中国对虾暴发性流行病病原的免疫组织化学研究

对未感染中国对虾，实验感染暴发性流行病病原体后3h,12h,24h和36h及96h和136h，进行了系统的免疫组织化学研究，结果显示感染病虾的多种组织细胞呈阳性反应，说明暴发性流行病病原体具有广泛的宿主靶细胞，其中最易感的靶细胞是鳃、胃、后肠中具有合成和分泌几丁质动能的细胞，于暴发性流行病病原体侵入虾机体的体途径，使对虾致病和死亡的原因进行了探讨。     

中国对虾杆状病毒病的初步研究

１９９３～１９９５年中国对虾发生暴发性流行病,经对患病对虾作组织病理学研究和电镜观察,发现此病以消化系统病变更为严重,肝胰腺,胃及肠道上皮层发生变性和坏死,上皮细胞破坏,细胞核肿大;结缔组织发生水肿,血淋巴细胞浸润,在电镜下,病变组织的细胞核内充满一种杆状病毒,大小为２６０～３１０ｎｍ×９０～１１０ｎｍ外被双层囊膜,不形成包涵体,纯化的病毒经负染后在电镜下见到的大多数是病毒核衣壳,大小为２８６ｎｍ     

对虾一种杆状病毒的分离纯化及超微结构

从市售的甲壳上带有白斑的冷冻斑节对虾(Penaeus monod on)中提取到一种杆状病毒,并用它感染了活体的中国对虾(Penaeus chinensis) 幼虾和日本对虾(Penaeus japonicus).这2种对虾均发病死亡.从死亡的对虾中再次提纯出此杆状病毒.此种杆状病毒的核酸为DNA,衣壳的主要结构多肽的相对分子质量为49 .8 kDa.通过对此杆状病毒悬液负染片的电镜观察,对其超微结构进行了研究并提出了一种对虾杆状病毒衣壳超微结构的模式图.     

感染暴发性流行病病毒的中国对虾形态学研究1.幽门胃的显微和超微结构

为探讨对虾暴发性流行病的致病机理,进行人工感染实验,并对感染中国对虾的胃组织进行了显微和亚显微结构特征的系统观察.观察结果表明胃是该暴发性流行病病毒首先感染的主要的靶器官之一,暴发性流行病病毒能侵入胃壁多种细胞并在其中复制,其中,胃上皮细胞是该病毒的主要的靶细胞.     

感染暴发性流行病病毒的中国对虾形态学研究 3.病虾鳃的显微与超微结构

在光镜和透射电镜下，观察经实验感染暴发性流行病病毒中国对虾的鳃组织，发现鳃丝扁平上皮细胞及少量的网状隔膜细胞被感染而引起血隙狭小，以及巨噬细胞样无颗粒细胞的趋化作用导致鳃丝扁平上细胞增厚而影响其代谢功能，另外，还观察到巨噬细胞样无颗粒细胞有强烈的吞噬作用，小颗粒细胞也具吞噬作用，在染色质凝聚结构等刺激下胞吐小颗粒，大颗粒细胞也具有胞吐大颗粒功能，与上述无颗粒细胞相比，胃结缔组织血窦内的浆细胞样无颗粒细胞其释放与病毒结合参与体液免疫。     

天津地区中国对虾杆状病毒初探

１９９３年夏，发现天津地区人工养殖的中国对虾肝胰腺中有具包膜的短杆状病毒粒子。其大小明显不等，短径８０－１００ｎｍ，长径２００－２８０ｎｍ。病毒粒子寄生在肝胰腺管壁肌细胞和腺管之间的间质细胞核内，致使宿主肝胰腺超微结构发生严重病理改变。     

感染暴发性流行病病原的中国对虾形态学研究 2.病虾中肠的显微和亚微结构

在非生物环境因子对暴发性流行病病原实验感染的中国对虾发病影响的基础上，用光镜和电镜观察对虾中肠组织，观察结果表明：中肠上皮细胞水样变性，少量的上皮细胞被感染，肠腔内致病菌继发性感染，中肠肌细胞发生凋亡，大颗粒细胞、小颗粒细胞形成大量的颗粒通过胞吐作用参入体液免疫。     

中国对虾一种杆状病毒的超微结构

应用电镜超薄切片技术,发现中国对虾(Penaeus chinensis)肝胰腺上皮、肠上皮和甲壳下表皮细胞质中1种杆状病毒粒子,为中国对虾杆状病毒(CBV)．该病毒直径44～45nm,长度170～200nm,中央是高电子密度的核心,外裹的衣壳不明显,但囊膜清晰可辨,在囊膜与核心之间有一个中宽端窄的间隙,本病毒仅在胞质中增殖,不形成包涵体,但形成封人体,它们所造成的靶细胞病理变化不明显．     

利用WSBV的引物扩增对虾的杆状病毒DNA

利用台湾报道的ＷＳＢＶ的ＰＣＲ引物，成功地扩增出了１４００ｂｐ左右的中国对虾的杆状病毒的ＤＮＡ片段，与预计的产物长度吻合，该引物对经初步离心处理的病虾组织出能扩增出特异性ＤＮＡ条带，而在对正常虾组织ＤＮＡ、昆虫杆状病毒ＤＮＡ进行了扩增，均获得阴性结果，说明该引物的特异性较高，对中国对虾的杆状病毒的检测具有一定的实际应用价值。实验结果同时说明ＷＳＢＶ与中国对虾的杆状有同源序列存在，具有一定的保守性，     

以虫白蜡为原料制备及纯化二十八烷醇

以虫白蜡为原料,采用醇相皂化法制备长链脂肪醇．通过采用多级分子蒸馏技术制备高纯度二十八烷醇,该技术大大降低了蒸馏温度,减少了物料停留时间,从而能有效降低在常规减压蒸馏条件下影响二十八烷醇产品品质的分解产物的含量,提高馏出物中二十八烷醇纯度和品质．     

接骨草蔗糖酶同工酶的分离纯化及其部分性质研究

从接骨草幼叶中提取的蔗糖酶粗酶液经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose离子交换层析、Sephacryl S-200凝胶过滤层析纯化，得到3种同工酶．对3种同工酶进行SDS-PAGE和IEF电泳均显示一条蛋白带，其亚基分子量分别为45．8KD，44．3KD，43．2KD；等电点分别为pH4．0，pH3．8，pH3．75．凝胶过滤测得3种同工酶全酶分子量分别为91．2KD，89．1KD，87．4KD，表明3种同工酶均由2个相同亚基组成，其表观Km分别为30mmol／L，57.1mmol／L，65mmol／L;Vmax分别为98μg／min，48μg／min，35μg／min．同工酶Ⅰ和同工酶Ⅲ在pH4．4～5．0时有最大活性，同工酶Ⅱ则在pH3．9～4．2时有最大活性．3种同工酶均在pH3-6范围内比较稳定．同工酶Ⅰ和同工酶Ⅱ在48～52℃有最大活性，同工酶Ⅲ在50～55℃有最大活性．3种同工酶均在50℃以下有较好的稳定性．     

开口箭均一多糖 TCP-C1-1的结构分析及其生物活性

该文从开口箭根茎部位提取分离开口箭多糖TCP-C1-1,确定其结构并对其生物活性进行研究.实验采用水提醇沉法从开口箭根茎部分离提取多糖,通过Sevage法对80%醇沉部位TCP-C进行纯化,采用DEAE-52 纤维素离子交换树脂和葡聚糖凝胶Sephadex G-200 从TCP-C中进行分离纯化得到多糖TCP-C1-1,采用高效凝胶色谱,TLC薄层层析,红外光谱核磁共振氢谱碳谱等技术对多糖TCP-C1-1结构进行分析.结果分析,从开口箭中分离纯化得到 TCP-C1-1 多糖为果糖组成的均一多糖,连接方式其为β-(2→1)连接,相对分子质量为1.52×104.TCP-C1-1具有良好的生物活性,在浓度为2 mg·mL－1时,其自由基清除率可以达到63.3%.在浓度为6.5 mg·mL－1时,其对α-糖苷酶的抑制率可以达到78.6%.在浓度为1.5 μg·mL－1时,其可以明显促进小鼠单核巨噬细胞 RAW 264.7 的增殖(p＜0.05),并能明显抑制LPS诱导小鼠单核巨噬细胞 RAW 264.7细胞释放出的 NO.TCP-C1-1为首次从开口箭中分离得到的天然来源的菊粉类果聚糖,为初步研究为开口箭多糖成分的开发提供了一定参考.     

成熟中国对虾(Penaeus chinensis)卵巢中卵黄蛋白的纯化

用层析(SephadexG-150, DEAE-Cellulose-52)和电泳洗脱2种方法分别从成熟中国对虾卵巢中纯化得到了一种卵黄蛋白,聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)检测表明,卵黄蛋白出现在SephadexG-150的第1个洗脱峰和DEAE-Cellulose-52的0.4 mol/L和0.5 mol/L NaCl洗脱峰处.比较了这2种方法的优缺点:层析法可用于蛋白的大量制备,电泳洗脱能够得到高纯度的蛋白.并对与其结合的类胡萝卜素的稳定性进行了讨论.     

斑节对虾杆状病毒与肝胰腺细小样病毒在三种对虾中的感染率

应用石蜡切片技术对斑节对虾杆状病毒（ Ｍ Ｂ Ｖ） 和肝胰腺细小样病毒（ Ｈ Ｐ Ｖ） 在斑节对虾、日本对虾和中国对虾中的感染情况进行了研究结果表明： Ｍ Ｂ Ｖ 在斑节对虾的仔虾、稚虾及养成期虾中的感染率均接近１００ ％ ;在日本对虾养成期虾中平均感染率为７５０ ％ ;中国对虾仔虾未检出 Ｍ Ｂ Ｖ 包涵体 Ｈ Ｐ Ｖ 在中国对虾仔虾中感染率为５６００ ％ ;在斑节对虾仔虾中感染率为２８７５ ％ ,稚虾为３６１１ ％ ,养成期虾平均为６５２５ ％ ;日本对虾养成期虾的平均感染率为２０００ ％  Ｍ Ｂ Ｖ 与 Ｈ Ｐ Ｖ 在斑节对虾中可出现合并感染的情况,其合并感染率为：仔虾２８５７ ％ ,稚虾３５６８ ％ ,养成期虾６４５４ ％ 日本对虾和中国对虾中未发现 Ｍ Ｂ Ｖ 与 Ｈ Ｐ Ｖ 合并感染的现象结果表明, Ｍ Ｂ Ｖ 是斑节对虾的主要病原体,而 Ｈ Ｐ Ｖ 是中国对虾的主要病原体     

固定化蛭弧菌净化景观水体中病原微生物的试验研究

淤泥容纳、滋生和释放病原微生物威胁城市景观水环境安全。利用陶化后的淤泥颗粒固定蛭弧菌净化城市景观水体中病原微生物,可避免物化消毒对景观水体中其他动植物造成伤害。陶化淤泥颗粒固定蛭弧菌及固定化蛭弧菌对大肠杆菌、实际景观水体中总大肠菌群和粪大肠菌群裂解的试验结果表明:淤泥陶化温度为800℃、吸附时间为6 h、培养温度为30℃、摇床转速为140 r/min时,蛭弧菌固定化的效果最好;在此条件下固定的蛭弧菌,在72 h的试验周期内,对大肠杆菌的去除率达到97.4%,远超对照组的38.4%;采用陶化淤泥颗粒固定蛭弧菌去除城市景观水体中总大肠菌群和粪大肠菌群两种指示性病原微生物,去除率分别达到97.5%和78%。     

黏着斑蛋白Supervillin的抗体制备及纯化

黏着斑蛋白Supervillin（SVIL）是一个细胞膜结合蛋白分子,定位于细胞与细胞外基质接触面的黏着斑。为了进一步研究 SVIL蛋白分子在细胞内的功能,应用分子克隆技术构建原核细胞表达质粒 ｐＧＥＸＫＧ ＳＶＩＬＣ３０２和ｐＨＩＳ８ ＳＶＩＬＣ３０２,并在细菌 ＢＬ ２１（ＤＥ３）中用 ＩＰＴＧ分别诱导表达 ＧＳＴ ＳＶＩＬＣ３０２和 ＨＩＳ ＳＶＩＬＣ３０２融合蛋白。用谷胱甘肽琼脂糖凝胶柱亲和层析纯化 ＧＳＴ ＳＶＩＬＣ３０２蛋白,然后免疫新西兰大白兔制备 ＳＶＩＬ多克隆抗体,并用 Ｎｉ ＮＴＡ柱子结合 ＨＩＳ ＳＶＩＬＣ３０２蛋白,对其进行交联,纯化抗体。ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ（ＷＢ）和 Ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ（ＩＦ）实验证明该抗体可以识别外源的 ＧＦＰ ＳＶＩＬ和内源的 ＳＶＩＬ蛋白,并且可以用于蛋白免疫沉淀实验。表明此ＳＶＩＬ多克隆抗体具有较高的特异性和灵敏度,为进一步研究黏着斑蛋白 ＳＶＩＬ在细胞内的功能奠定了坚实的基础。     

虚拟电工电子实验平台在基础实验教学中的应用

虚拟电工电子实验平台主要包括电工电子虚拟实验系统和虚拟仪器仪表系统。它是利用电路仿真软件Multisim、多媒体软件VB、虚拟仪器软件Labview搭建的。搭建虚拟电工电子实验平台的主要目的是使学生可以利用网络和计算机完成电路实验、模拟电子技术实验、数字电子技术实验和高频电路实验等基础实验的模拟实物预习、常用实验设备的模拟操作练习,也可以作为实验课教师的辅助教学手段。     

温度对羊草（Leymuschinensis）生长及无性系分化的影响

根据温室内的人为控制温度试验，观测温度对羊草（Ｌｅｙｍｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ）无性系分化和生长的影响，得出如下结论；温度是影响羊草株高的最主要生态因子，适宜的高温显著促进单草的伸展；温度也是促进单草分蘖的主要因子之一，羊草的生物量积累受到温度变化极值的限制，适宜的温度范围显著促进生物量积累．羊草无性系的分化和高温的天数明显正相关，无性系对高温有较强的生态适应性，甚至在高温已经抑制羊草生物量的积累的情况下，仍然对无性系的生长和分化有一定的促进作用，这充分表明了羊草无性系对温度有较强生态适应的特点．