牛精细胞膜上受体的研究

用9种具有人类血型专一性或无血型专一性的凝集素,对牛精细胞表面膜上的受体进行了研究.各种凝集素的浓度各不相同就能使牛精细胞发生凝集反应.VBL对人或羊或牛精细胞发生凝集反应的最低浓度也不相同.上述凝集素用FITC标记,再与牛精细胞作用,从荧光显微镜下可以看到,各种凝集素在牛精细胞膜上的受体的分布各不相同,显示在膜上各种凝集素有其相对应的各自的受体.     

牛精细胞膜上凝集素受体的分离及其测定方法

应用非离子型去垢剂Brij58增溶牛精细胞获得的膜蛋白,经VBL-Sepharose4B亲和柱层析分离,可获得在PAGE、SDS-PAGE中均呈现单一蛋白带的VBL受体.其亚基分子最为46500d.牛精细胞经Brij58增溶的膜蛋白经用~(125)I标记,再经VBL-Sepharose4B亲和柱层析,也能获得~(125)标记的凝集素受体.经测定,用亲和层析法获得的凝集素受体,保持了原有的生物学活性.     

胃癌细胞株(SGC)细胞表面凝集素受体性质的研究

研究了温度、反应时间、蛋白水解酶和单糖对凝集素与SGC细胞反应的关系,还测定了几种凝集素对SGC细胞的毒性作用.结果表明:SGC细胞在50℃保温30min后,细胞表面的凝集素受体基本失活;凝集素与SGC细胞在25℃温育90min后,其凝集反应的强度不再增加;SGC细胞经胰蛋白酶和胶原酶处理后,对细胞表面受体的活性影响不大,但经木瓜蛋白酶处理后,则其受体活性全部丧失;Man、Glc、GlcNAc可以抑制SFL对SGC细胞的凝集作用,但几种单糖对SLL与SGC的凝集作用均无明显的抑制作用;LPL、LPL_1和SLL对培养的SGC细胞具细胞毒性作用,当浓度分别为0.5mg/mL、0.1mg/mL、5mg/mL时,就能使细胞坏死.     

正常人和不育患者精子膜上凝集素受体的数量与部分性质

应用＾１２５Ｉ－ＣＫＬ对正常人和不育患者精子膜上凝集素受体进行研究的结果表明，不育精子膜上凝集素受体的差异，可能是不育的原因之一。     

正常胃肠和癌变胃肠粘膜凝集素受体的研究

ＦＩＴＣ标记的２０种凝集素与正常和癌变胃肠组织的石蜡切片进行标记，结果表明，ＦＩＴＣ－ＰＮＡ和ＦＩＴＣ－ＬＰＬ对正常胃体和幽门上皮细胞呈阴性反应；ＦＩＴＣ－凝集素与胃癌粘膜细胞反应，以ＰＮＡ、ＬＰＬ阳性率最高，与肠癌粘膜细胞反应，则以ＳＭＬ和ＣＫＬ的阳性率最高。实验揭示了癌变胃肠粘膜与正常胃肠粘膜表面的糖复合物各不相同，导致与凝集素结合反应的强度也不相同。     

子宫平滑肌细胞雌,孕激素受体含量在性周期中的变动

采用放射免疫法（ＲＩＡ）检测大鼠在动情周期中再侧子宫角胞浆中雌、孕激素受体的含量，结果表明，大鼠在动情周期中子宫胞浆雌，孕激素受体含量呈周期性变化，与血清孕酮水平呈一定的对应关系，但两侧子宫胞浆雌，孕激素受体含量在各期无明显差异，提示大鼠可作为一种甾体激素受体测定的理想同体对照实验模型。     

野花生豆(Crotalaria mucronata)凝集素的细胞表面受体的研究

研究了异硫氰基荧光素和~(125)I标记的野花生豆凝集素,对A型细胞和牛精细胞表面的凝集素受体的定位、分布和数量。结果表明这些细胞表面的凝集素受体比较复杂,难以用一般动力学方法加以说明。D-葡萄糖、D-甘露糖、D-半乳糖和N-乙酰半乳糖胺等糖类和Con A、PHA、BSA对标记凝集素与A型细胞结合的影响各不相同。通过饱和曲线计算出A型细胞和牛精细胞表面的凝集素受体数目,分别为1.29×10~7和3.09×10~6个/细胞.     

正常人和不育患者精子表面凝集素受体的研究

应用4种凝集素和经过FITC标记后分别与正常人或不育患者的精子相互作用,研究其凝集作用和膜上凝集素受体的分布.以铁蛋白或辣根过氧化物酶标记城口豆凝集素后再与精子反应,应用扫描电镜或透射电镜观察了正常人或不育患者精子表面膜受体的分布.     

青霉素惊厥与脑中GABA_A和GABA_B受体亲和力的关系

脑室微量注射青霉素（１１．９ｍｇ·ｍｌ－１，１５μｌ）制作小白鼠惊厥模型；并以同位素示踪法研究大脑皮层、小脑、海马、下丘脑四个脑区ＧＡＢＡＡ和ＧＡＢＡＢ受体亲和力的变化。结果显示，青霉素惊厥时大脑皮层和小脑ＧＡＢＡＡ受体亲和力显著减弱，而海马、下丘脑ＧＡＢＡＡ受体亲和力无变化；青霉素惊厥使四个脑区中ＧＡＢＡＢ受体均显著下降。提示，除了海马和下丘脑的ＧＡＢＡＡ受体以外，四个脑区的ＧＡＢＡＡ和ＧＡＢＡＢ受体均参与了青霉素的致惊厥过程。青霉素可能通过竞争内源性ＧＡＢＡ与ＧＡＢＡＡ和ＧＡＢＡＢ受体的结合，阻断了ＧＡＢＡ介导的突触前和突触后抑制效应并增加了兴奋性递质的释放，显示了惊厥效应。     

Baclofen对大鼠新鲜分离DRG神经元GABA和NMDA激活电流的抑制作用

用全细胞膜片箝技术在大鼠新鲜分离的背根神经节 (DRG)细胞上观察到baclofen对GABA和NMDA激活电流有调制作用。单独给予DRG细胞baclofen (1～ 10 0 μmol/L)未记录到可测的电流改变 ,但预加baclofen对GABA和NMDA激活电流具有明显的抑制作用 ,且呈剂量依赖性。 10 0 μmol/Lbaclofen对GABA和NMDA激活电流分别抑制(5 1.2± 10 .9) % (X±SE ,n=8,P <0 .0 1)和 (6 4 .1± 2 1.1) % (X±SE ,n=6 ,P <0 .0 1) ,此抑制作用是可逆的 ,可被GABAB 受体拮抗剂saclofen(10 0 μmol/L ) 所取消 (n =4 )。     

人红细胞生成素受体膜外结构域在大肠杆菌中的融合表达及其纯化

将插入ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｂｅ的人红细胞生成素受体ｃＤＮＡ,用ＥｃｏＲＩ和ＢａｍＨＩ酶解,分离得到的基因片段,插入到经ＥｃｏＲＩ和ＲａｍＨＩ消解的表达载体ｐＧＥＸ－３Ｘ中,得到重组表达质粒ｐＧＥＸ－３Ｘ／ｈＥＰＯＲ。重组质粒ｐＧＥＸ－３Ｘ／ｈＥＰＯＲ含有ｔａｃ启动子,ＥＰＯＲ膜外结构域基因５端与谷胱甘肽转移酶（ＧＳＴ）编码基因融合,阳性重组子在大肠杆菌中经ＩＰＴＧ诱导表达ＧＳＴ－ｈＥＰＯＲ,重组表达菌裂解上清液经ＧＳＨ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和柱一步纯化,能除去绝大部分杂蛋白,基本达到纯化的效果。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和免疫杂交分析显示,重组表达产物确系人红细胞生成素受体     

前列腺素E_2受体EP_3及其调节剂的研究进展

前列腺素受体类型繁多,可以偶联G蛋白介导多种生理病理过程.其中前列腺素E2受体有4种亚型:EP1、EP2、EP3和EP4.EP3受体由于其亚型多样性及偶联G蛋白的复杂性使其成为众多前列腺素E2受体中较特殊的"成员".EP3的抗凝血功能研究及新型调节剂的研发是目前该领域研究的热点.本文主要阐述EP3的分布、主要功能及其调节剂的研究进展.     

猪黑皮质素受体3和4基因克隆及分析

以长白猪(Landrace)大脑cDNA为模板,克隆长白猪黑皮质素受体3和4基因(MC3R和MC4R).序列分析显示:长白猪MC3R基因cDNA编码具319个氨基酸的前体蛋白,与人、大鼠、小鼠和斑马鱼的氨基酸序列一致性分别为86.4%、83.3%、82%和69.7%;MC4R基因cDNA全长1175bp,编码具332个氨基酸的前体蛋白,与人、大鼠、小鼠的氨基酸序列一致性高达94%以上,与斑马鱼MC4R氨基酸序列享有70.7%的同源性.序列分析显示,猪MC3R和MC4R基因都具有典型的七次跨膜结构域,和短的胞内环和胞外环,且在第五个跨膜域中保守的甲硫氨酸(M)分别替换为异亮氨酸(I)和缬氨酸(V).另外,在猪MC3R和MC4R中还鉴定到保守的半胱氨酸残基,第一个胞内环中保守的PMY基序和N末端的3个N-链接糖基化位点.组织表达图谱分析表明,MC3R主要在大脑和脾中高表达,而MC4R主要在六种检测的组织中都有表达,在肾中表达较弱.     

人体中一个新的乙肝表面抗原结合蛋白SBP的免疫组化及ELISA分析

对人体中一个新的乙肝表面抗原结合蛋白SBP(HBsAg Binding Protein)进行了组成和结构分析.利用免疫组化的方法检测了人脑、肝、前列腺、肌肉、胃以及睾丸等组织的SBP的表达情况,并利用ELISA方法测定了慢性乙型肝炎病人、乙肝康复者以及健康人血清中SBP的含量并作统计学分析.免疫组化结果显示SBP存在于包括肝组织在内的多种组织中.ELISA结果表明,慢性乙肝病人、乙肝康复者以及健康人血清中SBP含量存在显著差异,推测SBP可能与人体对乙肝病毒的易感及耐受有关.     

荒漠沙蜥皮肤感受器的形态学研究

应用扫描电镜和半薄切片技术对荒漠沙蜥（Ｐｈｒｙｎｏｃｅｐｈａｌｕｓｐｒｚｅｗａｌｓｋｉｉ）皮肤感受器的表面结构和显微结构进行了观察．皮肤感受器是位于鳞片凹窝中的帽状突起结构，中央具柱状感觉毛，其皮肤结构与一般皮肤有明显区别．皮肤感受器区域的表皮中无β－角质层，蜕皮期也不形成预定β－角质层，但是，感觉毛的中央由４个左右的β－角质层细胞形成．皮肤感受器区域的表皮中间层由１～２层高柱状和矮柱状细胞构成，基底层由单层矮柱状细胞构成，同时，中间层和基底层细胞的细胞质中都充满色素颗粒．此外，冰冻切片，用苏凡Ⅲ染色，显示中层属富含类脂的结构，可能对皮肤渗透屏障的建立起重要作用．在紧贴皮肤感受器表皮的下方，还观察到突向表皮的麦氏触觉小体样真皮结构．推测荒漠沙蜥的皮肤感受器具有感受机械刺激和感受辐射热的双重功能．     

视黄素受体介导的视黄素（retinoids）抗癌作用

对近年来视黄素受体介导视黄素抗癌作用机理的研究进展作一综述,主要有：1）视黄素受体;2）视黄素受体与细胞生长;3）视黄素受体与孤生受体的的相关性;4）视黄素受体对AP-1活性的抑制作用;5）视黄素受体介导的信号转导途径。通过研究,对于探讨视黄素受体的功能、阐明视黄素的抗癌机理、合成更多的受体选择性视黄素具有重要的现实意义。     

子宫内膜异位症的子宫内膜雌激素受体和孕激素受体mRNAs的表达

目的 :探讨雌激素受体 (ER)和孕激素受体 (PR)在子宫内膜异位症 (内异症 )子宫内膜的表达。方法 :利用大鼠内异症动物模型 ,采用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)技术 ,检测子宫内膜ER和PRmRNAs的表达情况。结果 :内异症模型组大鼠异位内膜ER、PRmRNAs的表达低于在位内膜和对照组正常子宫内膜 ,与后两者比较差异有显著性意义 (P <0 0 1) ;而模型组在位内膜ER、PRmRNAs的表达与正常对照组比较差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。内异症模型组异位内膜ER/PRmRNA大于在位内膜和正常子宫内膜ER/PRmRNA(P <0 0 1)。结论 :内异症大鼠异位内膜ERmRNA表达的相对增高在内异症的发生与发展中起着一定的作用     

小立碗藓CAS基因的克隆及与拟南芥CAS基因的比较

钙信号在动植物的生长、发育过程中具有不可替代的作用.胞外钙受体(Extracellular Calcium-sensing receptor,CAS)是动植物质膜上一种跨膜离子通道蛋白,可以感受胞外Ca2 水平,充当第一信使将胞外的信号传递到细胞内.但迄今为止,仅2003年从植物拟南芥中克隆了胞外钙受体CAS基因,其起源进化我们知之甚少.本实验成功克隆了小立碗藓CAS基因,其cDNA全序列共1 574 bp,5′-非翻译区80个核苷酸,3′-非翻译区234个核苷酸,开放阅读框(ORF)1 257 bp,编码419个氨基酸,共有6个内含子.虽然藓类植物与被子植物进化距离较远,但小立碗藓CAS基因前五个内含子的插入位置以及相位与拟南芥完全相同,这说明植物中CAS基因在漫长的进化过程中非常保守,暗示被子植物胞外钙离子信号感受、传递机制起源于藓类植物.     

Immunorecognition of estrogen and androgen receptors in the brain and thoracic ganglion mass of mud crab, Scylla paramamosain

The brain and the thoracic ganglion of a crustacean can synthesize and secrete gonad-stimulating hormone (GSH) which stimulates the maturation of gonad. In the previous experiments, sex steroid hormones (estradiol, testosterone, progesterone, etc.) have been detected from the crustacean. However, the feedback regulation of sex steroid hormones on the brain and the thoracic ganglion of the crustacean has not been reported so far. In the present experiment, monoclonal antibodies were applied to investigate the immunorecognition of estrogen receptor (ER) and androgen receptor (AR) in the brain and the thoracic ganglion mass of Scylla paramamosain. The results showed that the distribution of the immunopositive substances of ER and AR was extremely similar. They distributed in the protocerebrum, deutocerebrum and tritocerebrum of the brain, and mainly in protocerebrum. In the thoracic ganglion mass, immunopositive substances distributed in the subesophageal ganglion, thoracic ganglion and abdominal ganglion, and mostly in subesophageal ganglion. Immunopositive substances of ER and AR mostly existed in the cytoplasm of neurons. The present study will provide morphological evidence for the origin and the evolution of ER and AR. In addition, the immunoreactivities of ER and AR suggested that the estrogen and androgen may be involved in the feedback regulation of crustacean neuroendocrine.     

GABA与GABA受体及其在运动中变化的研究现状

γ-氨基丁酸(GABA)是脑内一种重要的抑制性氨基酸类神经递质，通过与GABA受体结合而发挥其生物学功能。GABA受体主要有GABAA、GABAB和GABAC3类，GABAB为代谢性受体，其它为离子型受体。GABA受体在脑缺血缺氧性疾病起重要作用，与运动性中枢疲劳有着密切的联系。