置管引流对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的作用及相关机制。方法 30只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(仅行开腹手术)、SAP组(5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射诱导SAP模型)、APD组(SAP模型基础上行APD干预),每组10只。3组大鼠分别于造模后24h取材,光镜观察胰腺及肺组织病理学变化并评分;检测血液及腹水中淀粉酶、TNF-α、IL-1β含量;取肺组织检测其中TNF-α、IL-1β、NF-κB含量;免疫组化及western blotting检测肺组织中HMGB1蛋白表达情况。结果假手术组大鼠无腹水产生,而SAP组有腹水产生;与假手术组相比,SAP组、APD组血清中的淀粉酶、TNF-α、IL-1β含量明显升高(p0.05);两组肺组织中MPO、MDA、TNF-α、IL-1β、NF-κB含量也明显较假手术组升高(p0.05);免疫组化及western blotting也观察到两组肺组织中HMGB1蛋白表达明显高于假手术组(p0.05);镜下见以上两组胰腺及肺组织损伤程度也较假手术组明显(p0.05)。而与SAP组相比,APD治疗组上述指标均明显降低(p0.05)。结论 APD可通过引流出含大量有害物质的腹水,降低SAP大鼠血液中的炎症水平,减少肺组织中炎症介质的表达,从而减轻SAP大鼠肺损伤。     

早期腹腔置管引流对急性坏死性胰腺炎大鼠血清TXA2及PGI2的影响

目的研究早期腹腔置管引流对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠血清TXA2及PGI2的影响。方法 36只SD大鼠随机分为对照组(SHAM组)、模型组(ANP组)、早期腹腔置管引流组(APD组),每组12只,于24小时后处死,比较各组大鼠腹腔内大体改变,HE染色观察胰腺病理改变并评分,测定大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1介(IL-1β)、血栓素A2(TXA2)及前列环素(PGI2)水平,并计算TXA2/PGI2值。结果 ANP组、APD组与SHAM组比较,胰腺组织病理学评分、血清TNF-α、IL-1β、TXA2、PGI2水平及TXA2/PGI2值均显著升高(P0.05);与ANP组比较,APD组的胰腺组织病理学评分、血清TNF-α、IL-1β、TXA2、PGI2水平及TXA2/PGI2值均显著降低(P0.05)。结论早期腹腔置管引流能有效改善ANP大鼠模型血清中血管活性物质的平衡失调,并减轻胰腺损伤程度和全身炎症水平。     

大鼠骨髓内皮祖细胞分离与体外培养条件研究

目的 探讨大鼠骨髓单个核细胞的最佳分离方法,观察不同培养条件对内皮祖细胞的生长情况、抗原表达的影响.方法 健康SD大鼠水合氯醛麻醉后断尾放血,从其骨髓中分离单个核细胞,重悬于添加不同条件培养基中,分别在预涂或未涂FN的培养瓶中进行培养,记录细胞贴壁情况、集落生成时间和数量及细胞特异性抗原的表达.结果VEGF诱导是内皮祖细胞生长分化的必需条件,在2～10 ng/mL之间,浓度越高,其对骨髓单个核细胞诱导分化的能力越强;bFGF能够协同VEGF诱导分化的作用;纤连蛋白能够明显促进骨髓单个核细胞贴壁.贴壁细胞均表迭内皮祖细胞和内皮细胞的特异性标志,各组之间没有明显差异.结论 大鼠骨髓中单个核细胞可以诱导分化为内皮祖细胞,VEGF(10 ng/mL)、bFGF(4 ng/mL)和纤连蛋白组合更有利于内皮祖细胞的增殖分化.