人工固体发酵培养冬虫夏草菌丝体的研究

人工固体发酵培养冬虫夏草菌丝体。结果表明，固体发酵培养的冬虫夏草菌丝体的虫草多糖含量高于天然冬虫夏草，氨基酸含量与天然冬虫夏草接近。     

1株蛹虫草的液体发酵试验及蛹虫草多糖的提取

冬虫夏草是一种名贵的强壮滋补中药,但由于其严格的寄生性和特殊的生长地理环境,天然虫草资源越来越少,冬虫夏草的开发利用只有走人工培养之路.经研究蛹虫草的培养时间与菌丝体生产量的关系,虫草多糖的提取以及虫草多糖的测定,结果显示培养6d的菌丝产量最高,发酵时间对菌丝生长量的研究有重要意义,它可以控制大规模发酵生产大周期.多糖含量的测定用硫酸-苯酚法.经实验显示2次浸提比1次浸提的得率要高,摇瓶菌丝体的粗多糖得率为25.0%,精多糖得率为10.15%,均比已报道的虫草多糖得率高,这为人工控制大规模发酵生产大周期提供科学依据.     

兰坪被毛孢粗多糖延缓衰老的功效研究

兰坪虫草是近几年报道的新种,是冬虫夏草的近缘种,具有较高药用价值。为探明兰坪虫草无性型兰坪被毛孢粗多糖延缓衰老的功效,从兰坪被毛孢发酵产物中提取粗多糖,分析不同浓度粗多糖(0.01%~0.3%)对雌、雄果蝇成虫寿命的影响。结果表明,兰坪被毛孢粗多糖对果蝇成虫的平均寿命、最高寿命和半数死亡时间都有不同程度的延长效果。一定剂量范围内,随粗多糖浓度增加延寿效果提高,但其作用具有浓度的最大阈值。粗多糖浓度达到0.2%时延寿效果最好,使雌雄果蝇的平均寿命延长率分别达到42.17%和21.47%。粗多糖浓度超过0.2%后,其延寿效果反呈现下降趋势。兰坪被毛孢粗多糖的延寿效果还具有性别差异,其对雌果蝇的延寿效果较好。研究结果将为进一步解释兰坪被毛孢的药理活性奠定基础。     

蝙蝠蛾被孢霉[新种]的形态学研究

从四川省汶川县采得的冬虫夏草Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.新鲜样品子座和菌核分离到一种产虫草素(Cordycepin)的真菌新种,定名为蝙蝠蛾被孢霉Mortierella hepiali Chen et Liu sp.nov..本文报道了这个新种的形态学特征。     

蝙蝠蛾拟青霉质量标准及免疫活性研究

目的:建立蝙蝠蛾拟青霉菌100 L发酵菌丝体质量标准,并验证其安全性和免疫调节活性.方法:采用高效液相色谱等方法,在测定菌丝体产量和腺苷含量的基础上,测定其水分、一般杂质、酸不溶性杂质和重金属含量.此外,进行了小鼠免疫增强实验.结果:菌丝体产量不少于20.80 g/L,菌丝体中腺苷含量不少于0.27%,水分含量不超过6.71%,总灰分含量不超过1.26%,酸不溶性灰分含量不超过0.15%,重金属含量少于国家标准计入质量标准正文.小鼠免疫增强实验显示,发酵菌丝体显著提高小鼠迟发型超敏反应,并对IL-10、IL-12、IL-12R、IFN-α等炎症相关因子水平具有上调作用.结论:初步建立了蝙蝠蛾拟青霉菌100 L发酵菌丝体质量标准,并证实其在小白鼠体内的安全性和免疫调节活性.     

虫草头孢菌CS-866菌株发酵条件的研究

对虫草头孢菌CS-866菌株的菌丝体发酵条件进行了研究,其适宜的培养基消前pH为5.0~7.0,培养温度为26~28℃,接种量为3%~5%,最佳种龄为3 d,发酵周期4 d,培养基消前加0.3%毛豆油消沫,发酵过程中对通气量的要求较高.虫草头孢菌丝体所含氨基酸与天然冬虫夏草相近,红外吸收光谱也表明两者所含的各类化学成分极为相似.     

蛹虫草的研究Ⅳ．蛹虫草与冬虫夏草化学成分比较

人工蛹虫草与野生冬虫夏草的子实体经测定分析，二者都含有蛋白质、糖、脂肪、多种无机元素和维生素、１８种氨基酸、虫草菌素、虫草酸、虫草多糖和ＳＯＤ等化学成分，在含量上基本相似，有些成分含量高于冬虫夏草．蛹虫草可以替代冬虫夏草食用或药用     

蛹虫草的研究：IV.蛹虫草与冬虫夏草化学成分比较

人工蛹虫草与野生冬虫夏草的子实体经测定分析，二者都含有蛋白质、糖、脂肪、多种无机元素和维生素、１８种氨基酸、虫草菌素、虫草酸、虫草多糖和ＳＯＤ等化学成分，在含量上基本相似，有些成分含量高于冬虫夏草。蛹虫草可以替代冬虫夏草食用或药用。     

粉被马利娅霉(Marianaea pruinosa)对苏云金杆菌抗紫外线辐射的保护效应

本文首次报道了粉被虫草的无性型粉被马利娅霉(Marianaea pruinosa Liang)对苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis subsp. galleria Hermpel)的抗紫外辐射的保护作用,建立了粉被马利娅霉抗紫外辐射物质的苏云金杆菌检测法。用粉被马利娅霉的培养液,菌丝体浸提液及孢梗束浸提液所培养的苏云金杆菌经紫外辐射后,活菌数依次比对照提高26.3％,138.6％和187.8％,揭示了抗辐射物质的含量是梗孢束高,菌丝体次之。培养液最低的趋势,主要为胞内产物。不同来源的粉被马利娅霉菌株抗紫外辐射物质的含量是有差异的。     

工业化生产的冬虫夏草及其制品

冬虫夏草也叫虫草、假虫草。它是一种寄生在身体很像蚕儿(蝙蝠蛾)的鳞翅目幼虫体上的子囊菌。该菌在幼虫生长的早期侵入体内蔓延,以至最后夺去幼虫生命。冬季,土内只有死亡的幼虫,直到次年夏季气候温暖潮湿时,它才由幼虫的头部长出子实体,露出土面,状似野草。长出土面的棒状子实体内生有像植物种子的子囊孢子,条件适宜它就又会寄生虫体成为冬虫夏草。     

摇床速度、初始接种量和pH值对粉拟青霉生长的影响

 在2℃下同一种培养液中,研究了摇床转速、接种量和初始pH值对粉拟青霉菌丝生长量的影响.结果表明粉拟青霉是一种好气性真菌,摇床转速大于10r/min有利于该菌生长;接种量对菌丝最大产量影响不大,但是能够影响菌丝量达到最大值的时间;接种量大于%,有利于菌丝产量迅速达到最大值;粉拟青霉菌在pH值为3～10的培养基中都能够生长,生长过程中能够分泌代谢产物主动调节pH值,该菌在pH为～7的微酸环境中生长最快;液体发酵过程中粉拟青霉生长量与发酵时间的关系符合逻辑斯蒂生长模型.     

虫草菌多糖的部分理化性质研究

固体发酵虫草菌拟青霉(Paecilomycesmilitaris),分离提纯得糖含量为56%的虫草菌多糖,经薄层层析、气相色谱分析组成单糖分别为:阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖,物质的量的比为1∶2∶1∶3∶3,与有关文献报道的均有不同.经SephadexG-75凝胶柱分离纯化得糖含量为72%的主峰和一小峰2组分;用Sepharose4B凝胶柱测定分子量分别为57000和40000.     

“青藏”牌冬虫夏草

冬虫夏草,亦称夏草冬虫、虫草。它是子囊菌亚门麦菌科的冬虫草菌寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫体上,使被害幼虫在冬季钻入土内,逐渐变成菌核,夏季便从这种潜伏在土内的虫体或菌核上长出有柄的子座——"草"。这种虫、草的复合体就被称为冬虫夏草。冬虫夏草多产于我国四川、云南、青海、西藏、甘肃等省区海拔3000～4000m 的高山草甸。干燥的子座及虫体入药,性温,味甘。功能:补肺益肾,增强人体免疫能力,长服有抗衰养颜之功效。主治:虚劳、咳嗽、痰血气喘、腰疼、遗精等症。甘肃省和政县滋补堂有限公司生产的"青藏"牌盒装冬虫夏     

细脚拟青霉发酵液中核苷类物质的HPLC分析及脂肪酸成分含量测定

以冬虫夏草生药做对比,采用RP-HPLC、GC法对一株细脚拟青霉菌株发酵液冻干粉中核苷类物质、脂肪酸成分进行分析测定.结果表明,细脚拟青霉发酵液冻干粉中主要含有尿苷、鸟苷、腺苷、肌苷和胸苷5种核苷,其含量分别为3.630 6mg/g、5.547 2mg/g、0.864 3mg/g、0.462 8mg/g和0.231 6mg/g;不饱和脂肪酸是优势脂肪酸,以亚麻油酸、油酸为主,其相对含量分别为38.42%、27.66%.与冬虫夏草生药相比,细脚拟青霉发酵液冻干粉中核苷类物质的含量明显高于后者,不饱和脂肪酸含量略低于冬虫夏草生药.     

用线粒体Cytb基因序列探讨冬虫夏草寄主蝠蛾的系统进化关系

为探讨冬虫夏草寄主蝠蛾种属间的系统进化关系,采用CTAB法分别从18个冬虫夏草居群的虫草虫体头部和2种寄主蝠蛾中提取基因组DNA,PCR扩增获得冬虫夏草寄主线粒体Cytb基因片段序列.结合GenBank中的蝙蝠蛾科24种冬虫夏草寄主的同源序列,构建NJ系统树.结果表明,双栉蝠蛾属(Bipectilus)先于蝠蛾属(Hepialus)和类蝠蛾属(Hepialiscus)分化;蝠蛾属的冬虫夏草寄主种类众多形态各异,且均有特定的地理分布,蝠蛾属的种间遗传分化也较明显,蝠蛾属可能是多系起源;Cytb基因序列在冬虫夏草寄主蝠蛾种属间存在较丰富的变异,在蝠蛾属中除草地蝠蛾和金沙蝠蛾的该段序列完全一致外,其他种类蝠蛾种间变异率为0.23%—9.24%,Cytb基因序列可用于冬虫夏草寄主昆虫种的鉴定,但有必要获取更多种类的寄主昆虫来进一步验证.通过对冬虫夏草虫体头部提取的DNA进行PCR扩增获得其寄主蝠蛾Cytb基因序列的方法准确有效,有助于进一步获取更多的基因序列对更多的冬虫夏草居群和寄主种类进行系统发育、居群遗传结构及菌虫相互关系等研究.     

铜绿假单胞菌液体发酵产生絮凝现象的研究

对铜绿假单胞菌液体发酵产生的絮凝现象进行了研究。初步确定其由铜绿假单胞菌产生的生物膜引起,测得生物膜中多糖含量约为6.3%,蛋白质含量约为7.7%。考察了添加颗粒营养物质豆饼粉对絮凝现象的影响,分析了天然群体感应抑制剂水杨酸、丁香酚、儿茶素、姜黄素和大蒜提取物对生物膜和菌浓的影响以及群体感应淬灭酶对菌浓的影响。结果显示,添加颗粒营养物质对絮凝物影响不显著;天然群体感应抑制剂不能显著提高铜绿假单胞菌液体发酵菌浓,但对生物膜的分散具有一定作用;群体感应淬灭酶对铜绿假单胞菌液体发酵浓度无显著影响。     

棉铃虫致病菌分离、鉴定及高活力苏云金杆菌的筛选

从山东省棉田自然死亡的棉铃虫上分离到常见致病菌至少有8种,经鉴定为:苏云金杆菌(Bacillusthuringiensis)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、球孢白僵菌(Beauveriabassiana)、卵孢白僵菌(B.tenella)、青霉菌属真菌(Penicilliumspp.)、拟青霉属真菌(Paecilimycesspp.)和蛾霉属真菌(Nomuraespp.);得到一株对棉铃虫高毒的苏云金杆菌菌株Hu,其毒力比普遍使用的Bt菌系7216高,二者的LC50分别为15.1μg/mL和26.28μg/mL。蛾霉属真菌对棉铃虫有明显的拒食作用和杀伤作用,但人工培养时生长十分缓慢。     

马铃薯淀粉废水的生物治理研究

通过使用霉菌(黑根霉、黑曲霉、青霉、白地霉)和酵母菌(拟内孢霉酵母、产朊假丝酵母)两类菌种对马铃薯废水的处理效果进行实验研究,确定处理效果最佳的菌株为青霉菌和拟内孢霉酵母菌,发酵时间为5,d。通过正交实验得出,在50,m L马铃薯废水中分别接入2%,青霉菌和3%,拟内孢霉酵母菌后处理6,d,最终将马铃薯废水的COD值由16,286降至6,216,去除率为62.38%,。两种菌的添加量对COD去除率影响较大,呈负相关性。处理天数对COD去除率影响较小,呈正相关性。     

青藏高原冬虫夏草考察纪行

每年5月,当青藏高原的冰雪开始缓慢融化之际,在雪线附近矮小的灌木丛中、低矮的草甸或长有稀疏杂草的山坡之上,有一种神奇的虫菌结合体生物,顽强地从土壤中冒出紫红色的"芽尖",与"芽尖"相连的则是一条金黄色的鳞翅目幼虫,这就是被人们称为软黄金的生物——冬虫夏草(cordyceps sinensis)。冬虫夏草不是虫也不是草,它是由中华虫草真菌感染鳞翅目蝙蝠蛾属(Hepi- alus spp)幼虫后,形成虫型菌核的"虫"     

虫草属多元起源的分子生物学证据

测定了虫草属 (Cordyceps)代表种及其相关无性型菌 (anamorphicstate )核糖体rDNAITS区序列 ,并从国际分子生物学数据库中调取相关序列 ,以Phylip35分析软件构建序列距离矩阵和分子系统发育树图 ,结果表明 :虫草属各个种之间ITS区序列差别比较大 ,不能形成一个单系的类群 .冬虫夏草 ,古尼虫草 ,蛹虫草 ,大团囊虫草在系统发育上分别与丝孢纲(Hyphomycetes) ,束梗孢目 (Stilbelaes)的中国被毛孢 ,丝孢目 (Hyphomycetales)的黄绿绿僵菌 ,丝孢目 (Hyphomycetales)的球孢白僵菌 ,担子菌纲的Cyphomyrmexminutus非常接近 ,在树图上分别处于相对独立的分支 ;说明形态学上划分的虫草属并非一自然发生的类群 ,也说明了虫生真菌形态与基因水平进化的不一致性 .