蔗糖浓度和外源2,4-D与KT浓度对三七幼叶细胞悬浮培养影响的研究

将云南文山三七幼叶诱导出愈伤组织,并采用悬浮震荡培养三七细胞.细胞培养基质中的碳源浓度和激素浓度对培养细胞生长的影响进行研究,实验结果显示:MS+1.5 mg/L2,4-D+1.0 mg/L KT+28 g/L蔗糖,pH为5.8的培养基最适合文山三七幼叶诱导得到的愈伤组织细胞悬浮的培养.     

茉莉酸甲酯,蔗糖和氮源对蒙古黄芪愈伤组织生长和黄酮含量的影响

采用单因素和正交试验研究了氮源、蔗糖浓度和诱导子茉莉酸甲酯对蒙古黄芪愈伤组织生长和黄酮类物质积累的影响.结果表明:各因子影响黄酮积累量依次为:茉莉酸甲酯＞蔗糖＞水解酪蛋白＞氮源;蒙古黄芪愈伤组织生长和黄酮含量积累的最佳培养基组合为:MS+NAA 1.0 mg/L+ 6-BA 2.0 mg/L+2,4-D1.0 mg/L+蔗糖50.0 g/L+水解酪蛋白1.0g/L+ MeJA0.02 μmol/L,NH4+∶ NO3-为1∶1.在这种条件下,黄酮产量达到最高为9.78mg/L.     

百合细胞悬浮体系构建及多糖含量测定的探索

该文旨在研究百合悬浮体系构建及诱导百合多糖产生的最佳培养方案。首先采用不同取材部位及激素组合来诱导百合愈伤组织形成,将其扩繁进而构建起百合细胞悬浮体系;然后使用不同激素处理来诱导其产生次生代谢产物百合多糖,并通过苯酚硫酸法测定多糖含量。结果发现,百合愈伤组织诱导的最佳取材部位为叶柄,最佳激素配比为6-BA 0.5 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;百合悬浮细胞培养及诱导百合多糖产生的最佳激素配方为6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.2mg/L,其多糖含量可达到3.8%。该项目可以用于指导百合细胞悬浮体系构建及百合多糖的生产等方面的研究。     

中华芦荟成熟叶组织培养的研究

以中华芦荟成熟叶为外植体,接种于9组不同2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄基腺嘌呤(6-BA)浓度配比的脱分化培养基中,诱导外植体的脱分化形成愈伤组织。研究表明,中华芦荟叶愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+1.0g/L活性炭;诱导不定芽的适宜培养基为MS+1mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.7g/L活性炭;及诱导生根的适宜培养基为1/2MS+0.2mg/Lα-萘乙酸(NAA)+20g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.5g/L活性炭,生根率达100%.     

刺槐体细胞胚发生的同步化调控

为了建立一个高频率、同步化发生的体细胞胚培养系统,以二倍体刺槐为材料,对影响刺槐体细胞胚同步化发生的培养基渗透压、培养基中添加的植物生长调节剂、低温等培养环境条件以及悬浮培养结合看护培养方法进行了研究,建立了刺槐体细胞胚同步发生体系.结果表明:1)4 ℃低温条件下处理7 d的胚性愈伤组织,最有利于刺槐体细胞胚的同步化诱导,同步化率可达37.3%;2)培养基中蔗糖质量浓度为50 g/L最适宜调控刺槐的体细胞胚同步化发生,同步化率可达35.0%;3)培养基中的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)质量浓度为0.1 mg/L时最适宜体细胞胚同步化的调控,体细胞胚发生的同步化率可达43.6%,同时对畸形胚的发生有较好的控制作用;4)将悬浮培养的胚性细胞用50目筛(孔径0.28 mm)过滤,将留在筛上的细胞团接种到铺有滤纸的半固体体细胞胚诱导培养基上(培养基为MS(Murashige & Skoog)+NAA(naphthylacetic acid)0.5 mg/L+ BA(benzyladenine)0.5 mg/L+2-吗啉乙磺酸(MES)500 mg/L+谷氨酰胺 500 mg/L+水解酪蛋白500 mg/L+蔗糖 30 g/L+琼脂3 g/L),培养21 d后,球形胚大量发生,占到总胚状体数目的67.3%.本结果可为其他植物种类的体细胞胚同步化调控研究提供参考.     

碳源对不同产地香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响

【目的】 探究渗透调节物质种类及其不同浓度对香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响,为提高香樟体胚诱导率、优化体细胞胚胎发生体系奠定理论基础。【方法】 以7月初在湖南省郴州、长沙、娄底及怀化市采集的香樟(Cinnamomum camphora L.)的未成熟合子胚为试验材料,分析不同碳源种类、浓度及组合方式对香樟体胚诱导、芽萌发、生根等方面的影响。【结果】 适合香樟的体胚诱导培养基为MS+1.0 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+0.3 mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+1.0 mg/L 链霉素+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L水解酪蛋白;增殖培养基为MS+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L 水解酪蛋白;芽萌发培养基为MS+0.1 mg/L 苯基噻二唑基脲(TDZ)+0.5 mg/L 萘乙酸(NAA)+0.1 mg/L 吲哚丁酸(IBA)+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂;生根培养基为MS+1.0 mg/L IBA+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂。【结论】 经过改良,添加15 g/L蔗糖和30 g/L山梨醇的组合碳源,香樟体胚的诱导率明显提高;添加15 g/L蔗糖和15 g/L山梨醇的组合碳源处理的新植株生根条数多、主根明显,生长状况更优。     

培养基种类及激素配方对青钱柳悬浮细胞次生代谢物质积累的影响

以青钱柳无菌苗诱导出的愈伤组织为材料进行悬浮培养,通过控制基本培养基的种类和激素配方,初步筛选出适合于青钱柳次生代谢产物生产的植物悬浮细胞培养体系。结果表明:青钱柳悬浮细胞培养的最佳基本培养基为MS培养基,激素配方为1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L KT;有利于青钱柳悬浮细胞的干质量增加、次生代谢产物生产的基本培养基为MS培养基;有利于青钱柳悬浮细胞总黄酮积累的激素配方B1为1.0 mg/L NAA+0.5mg/L KT,有利于青钱柳悬浮细胞多糖积累的激素配方B3为1.0 mg/L IBA+0.5 mg/L TDZ,有利于青钱柳悬浮细胞总三萜积累的激素配方B2为0.5 mg/L 2,4-D+0.3 mg/L NAA。     

中国七叶树悬浮培养体细胞球形胚的增殖与发育研究

以中国七叶树(Aesculus chinensis Bunge)的胚性愈伤组织为材料,进行悬浮培养诱导体胚增殖和发育研究。在MS+2,4D(3 mg/L)+NAA(1 mg/L)+KNO3(1.9 mg/L)+蔗糖(30 g/L)的液体培养基中可获得同步化程度较高的球形胚;采用MS+2,4D(2 mg/L)+KT(0.2 mg/L)+蔗糖(40 g/L)和MS+2,4D(3 mg/L)+BA(0.5 mg/L)+蔗糖(40 g/L),两种培养基均可使体细胞胚保持在球形胚阶段;而MS+TDZ(0.02 mg/L)+蔗糖(30 g/L)可有效解除对球形胚发育的阻遏,促使子叶胚的形成;建立了球形胚增殖和分化的两个悬浮培养体系,同时跟踪观测了液体培养基的pH变化,球形胚增殖方式和球形胚启动和发育动态,以及悬浮培养过程中体胚的形态结构变化。     

黑果枸杞的组织培养和快速繁殖

本研究以黑果枸杞(Lycium ruthenicum)为对象,对其愈伤组织诱导、不定芽分化、诱导生根的培养条件进行筛选,并探究了黑果枸杞实验室试管苗的大田移栽.结果表明,诱导愈伤组织最适培养基为:MS+0.5mg·L-1 6-BA+0.1mg·L-1 2,4-D+10g·L-1蔗糖,出愈率达88%,愈伤组织生长状态良好;不定芽分化增殖的最适培养基为:MS+0.2mg·L-1 6-BA+10g·L-1蔗糖,不定芽增殖倍数达5.05倍;诱导生根最适培养基为:MS+0.1mg·L-1 IBA+5g·L-1蔗糖,生根率为95%.逐级炼苗后的试管苗大田移栽成活率达90%.     

胀果甘草细胞的悬浮培养

切取胀果甘草(Glycyrrhiza inflate)无菌苗的子叶、下胚轴和根段外植体进行愈伤组织的诱导和悬浮细胞培养,建立了胀果甘草细胞悬浮培养体系,测定了悬浮培养细胞的生长曲线,并且研究了接种量、条件培养和激素组合对胀果甘草悬浮细胞生长的影响.结果表明子叶来源的愈伤组织最适合作为胀果甘草细胞悬浮培养的起始培养物;悬浮培养的最佳接种量为 35 g/L;条件培养基的最佳用量为总培养体积的1/3;最适合胀果甘草悬浮细胞生长的培养基是附加了 NAA 1.0 mg/L + KT 0.5 mg/L 激素组合的 MS 培养基.     

红豆杉细胞聚集体悬浮培养生产紫杉醇

建立了中国红豆杉(Taxuschinensis)细胞聚集体两步法悬浮培养生产紫杉醇的培养体系.红豆杉细胞于含LH1g/L,NAA0.1mg/L,2,4-D0.5mg/L及6-BA0.8mg/L的细胞聚集体形成的培养基中生长并形成聚集体,10d后转入生产培养,较大细胞聚集体的生物量比和紫杉醇产量分别较对照组提高了53.7%和82.1%;提高细胞聚集体的生物量比能显著增加紫杉醇产量.四种基本培养基中B5最适合诱导细胞聚集体的形成.生长培养12d后细胞悬浮培养物按1∶1(体积比)直接转入生产培养对细胞生长、细胞聚集体和紫杉醇形成最有利.在100μmol/L茉莉酸甲酯作为诱导子下本体系紫杉醇产量较对照组提高了一倍.     

超声波辅助提取野生黑果枸杞花青素工艺研究

论文以青海省特色资源野生黑果枸杞为主要原料,采取超声波辅助亚临界萃取技术对黑果枸杞花青素类物质进行提取单因素实验和正交实验研究,结果表明影响提取效果各因素的主次顺序依次为:乙醇浓度提取温度超声波作用时间料液比.确定野生黑果枸杞花青素提取的条件是:在50℃下,料液比1∶15,乙醇浓度60%,超声波辅助亚临界萃取25min,共三次.按此条件下,提取得到野生黑果枸杞花青素提取率为29mg/g.优于传统提取方法所得的花青素20mg/g.     

高生物产量川芎细胞悬浮培养条件优化

在基本培养基为MS的基础上,研究激素浓度、接种量等因素对川芎悬浮细胞生长的影响,建立川芎细胞悬浮培养体系.实验结果表明:川芎悬浮细胞同步化继代培养液生长16 d左右,对数生长中后期时,按照1∶4(V/V)悬浮液,新鲜培养液,以MS+6-BA 0.5 mg·L-1+2,4-D 2 mg·L-1+30 g·L-1蔗糖培养基可获得较高产量的川芎悬浮细胞,湿重达到182.6 g·L-1,干重达到39.2 g·L-1.     

何首乌根和茎愈伤组织的二苯乙烯苷含量

为了获得何首乌悬浮细胞系、研究何首乌细胞的液体培养和二苯乙烯苷的代谢路径,首先要获得何首乌愈伤组织.文中以何首乌根和茎为外植体,通过正交试验筛选根和茎诱导愈伤组织的适宜培养基,结果表明,在26℃和暗培养条件下,MS培养基中添加1mg/L2,4-二氯苯氧乙酸和0.4mg/L萘乙酸最适宜诱导出愈伤组织,诱导率可以达到96.7%.通过HPLC测定了根和茎愈伤组织的二苯乙烯苷含量,分别为1.5mg/g和0.4mg/g.     

植物细胞培养实验在细胞工程实验教学中的应用

为提高细胞工程实验教学的效果,培养学生的实验操作能力和解决问题能力,探索了适合于实验教学的具体化和可操作的植物细胞培养方案.大叶黄杨(Euonymus japonicus)和紫花地丁(Viola philippica)可作为植物细胞培养的理想实验材料;诱导愈伤组织的最适培养基为基本培养基+2,4-二氯苯氧乙酸2 mg/L+6-苄氨基腺嘌呤0.4 mg/L.     

文山三七块根的植物组织培养研究

选择云南文山三七块根为外植体,采用全面实验法或正交实验法,研究组织培养过程中外植体最佳表面消毒方案和最佳愈伤组织诱导、分化生芽、生根方案.试验结果表明,三七块根最佳表面灭菌方案为75%乙醇消毒10 s,再用2%次氯酸钠溶液消毒15 min;最佳愈伤组织诱导培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+KT1.0mg/L+2,4-D1.0mg/L,批pH=5.8;生芽生根培养基可以选择MS+蔗糖30 g/L+琼脂8 g/L+2,4-D0.5 mg/L+NAA1.0mg/L NAA+6-BA1.0mg/L,pH=5.8.     

三叶半夏细胞悬浮培养和植株再生的研究

三叶半夏幼嫩叶片在MS+2,4-D2.0mg/L+BA0.5mg/L培养基上一个月内可以诱导出愈伤组织.取颜色鲜黄的愈伤组织进行悬浮振荡培养,经3～4次继代培养得到分散性好的细胞悬浮系.悬浮培养过程中细胞生长曲线呈S型,培养12～16d达对数生长期,细胞鲜重在第18d达到最大值.悬浮液pH值的变化在对数生长期同生长曲线一致.将细胞悬浮液过滤得到的小细胞团接种于MS+NAA0.2mg/L+BA1.0mg/L分化培养基上,40d分化出小植株.     

独蒜兰优质种苗快速培育研究

建立独蒜兰优质种苗快繁体系,为实现独蒜兰植物工业化育苗、保护野生植物资源和发展人工育种技术提供新的途径.本研究从不同基本培养基对独蒜兰种子萌发影响、丛生芽诱导增殖培养和无根苗生根壮苗等方面开展研究.筛选出影响独蒜兰种子萌发的最佳基本培养基为B5,培养30 d统计种子萌发率为92％;丛生芽诱导增殖的最佳培养基为B5+TDZ 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+200.0 mg/L肌醇+2.0 g/L活性炭+20.0 g/L蔗糖,培养60 d丛生芽率诱导率为98.00％,平均产生丛生芽数为6.80个;最佳生根壮苗培养基为1/2MS+IBA 0.2 mg/L+6-BA 0.1 mg/L+2.0 g/L活性炭+30.0 g/L土豆泥+20.0 g/L蔗糖,培养60 d后统计生根率为100％,平均生根数为3.20条,平均鲜重为21.11 g.     

中间锦鸡儿组织培养体系的建立

以中间锦鸡儿茎段为外植体,建立了它的组织培养体系,具体条件如下:愈伤组织诱导培养基为MS+GA30.15mg/L+6-BA 0.2mg/L+NAA 0.4mg/L+AC 0.1g/L+蔗糖25g/L+琼脂6g/L,愈伤诱导率达33.33%;丛生芽诱导培养基为MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L+蔗糖25g/L+琼脂6g/L,诱导率为13.33%;诱导生根培养基为MS+IAA 0.5mg/L+GA30.15mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6g/L,生根率达60%;将生根幼苗移至蛭石和营养土体积比为2∶1的基质中,移栽成活率高达100%.     

IBA对牡丹‘太平红’试管苗生根的影响

以牡丹‘太平红'品种为材料,探讨不同IBA浓度、不同蘸根时间对‘太平红'试管苗生根的影响.生根培养基采用WPM+IBA4.0mg/L+PVP1.0g/L+Vc50mg/L+gellangum2.0g/L+蔗糖30g/L.结果表明,适宜的生长素浓度能够促进生根,1000mg/LIBA+1s处理的牡丹试管苗生根率最高.