鲢鱼白皮病致病菌特性的研究

对自然发生白皮病的病（死）鲢鱼进行了病原菌的分离与特性鉴定。从６尾新鲜病（死）鲢鱼的病变部位组织分离到几乎纯一且多量的细菌,从每尾鱼的分离物做纯培养３株共１８株,经形态特征检查及理化特性鉴定初步表明为气单胞菌属（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）的细菌,其中５尾为单一的豚鼠气单胞菌（Ａ．ｃａｖｉａｅ）感染,１尾为豚鼠气单胞菌（Ａ．ｃａｖｉａｅ）与嗜水气单胞菌（Ａ．ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）两种细菌感染。经致病作用检验初步表明所分离到的两种气单胞菌均可构成鲢鱼白皮病的病原菌。经用１５种常用抗菌类药物做药敏试验,结果表明１８株供试菌对链霉素等１２种均高敏,对青霉素等３种均耐药。     

养殖中华乌塘鳢致病性弧菌的分离鉴定

2017年8月,浙江台州某养殖场的中华乌塘鳢出现皮肤溃疡病,症状主要表现为体表病灶部位出血、肌肉溃烂等。解剖发现病鱼肝脏病变呈土黄色,脾脏充血肿大,肠道后端有黄色粘液。组织病理切片显示患病中华乌塘鳢肝脏和脾脏均出现严重的变性坏死。从病鱼体表溃疡部位及内脏分离到1株优势菌并命名为TZ-01,经人工回归感染实验证明TZ-01即为引起本次养殖中华乌塘鳢皮肤溃疡病的病原菌。该菌株在硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基(Thiosulfate citrate bile salts sucrose agar culture medium,TCBS)上形成圆形菌落,微隆起,呈蓝色或蓝绿色,革兰氏染色呈阴性,短杆状。结合API-20E快速鉴定、16S rDNA同源性分析等方面的结果,鉴定TZ-01菌株为副溶血弧菌。药敏试验证实,TZ-01菌株对头孢曲松、头孢他啶、米诺环素、多西环素、四环素等多种抗生素敏感。     

鲟鱼疑似肠炎病病原菌快速分离鉴定与药敏试验

对2尾患病杂交鲟体表、鳃、心、脾、肝、肠及肌肉病变进行观察,见病鱼体表粘液丰富,剖检见内脏出血、充血,肝脏坏死呈腐乳状,初诊为细菌性肠炎。取病鱼心、肝、脾、鳃、肠及肌肉分别同时接种于营养琼脂和普通肉汤培养基,培养后经革兰氏染色、氧化型与发酵型试验、氧化酶试验等初步鉴定。结果显示病灶处致病菌多为肠杆菌科细菌,仅一条鱼鳃部为弧菌科细菌。按肠杆菌科和弧菌科细菌的生化特性进行针对性生化试验。鉴定得5株细菌,分别是鲶鱼爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)、猪霍乱沙门氏菌(Salmonella enterica) 2株、发光致病杆菌(Photorhabdus luminescens)和霍乱弧菌(Vibrio cholerae)。药敏试验表明头孢噻肟对各菌株有很强的抑制作用,环丙沙星和四环素抑制作用较强,复方新诺明抑制作用最弱。     

幼兔细菌性感染症的检验与分析

从自然发生的2月龄幼兔肺脏中分离到3种类型的细菌(记作:a,b,c),经对所做的纯培养30株分离菌的形态特征、理化特性等检验,结果表明a菌(17株)为支气管炎博德特氏菌(Bordetellabronchiseptica);b菌(8株)为铜绿假单胞菌(Pseudomonasaeruginosa);c菌(6株)为大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)。通过人工感染试验,表明其为相应的致病菌。     

海南地区养殖石斑鱼皮肤溃疡病病原的分离、鉴定、药敏分析及病理学研究

2016年,针对海南岛沿岸9个石斑鱼养殖场的石斑鱼皮肤溃疡病的调查发现,该疾病的发病面积广、死亡率高,对养殖产业的危害严重.从9个采样点3种患病石斑鱼样品的组织中分离得到了9株优势菌株,人工回感试验表明,其感染特征与自然病症一致,证明这9株菌均为皮肤溃疡病的致病原,在经过生理生化和16S r DNA序列分析后,这9株菌均被鉴定为哈维氏弧菌(Vibrio harveyi).人工回感试验证实,菌株SY-1对珍珠龙胆石斑鱼的毒力最强,其14天每克鱼体重的半致死剂量(LD50值)为7.18×10~4cfu;药敏实验的分析表明,这9株病原菌对34种抗菌药物的药敏谱基本一致,但对氟苯尼考、强力霉素、四环素等药物高度敏感;病理学的研究表明,患病鱼的鳃丝、皮肤、肌肉、肝脏、脾脏、肾脏、肠道和脑等组织器官都发生了不同程度的病理变化,因此认为该病为全身性感染.本研究表明,目前海南地区养殖石斑鱼皮肤溃疡病的致病原有较高的病原同一性,主要为哈维氏弧菌;而较早报道的溶藻弧菌、副溶血弧菌等致病菌的优势度大大降低了,其致病力有所下降,并且与海南地区养殖石斑鱼皮肤溃疡病的相关度不大.     

鸡源沙门菌的分离鉴定及耐药性分析

为明确引起宁都黄鸡沙门菌病的菌株的血清型和耐药情况,经疑似沙门菌病死亡鸡中分离细菌、PCR法鉴定细菌种属和血清型,纸片法分析其药物敏感性.结果 分离到4株沙门菌,均为鼠伤寒沙门菌.4株细菌同时敏感的药物有头孢噻肟、氟哌酸、多粘菌素B,4株细菌同时耐受的药物有阿莫西林、四环素、强力霉素.结果 提示,近期预防和治疗35日龄内发病宁都黄鸡沙门菌病的优选药物是头孢噻肟、氟哌酸和多粘菌素B等.     

网箱养殖大黄鱼弧菌病研究

1999年夏季,福建省宁德北斗都网箱养殖大黄鱼发生大面积死亡,从病鱼体内分离出两株细菌：ND-01和ND-02,人工感染试验证实这两株菌皆为大黄鱼的病原菌,经鉴定,菌株ND-01为溶藻弧菌,菌株ND-02为副溶血弧菌,51种药物的药敏试验表明;青霉素G、万古霉素等19种药物对ND-01没有抗菌作用,青霉素G、头孢拉定等10种药物对ND-02没有抗菌作用;ND-01对氯霉素、氟派酸等9种药物敏感,而ND-02则对氟派酸、氟嗪酸等10种药物敏感。     

10种蔬菜内生细菌的分离筛选

以抑制植物主要病害病原菌和内生防病相关酶活性为评价标准,从蔬菜作物体内分离筛选植物内生细菌资源。从苦瓜、丝瓜、空心菜、大豆等10种蔬菜体内分离到101株细菌,发现内生细菌在不同种类的蔬菜中出现的频率不同,其中丝瓜叶上的内生细菌数量最多,洋葱体内分离到的内生细菌数量最少。运用平板对峙法从中筛选出了对黄瓜枯萎病菌、番茄青枯病菌、水稻细条病菌、荔枝霜疫霉病菌等有较强拮抗作用的菌株,获得对以上4种病菌均有拮抗作用的内生细菌有41株,占总株数的40．6％。对101株细菌进行纤维素酶、蛋白酶和几丁质酶活性测定表明,同时具有3种酶活性的菌株有32株,占总菌数的31．7％。从中选出13株拮抗效果较好的内生细菌。经初步鉴定均属于芽孢杆菌属（Bacillus sp）。进一步对筛选获得的同时对以上4种病原菌均有拮抗作用,且具有纤维素酶、蛋白酶和几丁质酶活性的13号、14号、59号和82号菌株进行16SrDNA序列分析,表明4个菌株均为枯草芽孢杆菌（B．subtilis）或其近缘种。     

多种细菌与凡纳滨对虾肝胰腺坏死症(HPNS)爆发有关

近年来,在中国南方超过50%以上的凡纳滨对虾养殖场在养殖30 d后爆发1种疾病,导致80%以上的养殖对虾死亡。患病对虾临床症状为肝胰腺萎缩坏死、活动力减弱、对虾在池塘底部死亡,发病初期水面和池塘边观察不到病虾,因此养殖者通常将该病称为"偷死病"。患病对虾肝胰腺萎缩坏死是主要症状,因此,我们称这种对虾疾病为对虾肝胰腺坏死症(hepatopancreas necrosis syndrome,HPNS)。2012年3月-2013年10月,我们在中国南方广东、海南和广西3个省的12个养殖地区采集具有HPNS症状的凡纳滨对虾进行了组织病理观察、病毒检测与人工感染、细菌分离鉴定与人工感染研究。组织病理学研究表明具有HPNS症状的病虾肝胰腺坏死,在部分区域肝胰腺管细胞消失,肝胰腺小管间结缔组织减少。对305尾HPNS对虾进行11种对虾病毒PCR检测,并采用人工病毒感染方式感染健康对虾,感染对虾不表现HPNS症状。从63尾HPNS病虾的肝胰腺、血淋巴和肠道分离鉴定383株细菌,这些细菌分别属于10个属,49种细菌,每尾对虾均混合感染多种细菌,其中38尾对虾中分离到副溶血弧菌,34尾对虾中分离到蜡样芽孢杆菌,20尾对虾中分离到苏云金芽孢杆菌,19尾对虾中分离到霍乱弧菌。选取副溶血弧菌和苏云金芽孢杆菌分别采用注射和浸泡方式感染健康对虾,感染对虾均出现HPNS症状。结果表明多种细菌与凡纳滨对虾HPNS爆发有关。     

鲈鱼苗烂鳃,烂尾病病原菌的研究

１９９７年４￣５月,对花鲈鱼苗期细菌性烂鳃和烂尾病的病原菌进行了研究。从具有明显症状的病鱼的病灶组织分离到２株致病菌Ｃ－１和Ｗ－１,经人工感染及从人工感染发病鱼体再分离的Ｗ－４和Ｗ－５菌株的再感染试验结果表明,所分离的细菌为鲈鱼苗烂尾,烂鳃病的致病菌。     

黄颡鱼败血症病原菌的分离鉴定与病理组织学观察

该研究对重庆市璧山县大路渔场大规模发生败血症的患病黄颡鱼的病原菌进行分离鉴定及组织病理学观察.首先把从患病黄颡鱼脾脏中分离获得的优势菌(命名为YC-1)人工感染健康黄颡鱼,该鱼患病症状表现与自然发病症状一致.再从人工感染鱼脾脏中分离病原菌,再次感染健康黄颡鱼,其症状仍然与自然发病症状一致.因此确认分离菌株YC-1为黄颡鱼"败血症"的致病菌.根据菌株形态学特点、生理生化指标和16SrDNA基因序列鉴定其为嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila.组织病理切片显示患病黄颡鱼肝组织严重坏死,肝细胞排列紊乱;脾脏细胞间界限不清,细胞核膨大;肾小管上皮细胞肿胀,肾小囊腔间隙增大.     

乌鸡大肠杆菌和葡萄球菌混合感染的病原分离与鉴定

无菌采取病死乌鸡肝、肺、脾及关节液等病料，进行细菌的分离培养与鉴定，分离出致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌，结合流行病学、临床症状、病理诊断，确诊为乌鸡大肠杆菌和葡萄球菌混合感染。     

青虾红体综合症病原研究

采用常规的细菌分离法，从患红体综合症的青虾肝胰腺和肌肉组织中各分离到一个菌体，两个菌株的生长和生化特性完全一致，定名为青虾980910，以该菌株人工感染健康青虾，可引起虾发病死亡，表明为病原菌，该菌株革兰氏染色阴性，短杆状，弧形，有一根细长的鞭毛，经API－20E试条生化分析，鉴定为拟态弧菌，药敏试验显示，该病原菌对环丙沙星，氟派酸，荼啶酸，利复平等敏感。     

果实采后病害拮抗菌的筛选及鉴定

从水果、叶片表面及果园土壤中分离到76株细菌和26株酵母菌，通过平板对峙法和果实接种法筛选到1株细菌2株酵母菌，对梨黑斑病菌（Alternaria kikuchiana）、柑橘青霉病菌（Penicillium italicum）都表现出显著的拮抗效果．根据其形态特征和生理生化特性以及细菌的16SrDNA序列的进化树分析，初步鉴定这3株菌分别为蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus），假丝酵母（Candida sp．）和克勒克酵母（Kloeckea sp．）．     

水蚤类浮游动物孳生的生物控制试验研究

对利用滤食性鲢鱼、鳙鱼的生物操纵作用抑制水源水中孳生的剑水蚤类浮游动物进行了探讨.在不投加任何饵料的条件下,进行微型生态系统的试验研究.结果表明:鱼类的放养生物量对其生物操纵作用具有重要的影响,适宜生物量的鲢鱼、鳙鱼的放养,可以有效地抑制剑水蚤类浮游动物的孳生,并通过影响水体中营养物质水平和生物群落结构,帮助水体水质的恢复;放养生物量过低难以有效地控制剑水蚤的生长,过高的放养生物量会导致鱼类捕食活动过于剧烈,加速营养物质自下而上的补充,甚至有可能会破坏水中正常的食物链关系.     

细菌XSJS3对松材线虫杀线活性的测定

细菌XSJS3是一种新发现的对松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)具有较高杀线活性的细菌,试验比较了细菌XSJS3培养液、细菌培养液滤液及含菌体水溶液对松材线虫的杀线活性,结果发现细菌菌体本身对松材线虫无杀线活性,杀线活性物质存在于细菌的培养液滤液中。通过对该细菌培养液滤液对松材线虫致死过程的观察发现:松材线虫接触该细菌培养液滤液30min后就表现为行动迟缓;在5h后所有虫体均不活动,针刺无反应;24h后部分僵直虫体出现局部膨大,且膨大部位出现体液外渗而虫体最终被消解。对不同培养时间的细菌XSJS3滤液杀线活性的比较试验表明:该细菌分泌的杀线物质在10d内随培养时间的延长而含量增加,杀线活性逐渐提高,不同培养时间下滤液的杀线活性差异明显;但培养15d后,稀释10倍的滤液对松材线虫杀线活性比培养10d时同样滤液的杀线活性则略有下降,但差异不明显,因此获得该细菌分泌的杀线物质较理想的培养时间为10d。将细菌XSJS3培养液滤液进行不同温度的热处理后测定对松材线虫的杀线活性,结果表明引起松材线虫死亡和消解的物质是两个不同物质,存在于培养液滤液中的对松材线虫有杀线活性的物质是热稳定的,而引起松材线虫虫体消解的物质是热不稳定的。     

添加莨菪和疫苗对一龄草鱼促长防病饲养效果的研究

将莨菪和草鱼出血病组织浆疫苗添加于一龄草鱼的日粮中，经４５～６０天的网箱和水泥池饲养结果，口服莨菪和疫苗（含５％ＣＭＣ），既可使草鱼的相对增重率比对照组提高５．７～８２．９％，又可对出血病的免疫保护率达４０～５４．６％。莨菪和疫苗是促进草鱼生长和提高抗病力的有效添加剂。     

溢康素对鲤鱼肠道菌群生长的影响

用喷涂了微生态制剂溢康素的饲料喂养鲤鱼,与用正常饲料喂养的对照组相对比,在45 d的试验期里,试验组鲤鱼肠道内外来菌群(芽孢杆菌、乳酸杆菌)得到了定植;肠道有益菌群(欧文氏菌、节细菌、变形菌、不动细菌等)得到了增殖;有害菌群(志贺氏菌、气单胞菌、弧菌、沙门氏菌等)的数量得到了抑制.鱼体免疫力得到了增强,净增重和净增长差异均极显著(P＜0.01),平均增重率提高了10.5%,平均增长率提高了15%.     

Rapid growth and sterility of growth hormone gene transgenic triploid carp

Triploid carp (100%) with 150 (3n=150) chromosomes were obtained by crossing the females of improved tetraploid hybrids (♀, 4n=200) of red crucian carp (♀)×common carp (♂) with the males of diploid yellow river carp (♂, 2n=100). The crosses yielded transgenic triploid carp (positive triploid fish, 44.2% of the progeny) and non-transgenic triploid carp (negative triploid fish). Histological examination of the gonads of 24-month-old positive triploid fish suggested they were sterile and the fish were not able to produce mature gametes during the breeding season. Morphologically, both the positive and negative triploid fish were similar. They had a spindle-shaped, laterally compressed, steel grey body with two pairs of barbells. Most of the quantifiable traits of the triploid carp were intermediate between those of the two parents. The positive and negative triploid fish were raised in the same pond for 2 years. The mean body weight of the positive triploid fish was 2.3 times higher than the negative triploid fish. The weight of the largest positive triploid fish was 2.91 times higher than that of the largest negative triploid fish. Thus, we produced fast-growing transgenic triploid carp that have a reduced ecological risk because of their inability to mate and produce progeny.