高产S-腺苷蛋氨酸合成酶基因工程菌的构建

应用PCR技术,以大肠杆菌BL21（DE3）染色体DNA为模板,扩增得到S-腺苷蛋氨酸（SAM）合成酶基因。将所得基因连接至表达载体pET-22b（+）,利用T7强启动子进行转录,然后转化进E. coli BL21（DE3）表达菌株,构建出了具有高效表达SAM合成酶基因的基因工程菌。重组菌所表达的酶活为115U/g（以细胞干重计）。     

反相高效液相色谱法测定怀山药中腺苷的含量

采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)测定了怀山药中腺苷含量.应用Zorbax SBC18色谱柱,流动相为体积比=6∶94的甲醇-磷酸盐缓冲液(pH=6.5),流速0.3 mL/min,柱温25℃,检测波长260 nm.分析结果表明腺苷在0.075μg~0.45μg范围内线性关系良好,r=0.9998(n=6),平均加样回收率为90.60%,RSD=3.3%.该方法操作简单、峰形好、灵敏度高、重复性好、回收率高,可用于怀山药的质量控制和综合评价.     

S-腺苷蛋氨酸和苏氨酸对红霉素发酵产量及组分的影响

研究了在红霉素发酵培养基中添加不同的氨基酸和不同的氨基酸组合对红霉素发酵产量及组分的影响.经3 L自动发酵罐培养考查表明,添加0.4 g/L的S-腺苷蛋氨酸和0.3 g/L的苏氨酸,使红霉素的发酵单位和红霉素A含量分别提高了8.3%和13.1%,红霉素B和红霉素C的含量分别降低了49.5%和40.2%,产品质量完全符合2010版中国药典的要求.     

高效液相色谱法测定发酵液中有机酸

建立反相HPLC测定酒石酸、苹果酸、乳酸、醋酸柠檬酸的色谱条件,在ODS柱上以0.3mol/LKH_2PO_4(pH2.5)缓冲溶液作流动相,10min内完成以上五种有机酸的同时测定。检测限低于10ng/ml,线性范围0—800μg/ml。     

高效液相色谱法测定蛹虫草中腺苷的含量

建立了反相高效液相色谱法测定蛹虫草中腺苷含量的方法.在选定条件下,测定腺苷的线性范围为1.27～50.5μg/mL,检出限量为0.18ng.回收率平均值为103.4%,RSD为0.367%.该方法灵敏、快速、准确,对人工培植虫草中腺苷的进行了检测,结果满意.     

高效液相色谱内标法测定奥拉西坦的含量

建立高效液相色谱-内标法测定奥拉西坦的含量。以咖啡因为内标物,Luna NH2(4.6 mm×250 mm,5μm)为分析柱,乙腈∶水(95∶5)为流动相,检测波长220 nm,柱温30℃。结果表明该方法精密度和回收率良好,奥拉西坦质量浓度浓度在0.04～0.8(mg/mL)范围与其峰面积内呈良好线性关系,r=0.999 1。该法与凯氏定氮法测定结果一致,操作简便、快速、可靠,便于奥拉西坦的质量控制。     

高效液相色谱测定面粉中过氧化苯甲酰

目的研究采用高效液相色谱法(带紫外检测器)测定面粉中过氧化苯甲酰(BPO)含量。方法采用C18柱,以甲醇-水(80∶20,体积比)为流动相,检测波长235 nm,用保留时间定性,峰面积定量,采用标准曲线法求样品中过氧化苯甲酰的含量。结果BPO在1~10μg/mL范围内具有良好的线性关系(r=0.999 6),检出限为1.511 ng/mL,方法的回收率为95.8%~101.8%,相对标准偏差为0.33%~1.40%。结论该方法准确、快捷,可用于面粉中过氧化苯甲酰的测定,结果满意。     

高效液相色谱在我国食品分析与检测中的应用

高效液相色谱法(HPLC)是食品成份分离分析的一种极其重要的技术,因其超高的检测灵敏度和超低的检测限度而逐渐成为目前最热门的食品检测技术之一.HPLC技术在食品中分析各营养成分,食品添加剂、食品霉菌毒素和农兽药成分残留的检测等,以及与其它技术联合检测的应用情况.     

高效液相色谱研究润滑油

采用离了交换色谱分离ＱＦ级汽油机油在用油中的酸性含氧化合物。经红个及质谱鉴定得出了各类氧化物的主要类型及可能结构式，平均分子量。讨论了氧化物生成量与行车里程的关系。为汽油机油的评价提供了可靠依据。     

大鼠脑组织腺苷含量的HPLC分析

用高效液相色谱（ＨＰＬＣ）配紫外检测器，分离测定大鼠脑组织中腺苷含量。经实验确定以甲醇（１０％～６２％）、磷酸缓冲液（９０％～３８％）为流动相梯度洗脱，样品液中腺苷含量在２ｍｇ／Ｌ～１０ｍｇ／Ｌ范围内线性关系良好。加入标准样品的平均回收率为（９６６±２０）％。对６ｍｇ／Ｌ样品１０次重复测定结果的标准偏差为０１４，变异系数为３１％。对大鼠脑组织样品测定结果发现：与３～６月龄成龄鼠比较，１８～２０月龄老龄大鼠大脑皮层、海马、纹状体中腺苷含量分别增加了６６７％、３７２％和２７３％，不同脑区腺苷含量也有明显差异。结果提示不同脑区腺苷含量的随龄增加可作为研究衰老的一项指标；而中枢神经系统中随龄增长腺苷的堆积使Ａｃｈ释放受到抑制可能是出现记忆衰退等常见老年性功能障碍的一个重要原因     

高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)测定水体中孔雀石绿

实验旨在建立水样中孔雀石绿测定的液相色谱-荧光检测方法.水样中孔雀石绿采用二氯甲烷为溶剂超声波辅助提取,提取液离心分离后经MCX柱净化,并用5%氨水甲醇溶液洗脱,以Develosil C18色谱柱为分析柱,0.05 mol/L的乙酸铵(pH 4.5)-乙腈(20:80,V/V)为流动相,采用荧光检测器分析,外标法定量.结果表明:孔雀石绿在0.05μg~1.0μg/mL范围内线性良好,相关系数为0.9993,检出限为0.5μg/L.空白水样在加标孔雀石绿含量分别为1.0μg、2.5μg、5.0μg时,孔雀石绿的平均加标回收率为72.0%~86.4%,相对标准偏差为5.4%~7.5%.该方法准确度高、精密度良好,适用于水产养殖用水中孔雀石绿的测定.     

高效液相色谱—电化学检测法的应用

本文主要介绍了高效液相色谱－电化学（ＨＰＬＣ－ＥＣ）检测法的特点，及在国内１９９０￣１９９４年的应用情况。     

头发中内源性氢化可的松的高效液相色谱/串联质谱检测

基于高效液相色谱/串联质谱(HPLC/MS/MS)建立了一种检测头发中内源性氢化可的松含量的方法,并与高效液相色谱/荧光法(HPLC/FLU)的测定结果进行比较.头发样品(50 mg)经过清洗与研磨、甲醇提取和C18固相萃取后,在电喷雾(ESI)负离子模式和多反应监测(MRM)方式下进行定性,以外标法进行定量.方法的定...     

高效液相色谱检测冷饮中的靛蓝色素

建立高效液相色谱检测冷饮中靛蓝含量的方法,样品中的靛蓝经三氯甲烷超声波提取,提取液浓缩后用甲醇-异丙醇(1+1)溶解和定容,注入高效液色谱仪检测分析。在所采用的色谱条件下,靛蓝在1～30μg/ml间线性方程的相关系数可达0.9999,重现性的标准偏差为2.35%(n=6),精密度为0.23%,检出限为0.3mg/kg,加标回收率在84%～109%之间。该方法操作简单快捷,结果准确,令人满意。     

高效液相色谱法同时测定大鼠心肌组织中的磷酸肌酸和5种磷酸腺苷的含量

建立了高效液相色谱同时测定大鼠心肌组织中磷酸肌酸和ATP、ADP、AMP、辅酶I、环磷腺苷5种磷酸腺苷含量的方法,为相关药效研究提供条件。将大鼠心肌组织加入预冷的高氯酸溶液冰浴条件下匀浆,低温离心取上清液,调节pH值到中性再低温离心取上清液存于-20℃的冰箱,测定前再离心6min后进样2μL做HPLC分析。使用Ultimate AQ-C18色谱柱,流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液（10mmol/L,pH6.2）梯度洗脱。检测波长为210nm。柱温为15 oC。评价了方法的精密度、线性和回收率, 显示该方法测定结果可靠,操作简便。并用于实际样品的测定。     

离子色谱法测定1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸中1,4-丁二磺酸的含量

建立测定1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸中1,4-丁二磺酸含量的离子色谱方法.采用Ion PacAS14(250 mm×4 mm)色谱柱,以3.5 mmol/L Na2CO3和1.0 mmol/L Na HCO3为流动相,流速为2.0 m L/min,结果表明,1,4-丁二磺酸在5.115~204.6 mg/L(r=0.999 7)范围内有良好的线性响应关系,平均回收率为99.4%,RSD为0.8%,最低检出限为1.0 ng.本法可准确测定1,4-丁二磺酸腺苷蛋氨酸中1,4-丁二磺酸的含量,有效控制其质量.     

高效液相色谱测量啤酒中氨基酸

本文建立了测量啤酒氨基酸的有效方法,该方法使用高效液相色谱采用梯度洗脱测定啤酒中的氨基酸,结果回收率为99.2%,RSD为2.01%,表明本方法精密度高,稳定性好,可作为检测啤酒氨基酸有效方法。     

高效液相色谱的使用与维护

介绍了高效液相色谱的组成和液相色谱的适用范围.阐述了流动相、色谱柱、检测器等仪器的使用技术、应用以及日常维护.为液相色谱的初学者提供了一些液相色谱的知识和管理经验.     

新型荧光试剂用于儿茶酚胺类神经递质的高效液相色谱检测

利用新型荧光试剂1,3,5,7-四甲基-8-苯基-(4'-O-(N-琥珀酰亚胺乙酸酯))-二氟化硼-二吡咯甲烷(TMPAB-OSu)为柱前衍生化试剂,在氰基色谱柱上通过梯度洗脱对三种儿茶酚胺神经递质进行了分离和检测.以乙腈-水为溶剂,pH7.5的硼酸-硼砂缓冲溶液中在30℃条件下衍生反应5 min后获得稳定的荧光衍生产物.激发波长和发射波长分别为497 nm和509 nm,实现了儿茶酚胺柱前衍生检测,方法的重现性好、灵敏度高.儿茶酚胺的线性相关系数大于0.9970,检出限为5 nmol/L.     

高效液相色谱法快速检测中药复方炮制液中芍药苷含量

基于高效液相色谱-紫外检测器技术建立了中药复方水煎服炮制液中有效成分芍药苷含量的测定方法,样品经浸泡、武火煮沸、文火煎煮后,取5mL提取液用甲醇稀释定容,过膜后测试。该方法在0~0.06mg/mL浓度范围内呈良好线性（r〉0.999）,平均精密度为3.72%~6.07%（n=5）,在高、中、低三水平加标测得平均加标回收率88.12%~95.82%,测试液在24h内稳定性良好。该方法有效去除了样品基质的干扰因素,具有准确、快速、可靠的特点,适合于作为白芍质量控制的标准化方法。